黃稈烏哺雞竹稈色變異機理的初步研究.pdf

1、黃稈烏哺雞竹（Phyllostachys vivaxcv.aureocaulis）是應(yīng)用廣泛的一種觀賞竹，在自然生長過程中稈皮顏色表現(xiàn)為黃稈綠條紋，但其條紋的多少，寬窄和位置均隨機，有時甚至?xí)霈F(xiàn)近全復(fù)綠稈表型，具有較高的研究和欣賞價值。
　　為了深入探討黃稈烏哺雞竹稈色變異的機理，本課題對筍竹生長節(jié)律進(jìn)行了調(diào)查研究并收集了不同的竹稈材料和莖節(jié)進(jìn)行了分析，并利用熒光顯微鏡和激光掃描共聚焦顯微鏡等儀器觀測不同稈色部位色素分布差異及細(xì)

2、胞學(xué)差異。為深入研究其稈色變異分子機理，構(gòu)建了正反兩個抑制消減雜交文庫，進(jìn)行生物信息學(xué)分析，獲得的主要研究結(jié)果如下：
　　1、在實驗樣地中，黃稈烏哺雞竹中黃稈竹數(shù)量遠(yuǎn)大于復(fù)綠稈（約占86％），但兩種竹的生長特性無明顯差異。出筍期約16天，高生長歷時10天左右。
　　2、葉綠素a和b主要集中存在于表皮以下的基本組織中，維管束鞘周圍的細(xì)胞內(nèi)也有少量分布；黃稈材料橫切面葉綠素分布明顯少于復(fù)綠稈黃稈烏哺雞竹。但類胡蘿卜素含量在兩材料

3、間均僅有極少量的分布。
　　3、復(fù)綠稈材料顯微結(jié)構(gòu)相較于黃稈結(jié)構(gòu)清晰，葉綠體排列在細(xì)胞的邊緣，個數(shù)多體積大，葉綠體雙層外結(jié)構(gòu)膜和內(nèi)部基粒片層和基質(zhì)片層構(gòu)清晰完整且排列緊密。在細(xì)胞的邊緣能觀察到大量的嗜鋨顆粒。而黃稈材料的葉綠體外膜完整光合膜系統(tǒng)未形成。
　　4、復(fù)綠稈的表皮中含有約4.71%的脂質(zhì)，呈現(xiàn)淡綠或深綠色，部分有油脂光澤。而黃稈的表皮中含有3.78%的脂質(zhì)，呈黃色，質(zhì)感與綠色樣品一致。
　　5、正向及反向抑制

4、消減文庫各1350、1438條EST序列，對其進(jìn)行blastx聯(lián)配比對預(yù)測基因功能，正反庫各有578條、901條EST在NCBI無冗余nr數(shù)據(jù)庫有同源基因。其次，基因數(shù)目差異兩倍以上的GO條目主要有：刺激響應(yīng)、有膜細(xì)胞器、細(xì)胞組分、結(jié)合綁定、催化、發(fā)育。
　　6、生物信息學(xué)分析篩選出67條候選EST，經(jīng)qPCR驗證，獲得7條在黃、復(fù)綠稈中表達(dá)量差異在2倍以上的EST：Lhca1和Lhca6同源基因、類A20/AN1鋅指蛋白同源基因