板藍根根腐病病原鑒定及拮抗微生物的篩選.pdf

1、近年來，板藍根根腐病在一些產(chǎn)區(qū)發(fā)生逐年加重，成為板藍根生產(chǎn)的限制性障礙。本文以板藍根根腐病為研究對象，進行了病原菌的分離、致病性測定、種類鑒定、生物學特性研究以及拮抗微生物的篩選試驗。
　　 分別于2005年7月和2006年7月，從河北省唐山地區(qū)采集板藍根根腐病樣品108份，共分離獲得172株分離物，經(jīng)形態(tài)學鑒定屬于2屬3個種：茄腐鐮刀菌(Fusarium solani)、尖孢鐮刀菌(Fusarium oxysporum)和禾谷

2、絲核菌(Rhizoctonia cereadis)。茄腐鐮刀菌分離頻率最高(48.8％)，其次為尖孢鐮刀菌(44.2％)，禾谷絲核菌分離頻率最低(7％)。從每種菌中選取代表菌株，分別是：茄腐鐮刀菌菌株P4和P5，尖孢鐮刀菌菌株P1和禾谷絲核菌菌株P2。經(jīng)致病性測試，結(jié)果表明：菌株P4、P5致病性最強，發(fā)病率均為100％，病情指數(shù)在55以上；P1致病性較弱，發(fā)病率為89％，病情指數(shù)為36；P2的致病性最弱，發(fā)病率為67％，病情指數(shù)為31。

3、
　　 利用ITS序列分析從分子水平對菌株P1、P2、P4和P5進行了種類鑒定。結(jié)果表明：菌株P1與GenBank中尖孢鐮刀菌(DQ459007)的同源性為100％，P2與禾谷絲核菌(AJ242887)同源性為100％，P4與茄腐鐮刀菌(AY310442)的同源性為99％，P5與茄腐鐮刀菌(AJ608989)的同源性為100％。這證明了形態(tài)學鑒定的結(jié)果是正確的，也進一步說明了ITS序列對于真菌種間鑒定是可行的。在研究中還發(fā)現(xiàn)利用

4、ITS序列分析病菌種內(nèi)或種以下水平?jīng)]有發(fā)現(xiàn)差異或差異不明顯，因此ITS序列分析不能作為種內(nèi)或種以下水平鑒定和分類的依據(jù)。
　　 通過對Pl、P2、P4和P5四個菌株在不同溫度、pH值、碳源、氮源、相對濕度條件下菌絲生長、產(chǎn)孢量、孢子萌發(fā)以及致死溫度的研究。結(jié)果表明：菌株Pl在PDA培養(yǎng)基上菌絲生長、產(chǎn)孢量和孢子萌發(fā)最適溫度均為25℃，菌絲生長和分生孢子萌發(fā)最適pH值均為6，產(chǎn)孢量最適pH值為5，最適碳源為蔗糖，最適氮源為硝酸鈉，

5、在相對濕度低于90％孢子不萌發(fā)，分生孢子致死溫度為55℃。菌株P2在PDA培養(yǎng)基上最適生長溫度為30℃，在pH值為6時菌絲生長速度最快；最適碳源為淀粉，最適氮源為硝酸鈉。菌株P4和P5在PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)，菌絲生長和產(chǎn)孢量最適溫度均為30℃，孢子萌發(fā)最適溫度為25℃，菌絲生長、產(chǎn)孢量和分生孢子萌發(fā)最適pH值均為7，最適碳源為乳糖，最適氮源為硝酸鈉，在相對濕度低于90％時孢子不萌發(fā)，分生孢子致死溫度為50℃。
　　 本研究以板藍根

6、根腐病菌(P4菌株)為靶標菌，共篩選得到了73株拮抗放線菌和38株拮抗細菌。其中，菌株B4228和A4075對靶標病原菌的抑制作用較強。對B4228和A4075兩個菌株進行抑菌譜測定的結(jié)果表明，兩個菌株對番茄早疫病菌(Alternaria solani(Ellis et Martin)Jones et Grout.)、番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)、棉花枯萎病菌(Veticillium dahliae)、棉花立枯病菌(