M001雄性不育滅鼠劑的生殖毒性研究及其在農(nóng)業(yè)鼠害防治方面的應(yīng)用.pdf

1、鼠害對(duì)國(guó)民經(jīng)濟(jì)的各個(gè)方面都有很大的危害，不僅對(duì)農(nóng)業(yè)、畜牧業(yè)、工業(yè)等造成巨大損失，而且還傳染許多疾病，危害人類(lèi)健康。目前，人類(lèi)對(duì)鼠害一般采用藥物毒殺的方法，隨著急性化學(xué)劇毒滅鼠劑的逐漸被淘汰，慢性抗凝血滅鼠劑被廣泛推廣應(yīng)用，成為我國(guó)目前最常用的滅鼠藥物，但是這種滅鼠劑污染生態(tài)環(huán)境，易發(fā)生二次中毒，危害人、畜健康，而且由于鼠類(lèi)具有較靈敏的嗅覺(jué)、味覺(jué)和一定的辯偽智能，部分鼠類(lèi)出血抽搐的死亡情況，常常引起鼠群的驚疑與拒食，因此這種滅鼠劑的實(shí)際滅

2、鼠效果較差，甚至導(dǎo)致鼠害更加嚴(yán)重，不能很好的解決防治和滅殺的結(jié)合問(wèn)題，也不能從根本上解決鼠害這一全世界面臨的重大難題。傳統(tǒng)的毒殺方法不可避免的出現(xiàn)抗藥性、適口性及滅鼠后鼠類(lèi)種群迅速反彈等問(wèn)題。另外人們環(huán)保意識(shí)和滅鼠觀念的發(fā)生轉(zhuǎn)變，從殺滅鼠類(lèi)向控制鼠害及降低種群密度轉(zhuǎn)化，為此探索一種行之有效的控制鼠害發(fā)生的新方法，即不育劑在控制鼠害中的應(yīng)用研究，被越來(lái)越多的學(xué)者所關(guān)注。張知彬(1995)基于Logistic模型．比較了滅殺和不育對(duì)控制鼠類(lèi)

3、數(shù)量效果的差別．發(fā)現(xiàn)在不考慮競(jìng)爭(zhēng)性繁殖干擾的情況下，使同樣比例的個(gè)體不育能夠達(dá)到一樣的滅殺效果；若考慮競(jìng)爭(zhēng)性繁殖干擾的作用，對(duì)于單配制和一雄多雌制的鼠類(lèi)，不育比滅殺的效果要更好。 在以往對(duì)膦氧氮丙啶(MAPO)進(jìn)行了大量的抗生育效果和機(jī)理的實(shí)驗(yàn)室研究的基礎(chǔ)上，我們首次提出將MAPO應(yīng)用于鼠類(lèi)防制上，并研究成功M001雄性不育滅鼠劑。本課題研究的目的在于提供一種以雄性不育劑MAPO為主要成分通過(guò)破壞鼠群生殖繁育能力，以達(dá)到長(zhǎng)期徹底

4、滅除鼠害目的的抗生育滅鼠劑，并提供配方和制備方法；同時(shí)進(jìn)一步探討和評(píng)價(jià)這類(lèi)雄性抗生育劑對(duì)鼠類(lèi)雄性生殖的毒性作用，對(duì)鼠類(lèi)種群數(shù)量的控制效果及其對(duì)非嚙齒類(lèi)動(dòng)物的不良影響。 我們采用雄性不育劑膦氧氮丙啶為M001雄性不育滅鼠劑的主要有效成份，此外還添加誘餌劑、糧食類(lèi)輔料和防腐防霉劑。各組分占M001雄性不育滅鼠劑總重量的含量百分比范圍分別是：MAPO0.2％—2％、誘餌劑10％—15％、糧食類(lèi)輔料85％—95％和防腐防霉劑0.1％—0

5、.3％。其中糧食類(lèi)輔料的各組份含量百分比范圍是：豆餅粉和／或花生餅粉10-25％、玉米粉和／或大麥粉和／或面粉10-15％、麩皮40-60％。誘餌劑的各組份重量百分比范圍是：魚(yú)粉為10-15％，油脂類(lèi)0.1-0.2％。防腐防霉劑可采用雙乙酸鈉或尼泊金乙酯。誘餌劑中的油脂類(lèi)可采用植物油和／或動(dòng)物油脂。 首先進(jìn)行M001雄性不育滅鼠劑的生殖毒性研究，這項(xiàng)研究包括六個(gè)具體試驗(yàn)：(1)小鼠適口性實(shí)驗(yàn)；(2)小鼠生育力試驗(yàn)；(3)小鼠精子

6、計(jì)數(shù)及活動(dòng)度檢測(cè)；(4)小鼠精子畸形試驗(yàn)；(5)小鼠大體解剖和病理學(xué)檢查；(6)小鼠多代繁殖實(shí)驗(yàn)。在小鼠適口性實(shí)驗(yàn)中，M001給藥組小鼠7天內(nèi)平均攝食M00128.23g，平均攝食系數(shù)為0.90；在小鼠生育力試驗(yàn)中，M001雄性不育劑對(duì)雄性小鼠的生育力有明顯的抑制作用，雄鼠低、中、高劑量組中均有雄性小鼠出現(xiàn)不育，交配后的受孕雌鼠的數(shù)量減少，說(shuō)明攝入M001雄性不育劑后雄性小鼠生育能力明顯下降。子宮剖查，受孕雌鼠的活胎數(shù)有所下降，受孕雌鼠

