高危HPV亞型感染患者端粒酶檢測(cè)對(duì)CIN診斷和隨訪的臨床意義.pdf

1、目的：
　　 1.探討高危人乳頭瘤病毒（HPV）感染患者中端粒酶檢測(cè)與宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN）診斷的相關(guān)性及臨床意義。
　　 2.探討端粒酶表達(dá)與人染色體端粒酶基因（hTERC）擴(kuò)增在CIN中的相關(guān)性。
　　 3.探討高危HPV亞型感染的CIN患者中，端粒酶檢測(cè)在隨訪中的臨床意義。
　　 方法：
　　 一.病例選擇
　　 選擇在2008年7月至2010年1月期間就診于濟(jì)南軍區(qū)總醫(yī)院婦科門診

2、的宮頸病變患者55例：其中25例CIN為研究組，包括CINⅠ8例，CINⅡ10例，CINⅢ7例；18例宮頸癌為陽(yáng)性對(duì)照組，包括Ⅰ b期1例，Ⅱ a期9例，Ⅱ b期8例；慢性宮頸炎12例為陰性對(duì)照組。患者年齡為17歲-70歲，中位年齡43.5歲。上述患者均以組織病理學(xué)為最終診斷標(biāo)準(zhǔn)。
　　 二.研究方法
　　 上述患者均采用免疫組織化學(xué)SP法檢測(cè)宮頸病理組織端粒酶活性，采用導(dǎo)流雜交基因芯片法進(jìn)行宮頸脫落細(xì)胞HPV亞型檢測(cè)，

3、并對(duì)25例CIN患者于高頻電環(huán)切術(shù)（LEEP）治療術(shù)前均行薄層液基細(xì)胞學(xué)檢查（TCT），治療后3個(gè)月及6個(gè)月時(shí)行脫落細(xì)胞TCT及HPV亞型檢測(cè)。并與已有的25例CIN患者宮頸脫落細(xì)胞hTERC基因檢測(cè)結(jié)果相對(duì)照[采用熒光原位雜交技術(shù)（FISH）檢測(cè)]。
　　 三.統(tǒng)計(jì)分析：
　　 1.端粒酶陽(yáng)性表達(dá)及HPV表達(dá)在CIN各級(jí)別的表達(dá)情況，均采用SPSS13.0軟件，運(yùn)用Kruskal-Wallis檢驗(yàn)或及Logistic回

4、歸方程。
　　 2.對(duì)比研究端粒酶的檢測(cè)結(jié)果與我科已有的hTERC基因的檢測(cè)結(jié)果在診斷CIN中的相關(guān)性，用SPSS13.0軟件，采用行×列的x2檢驗(yàn)。
　　 3.端粒酶陽(yáng)性表達(dá)的CIN患者的隨訪情況。
　　 以上三組研究，檢驗(yàn)水準(zhǔn)均為α=0.05，P<0.05存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果：
　　 1.本研究55例患者中，HPV亞型檢測(cè)結(jié)果：HPV高危亞型者31例，HPV陰性者24例。端粒酶活性表達(dá)

5、的結(jié)果：陽(yáng)性表達(dá)者35例，陰性者20例。hTERC基因異常擴(kuò)增表達(dá)情況（已有的結(jié)果）：25例CIN陽(yáng)性擴(kuò)增者16例，陰性9例。隨訪3月時(shí)HPV感染的患者陽(yáng)性1例，HPV陽(yáng)性1例，TCT結(jié)果異常2例，隨訪到6月時(shí)HPV陽(yáng)性及TCT結(jié)果異常各1例。
　　 2.端粒酶陽(yáng)性表達(dá)及HPV感染在CIN中各級(jí)的表達(dá)情況：端粒酶陽(yáng)性表達(dá)在組織病理學(xué)各分級(jí)中：宮頸浸潤(rùn)癌組分別與炎癥組、CINⅠ和CINⅡ/CINⅢ組比較，陽(yáng)性表達(dá)率增高，差異有統(tǒng)計(jì)

