nrhTNFα對小鼠骨髓造血功能的影響.pdf

1、本文研究了不同劑量新型基因工程人腫瘤壞死因子a(nrhTNFa)對小鼠骨髓造血功能的影響及與化療藥物的協(xié)同作用，探討其毒性作用機理，為臨床用藥提供理論依據。 方法：nrhTNFa低劑量(125萬U/kg)、nrhTNFa中劑量(500萬U/kg)、nrhTNFa高劑量(2000萬U/kg)肌肉內注射，測定小鼠骨髓有核細胞(bonemarrownucleatedcells,BMNCs)計數、外周血白細胞(whitebloodcel

2、ls，WBCs)計數、血小板(platelets，PLTs)計數、血紅蛋白(HB)含量，瑞氏染色后觀察小鼠骨髓增生程度，并用流式細胞儀、瓊脂糖凝膠電泳、電鏡檢測小鼠骨髓細胞凋亡，用流式細胞儀分析小鼠骨髓細胞增殖周期變化。 結果：1、對外周血細胞計數及骨髓增生的影響：低劑量nrhTNFα組小鼠BMNCs和外周血細胞計數無明顯變化；中劑量nrhTNFα輕度減少BMNCs計數，但不影響外周血細胞計數；高劑量nrhTNFa可使小鼠BMN

3、Cs計數、WBCs計數和HB含量減少，但對PLTs計數無明顯影響；nrhTNFa3種劑量與環(huán)磷酰胺(CTX)聯(lián)合應用不影響CTX減少BMNCs計數和外周血細胞計數的作用。低、中劑量nrhTNFa不影響小鼠骨髓增生程度；高劑量nrhTNFa可抑制小鼠骨髓增生，但抑制作用明顯輕于環(huán)磷酰胺(CTX)，3種劑量nrhTNFa與CTX聯(lián)合應用時小鼠骨髓增生程度與單用CTX基本一致，說明nrhTNFa對CTX引起的骨髓抑制無協(xié)同作用。 2、

4、誘導骨髓細胞凋亡的作用：(1)電鏡觀察可見高劑量nrhTNFa組小鼠骨髓細胞出現(xiàn)細胞早期凋亡的特征。(2)流式細胞儀檢測結果顯示低、中、高劑量nrhTNFa組小鼠骨髓細胞的凋亡率分別為1.2％、2.4％、16.2％，正常對照組小鼠骨髓細胞的凋亡率為0.5％。(3)瓊脂糖凝膠電泳顯示出中、高劑量nrhTNFa組小鼠骨髓細胞DNA呈階梯狀分布的電泳條帶。這些指標證明高劑量nrhTNFα有誘導骨髓細胞凋亡的作用，中劑量nrhTNFα可能有誘導

5、骨髓細胞凋亡的作用，而低劑量nrhTNFα無凋亡誘導作用。 3、對骨髓細胞周期的影響：高劑量nrhTNFa作用于小鼠骨髓細胞后，細胞周期中G2/M期細胞增多，G0/G1期和S期細胞減少，說明高劑量nrhTNFα可作用于細胞有絲分裂期，抑制骨髓細胞的有絲分裂，而低、中劑量組小鼠骨髓細胞周期無明顯變化。 結論：1.低劑量nrhTNFa對小鼠骨髓造血功能無抑制作用。2.中劑量nrhTNFa對小鼠骨髓造血功能有輕微抑制作用。3.