應(yīng)用分子細(xì)胞遺傳學(xué)技術(shù)檢測(cè)染色體數(shù)目及結(jié)構(gòu)異常.pdf

1、　　目的：應(yīng)用分子細(xì)胞遺傳學(xué)技術(shù)檢出人類染色體數(shù)目異常和結(jié)構(gòu)異常?！　》椒ǎ?.用著絲粒特異的α衛(wèi)星DNA克隆作為染色體計(jì)數(shù)探針，通過缺口翻譯引入生物素或地高辛等標(biāo)記物。以此標(biāo)記片段為探針，與中期染色體或間期細(xì)胞雜交，熒光顯微鏡鏡檢，熒光信號(hào)的數(shù)目就是染色體的個(gè)數(shù)。2.CGH在全基因組水平檢測(cè)染色體拷貝數(shù)的變化：以21-三體為模型，分別提取待檢和對(duì)照標(biāo)本的DNA，通過DOP-PCR擴(kuò)增全基因組DNA，F(xiàn)ITC-dUTP或Thodami

2、ne-dUTP直接標(biāo)記，取等量標(biāo)記的DNA混合，加Cot-1DNA抑制重復(fù)序列，與正常人的中期染色體雜交，根據(jù)熒光比率的變化來判斷染色體拷貝數(shù)的變化。3.微缺失/重復(fù)綜合征：用位點(diǎn)特異的BACDNA為探針。通過DOP-PCR擴(kuò)增及缺口翻譯間接標(biāo)記探針，和中期染色體或間期細(xì)胞雜交，熒光顯微鏡下細(xì)胞中熒光信號(hào)的數(shù)目就是相應(yīng)位點(diǎn)的個(gè)數(shù)。一個(gè)信號(hào)提示微缺失；2個(gè)信號(hào)正常；3個(gè)信號(hào)為微重復(fù)。4.染色體易位：染色體涂染探針的制備：通過激光捕獲顯微切