穴位埋線和穴位注射對糖尿病大鼠胰島素抵抗和胰島形態(tài)學(xué)影響的實驗性研究.pdf

1、目的：本實驗運用多種現(xiàn)代科研技術(shù)和手段，研究穴位埋線療法和穴位注射療法對糖尿病大鼠的炎癥標志物的作用以及對胰島素抵抗的影響,并觀察胰島形態(tài)學(xué)變化，初步探討這兩種穴位療法對抑制糖尿病炎癥反應(yīng)和改善胰島素抵抗等方面的作用機制,比較兩種穴位療法治療效果的差異，為針灸治療糖尿病的臨床運用探索新方法，并為進一步的深入研究提供實驗依據(jù)。
　　方法：
　　1.分組：選擇體重為200g左右的成年雄性SD大鼠50只(由中南大學(xué)實驗動物中心提供

2、)，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后進入實驗。隨機選取10只為正常對照組，另外40只用鏈脲佐菌素腹腔注射造模，正常對照組給予普通飼料喂養(yǎng)，模型組、穴位埋線組和穴位注射組，給予高糖高脂飼料喂養(yǎng)4周后一次性腹腔注射鏈脲佐菌素溶液(STZ)35mg/kg，于72h后（期間大鼠禁食不禁水8h），剪尾采血測得空腹血糖，重復(fù)測量2次。空腹血糖值大于11.1mmol／L者視為造模成功的2型糖尿病模型大鼠。除去造模失敗的7只，剩余33只大鼠均視為造模成功，然后隨機的將

3、它們分成模型組(9只，實驗中血糖過高死亡2只)，穴位埋線組(10只，實驗中血糖過高死亡1只)，穴位注射組(11只)。
　　2.治療：正常對照組和模型組都不予以治療，穴位埋線組和穴位注射組參照華興邦等研制的“大鼠穴位圖譜”[1]，分別選取大鼠雙側(cè)足三里、胃脘下俞和三陰交穴。穴位埋線組操作方法：首先確定大鼠雙側(cè)足三里、胃脘下俞及三陰交穴的位置，用75％醫(yī)用酒精對穴位進行消毒后，將醫(yī)用外科羊腸線剪至0.3-0.5cm不等長度,從7號埋線

4、針前端穿入，用右手拇、食、中指捏住針管，針與皮膚成15度角快速向下進針，將羊腸線推注進脂肪層和肌肉層之間，然后頂著針芯退針，退出埋線針后，針孔處消毒棉球按壓止血。每周埋線1次，連續(xù)治療并觀察4周。穴位注射組操作方法:選取大鼠雙側(cè)足三里、胃脘下俞和三陰交穴,用75%醫(yī)用酒精常規(guī)皮膚消毒后,用注射針快速向下進針刺入皮下,經(jīng)回抽無回血后,將藥液緩慢注入相應(yīng)穴位,每穴注射劑量為0.1ml,隔天1次,4周為一療程。
　　3.檢測：于治療前和

5、治療結(jié)束后分別對各組大鼠進行剪尾采血，然后用快速血糖儀測得空腹血糖，待整個治療療程結(jié)束后采用腹主動脈采血法采血，離心后取上層血清，再采用放射免疫法檢測血清胰島素、用Elisa法檢測血清腫瘤壞死因子(TNF-α)、瘦素和脂聯(lián)素等指標，探討穴位療法在治療2型糖尿病及胰島素抵抗中的作用及其機制，為此療法治療2型糖尿病的臨床運用提供科學(xué)的實驗依據(jù),并對大鼠胰腺組織HE染色，觀察胰腺組織病理形態(tài)學(xué)改變。
　　結(jié)果：
　　1.對糖尿病大

6、鼠的一般治療作用:穴位埋線組和穴位注射組大鼠經(jīng)治療后飲食量、飲水量和體重等“三多一少”癥狀較模型組明顯改善。穴位埋線組和穴位注射組經(jīng)治療后空腹血糖水平較治療前顯著下降;相較于模型組，穴位埋線組和穴位注射組經(jīng)治療后血清胰島素水平顯著的降低，而胰島素敏感指數(shù)則明顯的升高，而胰島素抵抗指數(shù)則較模型組下降。且以上各指標均提示穴位注射組降糖作用優(yōu)于穴位埋線組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　2.對糖尿病大鼠血清腫瘤壞死因子(TNF-α)、瘦素和脂聯(lián)

7、素的影響:相較于模型組，穴位埋線組和穴位注射組糖尿病大鼠的血清腫瘤壞死因子（TNF-α）、瘦素水平降低，脂聯(lián)素水平升高，差異有顯著性，提示其治療2型糖尿病的機制可能與其影響血清炎癥因子水平有關(guān),且穴位注射組治療作用稍優(yōu)于穴位埋線組，差異有顯著性。
　　3.胰島形態(tài)學(xué)觀察:正常對照組大鼠可見胰島邊界清晰，胰島島形豐滿完整，島內(nèi)細胞胞漿飽滿，胰島細胞數(shù)量較多且排列規(guī)整;模型組大鼠胰島邊界不清，體積明顯減小，島內(nèi)細胞數(shù)量減少且排列紊亂;

8、可見細胞空泡變性；穴位埋線組和穴位注射組均有不同程度的改觀，邊界較模型組清晰，島內(nèi)細胞數(shù)量較模型組增多，排列也較其均勻緊密，胞漿較其豐富，可見少量空泡變性。
　　結(jié)論：
　　1.兩種穴位療法對糖尿病大鼠均有較好的治療作用，能明顯改善其多飲、多食、多尿及消瘦等癥狀，并可降低其血糖水平和血清胰島素水平，進而提高組織對胰島素的敏感性和減輕胰島素抵抗。
　　2.兩種穴位療法均能夠通過影響糖尿病大鼠炎癥因子（降低血清腫瘤壞死(T

9、NF-α)和瘦素水平，升高血清脂聯(lián)素水平），進而改善機體炎癥反應(yīng)，減輕胰島素抵抗。
　　3.兩種穴位療法均可通過使2型糖尿病模型大鼠的胰島β細胞的數(shù)量增加，從而減少它的凋亡，最終來使胰島β細胞功能得到一定的改善。
　　4.穴位埋線法和穴位注射法療效差異有統(tǒng)計學(xué)意義，穴位注射法比穴位埋線法在降低血糖，減輕胰島素抵抗以及改善胰島β細胞功能等方面效果更為顯著。
　　5.以上結(jié)果為穴位療法更好的運用于臨床來治療糖尿病及其并發(fā)癥