序貫中藥凝膠的制備及其對實驗性大鼠宮頸柱狀上皮異位的病理形態(tài)學(xué)影響.pdf

1、由黃連、黃柏、乳香、沒藥、兒茶、冰片組成的中藥處方是治療患者宮頸柱狀上皮異位(又稱宮頸糜爛)經(jīng)驗方,在臨床使用多年且療效顯著。此中藥處方在使用過程中,要求患者對中藥處方先進行煎煮,應(yīng)用其水煎液對陰道沖洗,以到達治愈宮頸糜爛的效果。由于使用過程繁瑣,使得患者用藥依從性下降,影響療效。利用現(xiàn)代藥劑學(xué)技術(shù)將此中藥處方制成合適的制劑,既方便患者給藥,又規(guī)范傳統(tǒng)中藥制劑,本研究即以此目的,開展初步研究。黃連、黃柏的有效成分為生物堿類物質(zhì),兒茶中含

2、有鞣質(zhì),鞣質(zhì)與生物堿會發(fā)生化學(xué)反應(yīng)生成鞣質(zhì)生物堿沉淀,為避免兒茶的加入降低黃連、黃柏有效成分的提取,本研究將黃連、黃柏、乳香、沒藥、冰片組方(簡稱治糜組方),制成治糜溫度敏感型陰道凝膠(簡稱治糜溫敏凝膠),將兒茶制成兒茶凝膠,并對兩凝膠序貫治療效果進行藥理學(xué)評價。黃連、黃柏在此治糜組方中起主要治療作用,鹽酸小檗堿是二者的主要生物活性物質(zhì),因此研究中首先建立了鹽酸小檗堿的HPLC分析方法,測定以浸泡時間、每次加水量、煎煮時間為考察因素時鹽

3、酸小檗堿的提取結(jié)果。研究結(jié)果表明,治糜組方中鹽酸小檗堿最佳提取工藝為:黃連20 g、黃柏10 g、乳香15g、沒藥15 g,加水浸泡60 min,第1次煎煮15 min,第2次加水適量煎煮30 min,第3次加14倍水量煎煮2 h。治糜溫敏凝膠是將治糜組方的水提液制成以泊羅沙姆407(P407)為凝膠基質(zhì)的溫度敏感凝膠。在研究中首先考察了殼聚糖溶液對治糜組方的絮凝澄清工藝,在獲得穩(wěn)定的治糜組方水提澄清液后,繼續(xù)考察殼聚糖溶液、P407、

4、聚乙二醇2000(PEG2000)和泊羅沙姆188(P188)對治糜溫敏凝膠的膠凝溫度和pH的影響。研究結(jié)果顯示:殼聚糖絮凝治糜中藥提取液工藝為:藥液pH值為藥物原液pH值(pH4.6),絮凝溫度:70℃,CTS溶液濃度:2％,CTS溶液體積:10.0-40.0 mL。殼聚糖溶液、PEG2000和P188對治糜溫敏凝膠的特性有顯著影響。治糜溫敏凝膠膠凝溫度隨著2%殼聚糖溶液的用量、PEG2000質(zhì)量分數(shù)和P188的質(zhì)量分數(shù)的增加而升高,

5、呈現(xiàn)正性相關(guān);PEG2000和P188用量的增加不會顯著改變同一質(zhì)量分數(shù)的P407治糜溫敏凝膠的pH值,殼聚糖用量的增加會改變P407治糜溫敏凝膠的pH值。在進一步P188/P407治糜溫敏凝膠膠凝性質(zhì)和體外釋放研究中發(fā)現(xiàn),鹽酸小檗堿在治糜溫敏凝膠中的釋放速率受凝膠的溶蝕速率影響,二者均遵循零級動力學(xué)方程,P407和P188的濃度是影響治糜溫敏治糜溫敏凝膠膠凝溫度、凝膠黏度、溶蝕速率以及藥物釋放速率等性質(zhì)的主要因素。治糜溫敏凝膠理想的處

6、方為治糜中藥提取濃縮液50.0 mL,冰片0.08 g,2%殼聚糖溶液20.0 mL,P40718.0g,P1883.0 g,甘油10.0 mL,加蒸餾水至100 mL,其膠凝溫度為24.0℃,體溫下凝膠強度大,體外可持續(xù)釋放藥物在10.5 h左右。兒茶素和表兒茶素為兒茶中的主要有效成分,研究首先建立兒茶素和表兒茶素的HPLC分析方法,測定超聲波提取法以提取溶劑中乙醇的濃度、料液比、提取溫度和超聲時間為考察因素時獲得的兒茶提取液中有效成

7、分。通過正交試驗獲得兒茶超聲波法提取最佳提取工藝為:料液比為1:12,乙醇濃度為50%,超聲時間為35 min,提取溫度為60℃。兒茶凝膠是以卡波姆為凝膠基質(zhì)的水凝膠。實驗中對兒茶凝膠的外觀、pH值、穩(wěn)定性進行質(zhì)量評價,對凝膠的體外釋藥性及大鼠抗炎藥效進行研究。結(jié)果表明:卡波姆濃度的變化對兒荼素體外釋放速率變化影響不大,兒茶凝膠處方確定為:卡波姆9400.5 g,甘油5.0 g,兒茶提取物40.0 ml,三乙醇胺0.5 mL,加水適量至

8、50.0 g。按處方制備的兒茶凝膠細膩光潔、呈半透明狀,體外釋放藥物快,作用時間長;對角叉菜膠所致的大鼠足趾腫脹具有明顯的抑制作用,抗炎作用時間與凝膠劑量總的呈正性相關(guān)趨勢。最后,本研究還就治糜溫敏凝膠聯(lián)合兒茶凝膠對實驗性大鼠宮頸和陰道病理形態(tài)學(xué)影響作了進一步研究,結(jié)果發(fā)現(xiàn)治糜溫敏凝膠、兒茶凝膠序貫聯(lián)合應(yīng)用,能有效治療實驗性宮頸糜爛大鼠。實驗性宮頸糜爛大鼠,經(jīng)過兩制劑治療后,陰道和子宮頸組織病變較模型對照組減輕,病變處組織已經(jīng)開始修復(fù),