八珍湯對小鼠造血功能影響的機(jī)制研究.pdf

1、該論文依照中醫(yī)"氣為血之帥"、"血為氣之母"的理論思維,運用現(xiàn)代生物檢測技術(shù),從宏觀整體到細(xì)胞、亞細(xì)胞、分子水平研究八珍湯對小鼠造血功能的影響.八珍湯源自《正體類要》,作為中醫(yī)古方氣血雙補的經(jīng)典方,由當(dāng)歸、川芎、白芍藥、甘草、熟地黃、人參、白術(shù)、茯苓組成.其藥理作用近年已多有報導(dǎo).臨床實驗表明:八珍湯不僅能治療白細(xì)胞減少癥,而且能改善嚴(yán)重的骨髓抑制.然而至今都未見有對其拮抗骨髓抑制在細(xì)胞水平和分子水平上的機(jī)理研究報道,為進(jìn)一步深入探討八

2、珍湯影響造血的作用機(jī)理,以期為中醫(yī)氣血理論的科學(xué)內(nèi)涵提供現(xiàn)代科學(xué)的實驗依據(jù),從而為臨床用藥提供更加詳細(xì)和深入的理論依據(jù),進(jìn)一步推動中醫(yī)氣血理論的發(fā)展.我們應(yīng)用現(xiàn)代分子生物學(xué)的理論較全面系統(tǒng)的闡明了八珍湯的補血作用.該實驗利用注射環(huán)磷酰胺(CY)等方法使小鼠造血功能受到抑制,造成血虛模型,觀察八珍湯對正常小鼠和血虛模型小鼠造血功能的影響.1.研究八珍湯對血虛模型小鼠和正常小鼠外周血象的影響調(diào)節(jié)作用.2.研究八珍湯對血虛模型小鼠和正常小鼠骨

3、髓細(xì)胞增殖的影響調(diào)節(jié)作用.3.采用脾結(jié)節(jié)計數(shù)法,研究八珍湯對血虛模型小鼠造血干細(xì)胞生成的影響.4.研究八珍湯對血虛模型小鼠和正常小鼠的CFU-GM集落數(shù)的影響調(diào)節(jié)作用.5.研究經(jīng)八珍湯體內(nèi)誘導(dǎo)制備的脾細(xì)胞條件培養(yǎng)液(SCM)、肺條件培養(yǎng)液(LCM)、腹腔巨噬細(xì)胞培養(yǎng)液(PMφCM)、肌條件培養(yǎng)液(SMCM)對血虛模型小鼠和正常小鼠的骨髓有核細(xì)胞增殖的影響調(diào)節(jié)作用.6.研究八珍湯對小鼠細(xì)胞分泌IL-1、IL-2、IL-3的影響.7.研究八

4、珍湯對脾條件培養(yǎng)液和腹腔巨噬細(xì)胞培養(yǎng)液中紅細(xì)胞生成素生成的影響.8.探討八珍湯對血虛模型小鼠的骨髓基質(zhì)細(xì)胞分泌TNF的影響調(diào)節(jié)作用.9.探討八珍湯對60Coγ射線照射小鼠骨髓細(xì)胞及脾細(xì)胞凋亡的影響.10.分別提取給藥組和空白組小鼠的總RNA,通過RT-PCR方法半定量檢測八珍湯對IL-1mRNA、IL-2mRNA、IL-3mRNA生成的影響.11.通過病理切片,鏡下觀察骨髓細(xì)胞的形態(tài)變化,并計算造血組織容量、脂肪組織容量、血竇容量和巨核