黃芪根腐病拮抗芽孢桿菌鑒定及其生物農(nóng)藥開發(fā)潛力評價.pdf

1、本文針對黃芪根腐病菌的拮抗菌G88、G11和G10進行分類鑒定和生物農(nóng)藥開發(fā)潛力的評價研究。主要明確了這3株拮抗菌的分類地位和促生性能，并對菌株G88和G11產(chǎn)生的抑菌物質(zhì)進行了初步研究，優(yōu)化了發(fā)酵培養(yǎng)基，同時測定明確了上述兩株菌的土壤定殖力、遺傳穩(wěn)定性及菌株間親和性，為后續(xù)生物農(nóng)藥的開發(fā)奠定了基礎(chǔ)。具體結(jié)果如下:
　　1.通過經(jīng)典分類方法（形態(tài)、生理生化特征鑒定）和16S rDNA序列分析結(jié)合，明確了拮抗菌G88為萎縮芽孢桿菌(

2、Bacillus atrophaeus)，拮抗菌G10和G11為枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)。
　　2.通過測定溶磷、解鉀、固氮、分泌IAA、產(chǎn)HCN和淀粉酶活性等促生性能，明確了三株菌均具有良好的促生作用。
　　3.通過對菌株G88、G11進行抑菌機制初步研究及生物膜產(chǎn)生能力的測定，發(fā)現(xiàn)菌株G88、G11產(chǎn)生抑菌物質(zhì)的種類和能力大小有所差異，且菌株G88可以產(chǎn)生生物膜，G11則不能產(chǎn)生物膜。
　

3、　4.以Fusarium solani為指示菌，采用響應(yīng)面法對菌株G88和G11的發(fā)酵培養(yǎng)基進行了優(yōu)化，確定拮抗芽孢桿菌G88的發(fā)酵培養(yǎng)基為:21.16g/L葡萄糖、17.31g/L牛肉膏、20.64g/L花生餅粉、CaCO32.0g/L、NaCl0.7％;拮抗芽孢桿菌G11的發(fā)酵培養(yǎng)基為:9.72g/L葡萄糖、23.65g/L蛋白胨、豆餅粉6.49g/L、0.0008％FeSO4、CaCO32.0g/L。發(fā)酵培養(yǎng)基優(yōu)化前與優(yōu)化后相比發(fā)

4、現(xiàn)菌株G88抑菌活性增加了21.8％，菌株G11抑菌活性增加了8.1％。
　　5.通過對拮抗芽孢桿菌G88和G11進行氨芐青霉素標(biāo)記后，測定G88Ap和G11Ap的土壤定殖力，發(fā)現(xiàn)7d時菌株G88Ap和G11Ap在土壤中的定殖量最大，達1.18～1.73×106cfu/g;以后隨時間延長逐漸下降，30d時降至1.0～1.35×105cfu/g。據(jù)此，可以考慮每隔20d左右增加一次拮抗菌的施用。
　　6.傳代實驗結(jié)果顯示，菌株