急性腦血管病一氧化氮合酶基因多態(tài)性及其表達研究.pdf

1、、l0些主型堇查堂旦墮墾蘭墮：Z。：玉：堡主蘭堡壘蘭t√急性腦血管病一氧化氮合酶基因多態(tài)性及其表達研究／博士研究生方玲j指導教師童萼塘教授(華中科技大學同濟醫(yī)學院附屬協(xié)和醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，武漢430022)■一●第一部分大鼠局灶性腦缺血及缺血再灌注后腦內(nèi)NOS的表達目的：了解局灶性腦缺血及缺血再灌注后腦內(nèi)三型一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase，NOS)的表達，為治療腦缺血提供理論依據(jù)。／方法：將60只雄性SD大鼠隨機分為假

2、手術組，永久性局灶性腦缺血15rain、30min、lh、2h、3h、6h、24h7組，及短暫性局灶性腦缺血2h再灌注15min、缺血2h再灌注22h組，每組動物6只。腦缺血模型采用線栓法中動脈梗塞模型。腦組織中nNOS，iNOS，eNOS蛋白的檢測采用在腦組織連續(xù)切片上行三型NOS的多克隆抗體SP免疫組化技術。結果：(1)永久性腦缺血6h內(nèi)腦內(nèi)三型NOS的表達情況：缺血1h內(nèi)缺血區(qū)紋狀體nNOS上調(diào)表達，缺血區(qū)內(nèi)毛細血管，小至中血管出

3、現(xiàn)eNOS表達。缺血3h可見缺血區(qū)內(nèi)eNOS陽性血管多于對側未缺血區(qū)。(2)永久性腦缺血亞急性期腦內(nèi)三型NOS的表達情況：腦缺血24h時，在梗塞區(qū)內(nèi)出現(xiàn)大量iNOS陽性的小膠質(zhì)細胞。(3)短暫性腦缺血2h再灌注腦內(nèi)三型NOS的表達：缺血2h再灌注15min，可見在缺血區(qū)的周圍有eNOS陽性細胞圍繞缺血區(qū)分布。再灌注22h，梗塞灶內(nèi)有iNOS陽性的小膠質(zhì)細胞侵潤。在梗塞周邊出現(xiàn)eNOS及iNOS陽性的神經(jīng)細胞及血管。結論：腦缺血不同時期腦

4、內(nèi)表達的NOS不同。(1)急性期出現(xiàn)nNOS及eNOS上調(diào)表達：(2)亞急性期出現(xiàn)iNOS的上調(diào)表達；(3)缺血再灌注早期出現(xiàn)eNOS上調(diào)表達，亞急性期出現(xiàn)iNOS及eNOS上調(diào)表達。提示nNOS可能與腦缺血早期神經(jīng)損傷機制有關，而iNOS與遲發(fā)性神經(jīng)損傷機制有關。因此在用NOS抑制劑治療時要注意根據(jù)缺血不同時期選擇用藥。關鍵詞：墮墊；里!整塾要窺矍蠶—壹絲童氫金酶；大鼠p～，_一‘M_p_口r’“～_d_H一，蘭型墊盔堂旦墮墾蘭墮壁主

5、堂垡笙苧PoiymorphismandexpressionofnitricoxidesynthasegeneinacutecerebrovasculardiseaseDoctoralCandidateFangLingSupervisorProfTongEtang(DeptofNeurologyUnionHospital，TongiMedicalColleage，HuaZhongScience&TechnologyUniversityWa

6、han430022)PartIExpressionofnitricoxidesynthaseafterfocalcerebralischemiaandreperfusioninratObjective：TostudytheimmunoreactiviWofthreeisoformsofnitricoxidesynthase(NOS)afterpermanentfocalcerebralischemiaandtransientischem

7、iareperfusioninratMethods：60maleSDratsweredividedintoshamoperated，focalcerebralischemiaandischemia—reperfusiongroupThefocalcerebralishemiagroupwassubdividedinto7groups：ischemiafor15min，30rain，lh，2h，3h，6hand24hThereperfus

8、ionwassubdividedinto2groups：ischemia2hplusreperfusion15minandischemia2hplusreperfusionfor22hPermanentischemiaandtransientischemiareperfusionwasinducedbyreversiblemiddlecerebra／arteryocclusionthroughmonofilamentnylonsutur

9、eTheexpressionofneuronalNOS(nNOS)，inducibleNOS(iNOS)andendothelialNOS(eNOS)weredetectedby3kindsofNOSpolycloneantibodySPimmuchemistytechniqueResults：(1)ExpressionofthreeisoformNOSinischemicbrainduringfirst6hours：theexpres