雌激素對DEN聯(lián)合NMOR誘導(dǎo)大鼠肝細(xì)胞癌形成的保護作用機制研究.pdf

1、肝細(xì)胞癌(Hepatocellularcarcinoma,HCC)是世界上最常見的惡性腫瘤,近年來全球HCC發(fā)病率正在逐步上升,每年新發(fā)HCC病例超過100萬,其中約50％發(fā)生在中國內(nèi)地。同時,HCC也是世界第三位常見的腫瘤相關(guān)死亡原因,位列我國惡性腫瘤病死率的第二位。目前已知乙(HepatitisBVirus,HBV)、丙(HepatitisCVirus,HCV)型肝炎病毒感染、飲酒、暴露于黃曲霉素及氯乙烯是HCC發(fā)病的高險因素,但對

2、于HCC發(fā)生發(fā)展的主要機制尚無明確結(jié)論。如何降低HCC逐步上升的高發(fā)病率,從而達到預(yù)防肝癌的目的仍是目前亟待解決的難題。
　　HCC有一個顯著的流行病學(xué)特點:腫瘤發(fā)生率上的性別差異現(xiàn)象。據(jù)統(tǒng)計,全球每年男性HCC發(fā)病率約為35.2/10萬,女性HCC發(fā)病率約為13.3/10萬,總體上男女性HCC發(fā)病率之比約為2:1~4:1,伴肝硬化的HCC男女發(fā)病率之比更是達到11:1。HCC發(fā)病率的性別差異現(xiàn)象很早就受到關(guān)注,早期研究主要從社會

3、環(huán)境因素的角度去解釋,如HBV或HCV的男性高感染率、男性飲酒和吸煙率高于女性等,近來遺傳與性激素的作用越來越受到重視。關(guān)于性激素與HCC發(fā)病率的性別差異現(xiàn)象間的關(guān)系至今尚無明確結(jié)論,分析國內(nèi)外新近文獻得出一個傾向性的結(jié)論就是雄激素在促進HCC方面有一定作用,雌激素在抑制HCC方面有一定作用,但其中的具體機制還不清楚。若能在不顯著影響患者性功能和第二性征的前提下,利用性激素及其受體的表達變化進行有效的干預(yù)從而預(yù)防肝癌的發(fā)生發(fā)展一直是有可

4、能取得突破的研究方向之一。
　　基于上述認(rèn)識,本研究擬從HCC發(fā)病率的性別差異現(xiàn)象這一問題出發(fā),依托課題組先前建立的化學(xué)性誘導(dǎo)的高轉(zhuǎn)移炎癥相關(guān)性SD(Sprague–Dawley,SD)大鼠肝癌模型,探討性激素對HCC性別差異現(xiàn)象的影響,深入研究二乙基亞硝胺(diethylnitrosamine,DEN)聯(lián)合N-亞硝基嗎啉(N-nitrosomorpholine,NMOR)誘發(fā)大鼠形成HCC的雌激素保護作用機制,以期從理論上對肝癌

5、雌激素保護機制有新的認(rèn)識,為臨床上預(yù)防HCC發(fā)生發(fā)展提供治療靶點和新的方法。
　　本實驗首先研究了DEN聯(lián)合NMOR誘發(fā)大鼠形成HCC的肝炎-肝硬化-肝癌三部曲發(fā)生過程并采用去勢法初步探討性激素對此過程的影響;之后我們進一步驗證了生理性雌激素可能保護HCC發(fā)生發(fā)展轉(zhuǎn)移的假說;在此基礎(chǔ)上,應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附測定(Enzyme-linkedImmunosorbentAssay,ELISA)、免疫組化(Immunohistochemist

6、ry,IHC)、逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(reversetranscription-polymerasechainreaction,RT-PCR)方法從蛋白和基因兩個水平檢測分析雌激素在保護HCC發(fā)生發(fā)展過程中差異表達的某些關(guān)鍵生長因子和細(xì)胞因子,深入分析DEN聯(lián)合NMOR誘發(fā)肝癌過程中雌激素保護作用的分子機制。
　　實驗結(jié)果表明:
　　1.本課題組建立的DEN聯(lián)合NMOR誘發(fā)大鼠肝癌模型為典型炎癥相關(guān)性肝癌模型,符合肝臟炎性病變

7、-肝硬化-肝癌三部曲發(fā)展歷程,與人類肝癌的自然發(fā)生過程相似,是研究肝癌發(fā)病原因、癌變過程的良好動物模型。此動物模型再度體現(xiàn)了HCC發(fā)病率的性別差異現(xiàn)象并提示雌激素對于HCC的保護作用。
　　2.生理劑量的雌激素能顯著抑制化學(xué)性誘導(dǎo)的炎癥相關(guān)性SD大鼠HCC的生成、發(fā)展和轉(zhuǎn)移。
　　3.雌激素保護DEN聯(lián)合NMOR誘導(dǎo)大鼠HCC發(fā)生發(fā)展的作用機制與改善肝臟及腫瘤炎癥微環(huán)境有關(guān),通過ERα介導(dǎo)下調(diào)HGF和IL-6的轉(zhuǎn)錄、表達是其