7、的吸收胎數(shù)增加，而且出現(xiàn)吸收胎的雌鼠數(shù)量也上升；在小鼠精子計(jì)數(shù)及活動(dòng)度檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中，雄鼠給予M001雄性不育劑后，附睪精子計(jì)數(shù)顯著減少，與對(duì)照組比較精子計(jì)數(shù)與攝入M001的多少呈劑量一效應(yīng)關(guān)系。并且這種差異一直持續(xù)到第四次精子計(jì)數(shù)檢查，即給藥后的第42天，說(shuō)明M001雄性不育劑對(duì)小鼠的精子發(fā)生和釋放產(chǎn)生顯著而不可逆的影響。M001給藥組與空白對(duì)照組精子活動(dòng)度比較有顯著性差別，主要是死精子數(shù)明顯上升。在小鼠精子畸形試驗(yàn)中，空白對(duì)照組畸形精子

8、百分比為為0.68％，低劑量組畸形精子為8.68％，中劑量組畸形精子為16.63％，高劑量組畸形精子為19.56％。M001雄性不育劑引起的精子形態(tài)改變主要發(fā)生在精子頭部，以無(wú)定形頭部居多數(shù)，其次分別是無(wú)鉤頭部畸形和尾折疊畸形。小鼠大體解剖和病理學(xué)檢查中，比較對(duì)照組動(dòng)物的組織病理學(xué)變化，M001給藥結(jié)束后小鼠的肝、腎、腦等臟器均未見(jiàn)到毒性組織病理學(xué)改變。光鏡下觀察睪丸組織切片，可見(jiàn)對(duì)照組睪丸曲細(xì)精管外觀飽滿(mǎn)，生精上皮細(xì)胞層排列整齊，管腔

9、內(nèi)充滿(mǎn)精子和各級(jí)精母細(xì)胞，而各M001給藥組睪丸曲細(xì)精管均有不同程度的萎縮，管間隙增大，生精上皮細(xì)胞層次減少，排列松散，管內(nèi)空腔增大，精子層稀疏。對(duì)照組附睪腔內(nèi)可見(jiàn)大量成熟的精子，M001給藥組鏡下可見(jiàn)精子密度下降，數(shù)量明顯減少，一些管腔內(nèi)無(wú)精子，附睪上皮未見(jiàn)明顯變化。M001給藥組前列腺腺體內(nèi)分泌物明顯少于對(duì)照組，提示M001雄性不育劑可能影響前列腺的內(nèi)分泌功能。 小鼠多代繁殖實(shí)驗(yàn)中，繁殖三代后，對(duì)比對(duì)照組和給予M001雄性不

10、育劑試驗(yàn)組鼠種群數(shù)量的變化，M001試驗(yàn)組鼠群數(shù)量增長(zhǎng)速度遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于對(duì)照組。經(jīng)計(jì)算，對(duì)照組三代小鼠平均繁殖率為90％，而M001雄性不育劑組平均繁殖率僅為35％。選擇在農(nóng)田、農(nóng)戶(hù)環(huán)境，于投餌后檢查鼠類(lèi)對(duì)該雄性不育劑的消耗水平，用不育劑處理后7個(gè)月測(cè)定鼠密度，解剖觀察成年鼠生殖能力(懷孕率、雄性精子存活)，測(cè)定繁殖率。M001在1區(qū)和2區(qū)農(nóng)田的拖食率分別為33.33％和35.56％，投放后7個(gè)月的鼠密度與自然對(duì)照區(qū)比較，相關(guān)密度指數(shù)(RPI

11、)值為0和33.3％。有較好的控制鼠類(lèi)種群密度效果。1區(qū)和2區(qū)滅效分別為100％和70％。對(duì)鼠類(lèi)生殖功能有比較明顯的影響，投藥區(qū)繁殖率可達(dá)到0％。未發(fā)生家禽、家畜以及野生禽類(lèi)的中毒事故。我們以鴿子為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究M001雄性不育劑對(duì)禽類(lèi)的不良影響，實(shí)驗(yàn)主要包括：(1)適口性試驗(yàn)；(2)血液生化學(xué)檢查；(3)鴿子器官大體解剖和病理學(xué)檢查。結(jié)果發(fā)現(xiàn)鴿子在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)對(duì)M001雄性不育顆粒劑的取食量在12天內(nèi)均低于玉米粒，12天內(nèi)平均攝食M001雄

12、性不育劑13.9g，平均攝食玉米粒55.8g，經(jīng)計(jì)算，攝食系數(shù)為O.24，低于毒餌適口性標(biāo)準(zhǔn)。在給藥結(jié)束的血液生化檢查中，給藥組血中BUN值與對(duì)照組比較增高，有一定的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其余各項(xiàng)生化指標(biāo)未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。給藥組和對(duì)照組體重、睪丸重量、睪丸臟器重量系數(shù)無(wú)明顯差異。顯微鏡下組織病理學(xué)檢查未見(jiàn)病理學(xué)改變。 研究證明，M001雄性不育劑對(duì)小鼠具有良好的適口性，有實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。實(shí)驗(yàn)室研究中，其生殖毒性作用明確，能夠有效的減緩鼠群數(shù)量