6、學(xué)意義（P<0.05）。CINⅡ/CINⅢ與炎性組比較，端粒酶陽(yáng)性表達(dá)率升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　 隨著組織病理學(xué)分級(jí)的遞升，高危HPV的陽(yáng)性表達(dá)率增加。組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ頸癌組中高危HPV感染率明顯高于炎癥組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。宮頸癌組與CINⅠ、CINⅡ組相比，高危型HPV感染的陽(yáng)性率增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　

7、 在高危HPV感染的組織中，端粒酶陽(yáng)性表達(dá)隨著組織病理學(xué)分級(jí)的升高而升高。其中宮頸癌及CINⅢ與CINⅠ比較，端粒酶陽(yáng)性表達(dá)率顯著增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。CINⅢ及宮頸癌與CINⅡ比較，端粒酶陽(yáng)性表達(dá)率顯著增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。HPV陽(yáng)性的人群中端粒酶陽(yáng)性表達(dá)率是HPV陰性人群的9.134倍。
　　 表5為端粒酶與高危HPV在CIN中陽(yáng)性率的比較，端粒酶在CINⅡ/CINⅢ中的陽(yáng)性率高于高危HP

8、V的陽(yáng)性率，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。從表6中可以看出，高危HPV感染及端粒酶全陽(yáng)性者為28例，這28例病理診斷為CIN及CIN以上病變，高危HPV感染陽(yáng)性但端粒酶表達(dá)陰性患者3例，其病理診斷為CINⅠ、CINⅡ及炎癥。端粒酶及HPV全陽(yáng)性在組織病理學(xué)分布情況與高危HPV感染陽(yáng)性但端粒酶陰性的組織病理學(xué)分布情況是不同的。兩者均陽(yáng)性患者的病理學(xué)結(jié)果為CIN及CIN以上病變，高達(dá)100％。提示：在高危HPV感染的患者中，如果其端粒酶

9、檢測(cè)為陽(yáng)性，其病理結(jié)果為CIN以上病變的可能性極高。
　　 3.對(duì)比研究端粒酶在CIN中的檢測(cè)結(jié)果與我科已有的hTERC基因的檢測(cè)結(jié)果：宮頸組織中端粒酶表達(dá)隨著CIN級(jí)別升高而升高，兩者相關(guān)系數(shù)為rs=0.811，hTERC基因擴(kuò)增隨著CIN級(jí)別的升高而升高，兩者相關(guān)系數(shù)為rs=0.934。從此表8可以看出，端粒酶及hTERC基因擴(kuò)增在CINⅠ、CINⅡ及CINⅢ組中具有高度一致性（P>0.05）。
　　 4.CINⅠ患

10、者8例，高危HPV及端粒酶均陽(yáng)性者2例，LEEP術(shù)后3月及6月隨訪時(shí)，HPV及TCT結(jié)果均正常。
　　 CINⅡ患者10例，高危HPV及端粒酶均陽(yáng)性者3例，1例端粒酶及HPV感染均陽(yáng)性的患者LEEP術(shù)后3月隨訪結(jié)果為：TCT為意義不明確的不典型鱗狀上皮細(xì)胞（ASC-US），高危HPV轉(zhuǎn)陰，此例患者術(shù)后6月時(shí)HPV陰性，TCT結(jié)果正常，余患者隨訪結(jié)果正常。
　　 CINⅢ患者7例，高危HPV及端粒酶均陽(yáng)性者6例，其中1例患

11、者術(shù)前端粒酶及高危HPV陽(yáng)性LEEP術(shù)后3月隨訪時(shí)，HPV16持續(xù)陽(yáng)性，TCT結(jié)果為ASC-US。術(shù)后6月隨訪時(shí)，這例患者HPV16持續(xù)陽(yáng)性，其TCT結(jié)果為ASC-US，余患者隨訪結(jié)果正常。
　　 結(jié)論：
　　 1.端粒酶陽(yáng)性表達(dá)在高危HPV亞型感染的CIN患者中隨著CIN級(jí)別的升高而表達(dá)升高。高危HPV亞型感染可能為引起端粒酶陽(yáng)性表達(dá)的危險(xiǎn)因素之一。
　　 2.端粒酶對(duì)高級(jí)別CIN的檢出率高于高危HPV，高危H