雌激素對(duì)DEN聯(lián)合NMOR誘導(dǎo)大鼠肝細(xì)胞癌形成的保護(hù)作用機(jī)制研究.pdf

1、肝細(xì)胞癌(Hepatocellularcarcinoma,HCC)是世界上最常見的惡性腫瘤,近年來全球HCC發(fā)病率正在逐步上升,每年新發(fā)HCC病例超過100萬,其中約50％發(fā)生在中國(guó)內(nèi)地。同時(shí),HCC也是世界第三位常見的腫瘤相關(guān)死亡原因,位列我國(guó)惡性腫瘤病死率的第二位。目前已知乙(HepatitisBVirus,HBV)、丙(HepatitisCVirus,HCV)型肝炎病毒感染、飲酒、暴露于黃曲霉素及氯乙烯是HCC發(fā)病的高險(xiǎn)因素,但對(duì)

2、于HCC發(fā)生發(fā)展的主要機(jī)制尚無明確結(jié)論。如何降低HCC逐步上升的高發(fā)病率,從而達(dá)到預(yù)防肝癌的目的仍是目前亟待解決的難題。
　　HCC有一個(gè)顯著的流行病學(xué)特點(diǎn):腫瘤發(fā)生率上的性別差異現(xiàn)象。據(jù)統(tǒng)計(jì),全球每年男性HCC發(fā)病率約為35.2/10萬,女性HCC發(fā)病率約為13.3/10萬,總體上男女性HCC發(fā)病率之比約為2:1~4:1,伴肝硬化的HCC男女發(fā)病率之比更是達(dá)到11:1。HCC發(fā)病率的性別差異現(xiàn)象很早就受到關(guān)注,早期研究主要從社會(huì)

3、環(huán)境因素的角度去解釋,如HBV或HCV的男性高感染率、男性飲酒和吸煙率高于女性等,近來遺傳與性激素的作用越來越受到重視。關(guān)于性激素與HCC發(fā)病率的性別差異現(xiàn)象間的關(guān)系至今尚無明確結(jié)論,分析國(guó)內(nèi)外新近文獻(xiàn)得出一個(gè)傾向性的結(jié)論就是雄激素在促進(jìn)HCC方面有一定作用,雌激素在抑制HCC方面有一定作用,但其中的具體機(jī)制還不清楚。若能在不顯著影響患者性功能和第二性征的前提下,利用性激素及其受體的表達(dá)變化進(jìn)行有效的干預(yù)從而預(yù)防肝癌的發(fā)生發(fā)展一直是有可

4、能取得突破的研究方向之一。
　　基于上述認(rèn)識(shí),本研究擬從HCC發(fā)病率的性別差異現(xiàn)象這一問題出發(fā),依托課題組先前建立的化學(xué)性誘導(dǎo)的高轉(zhuǎn)移炎癥相關(guān)性SD(Sprague–Dawley,SD)大鼠肝癌模型,探討性激素對(duì)HCC性別差異現(xiàn)象的影響,深入研究二乙基亞硝胺(diethylnitrosamine,DEN)聯(lián)合N-亞硝基嗎啉(N-nitrosomorpholine,NMOR)誘發(fā)大鼠形成HCC的雌激素保護(hù)作用機(jī)制,以期從理論上對(duì)肝癌

5、雌激素保護(hù)機(jī)制有新的認(rèn)識(shí),為臨床上預(yù)防HCC發(fā)生發(fā)展提供治療靶點(diǎn)和新的方法。
　　本實(shí)驗(yàn)首先研究了DEN聯(lián)合NMOR誘發(fā)大鼠形成HCC的肝炎-肝硬化-肝癌三部曲發(fā)生過程并采用去勢(shì)法初步探討性激素對(duì)此過程的影響;之后我們進(jìn)一步驗(yàn)證了生理性雌激素可能保護(hù)HCC發(fā)生發(fā)展轉(zhuǎn)移的假說;在此基礎(chǔ)上,應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(Enzyme-linkedImmunosorbentAssay,ELISA)、免疫組化(Immunohistochemist

6、ry,IHC)、逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(reversetranscription-polymerasechainreaction,RT-PCR)方法從蛋白和基因兩個(gè)水平檢測(cè)分析雌激素在保護(hù)HCC發(fā)生發(fā)展過程中差異表達(dá)的某些關(guān)鍵生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子,深入分析DEN聯(lián)合NMOR誘發(fā)肝癌過程中雌激素保護(hù)作用的分子機(jī)制。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:
　　1.本課題組建立的DEN聯(lián)合NMOR誘發(fā)大鼠肝癌模型為典型炎癥相關(guān)性肝癌模型,符合肝臟炎性病變

7、-肝硬化-肝癌三部曲發(fā)展歷程,與人類肝癌的自然發(fā)生過程相似,是研究肝癌發(fā)病原因、癌變過程的良好動(dòng)物模型。此動(dòng)物模型再度體現(xiàn)了HCC發(fā)病率的性別差異現(xiàn)象并提示雌激素對(duì)于HCC的保護(hù)作用。
　　2.生理劑量的雌激素能顯著抑制化學(xué)性誘導(dǎo)的炎癥相關(guān)性SD大鼠HCC的生成、發(fā)展和轉(zhuǎn)移。
　　3.雌激素保護(hù)DEN聯(lián)合NMOR誘導(dǎo)大鼠HCC發(fā)生發(fā)展的作用機(jī)制與改善肝臟及腫瘤炎癥微環(huán)境有關(guān),通過ERα介導(dǎo)下調(diào)HGF和IL-6的轉(zhuǎn)錄、表達(dá)是其