穴位埋線和穴位注射對(duì)糖尿病大鼠胰島素抵抗和胰島形態(tài)學(xué)影響的實(shí)驗(yàn)性研究.pdf

1、目的：本實(shí)驗(yàn)運(yùn)用多種現(xiàn)代科研技術(shù)和手段，研究穴位埋線療法和穴位注射療法對(duì)糖尿病大鼠的炎癥標(biāo)志物的作用以及對(duì)胰島素抵抗的影響,并觀察胰島形態(tài)學(xué)變化，初步探討這兩種穴位療法對(duì)抑制糖尿病炎癥反應(yīng)和改善胰島素抵抗等方面的作用機(jī)制,比較兩種穴位療法治療效果的差異，為針灸治療糖尿病的臨床運(yùn)用探索新方法，并為進(jìn)一步的深入研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：
　　1.分組：選擇體重為200g左右的成年雄性SD大鼠50只(由中南大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供

2、)，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后進(jìn)入實(shí)驗(yàn)。隨機(jī)選取10只為正常對(duì)照組，另外40只用鏈脲佐菌素腹腔注射造模，正常對(duì)照組給予普通飼料喂養(yǎng)，模型組、穴位埋線組和穴位注射組，給予高糖高脂飼料喂養(yǎng)4周后一次性腹腔注射鏈脲佐菌素溶液(STZ)35mg/kg，于72h后（期間大鼠禁食不禁水8h），剪尾采血測(cè)得空腹血糖，重復(fù)測(cè)量2次?？崭寡侵荡笥?1.1mmol／L者視為造模成功的2型糖尿病模型大鼠。除去造模失敗的7只，剩余33只大鼠均視為造模成功，然后隨機(jī)的將

3、它們分成模型組(9只，實(shí)驗(yàn)中血糖過(guò)高死亡2只)，穴位埋線組(10只，實(shí)驗(yàn)中血糖過(guò)高死亡1只)，穴位注射組(11只)。
　　2.治療：正常對(duì)照組和模型組都不予以治療，穴位埋線組和穴位注射組參照華興邦等研制的“大鼠穴位圖譜”[1]，分別選取大鼠雙側(cè)足三里、胃脘下俞和三陰交穴。穴位埋線組操作方法：首先確定大鼠雙側(cè)足三里、胃脘下俞及三陰交穴的位置，用75％醫(yī)用酒精對(duì)穴位進(jìn)行消毒后，將醫(yī)用外科羊腸線剪至0.3-0.5cm不等長(zhǎng)度,從7號(hào)埋線

4、針前端穿入，用右手拇、食、中指捏住針管，針與皮膚成15度角快速向下進(jìn)針，將羊腸線推注進(jìn)脂肪層和肌肉層之間，然后頂著針芯退針，退出埋線針后，針孔處消毒棉球按壓止血。每周埋線1次，連續(xù)治療并觀察4周。穴位注射組操作方法:選取大鼠雙側(cè)足三里、胃脘下俞和三陰交穴,用75%醫(yī)用酒精常規(guī)皮膚消毒后,用注射針快速向下進(jìn)針刺入皮下,經(jīng)回抽無(wú)回血后,將藥液緩慢注入相應(yīng)穴位,每穴注射劑量為0.1ml,隔天1次,4周為一療程。
　　3.檢測(cè)：于治療前和

5、治療結(jié)束后分別對(duì)各組大鼠進(jìn)行剪尾采血，然后用快速血糖儀測(cè)得空腹血糖，待整個(gè)治療療程結(jié)束后采用腹主動(dòng)脈采血法采血，離心后取上層血清，再采用放射免疫法檢測(cè)血清胰島素、用Elisa法檢測(cè)血清腫瘤壞死因子(TNF-α)、瘦素和脂聯(lián)素等指標(biāo)，探討穴位療法在治療2型糖尿病及胰島素抵抗中的作用及其機(jī)制，為此療法治療2型糖尿病的臨床運(yùn)用提供科學(xué)的實(shí)驗(yàn)依據(jù),并對(duì)大鼠胰腺組織HE染色，觀察胰腺組織病理形態(tài)學(xué)改變。
　　結(jié)果：
　　1.對(duì)糖尿病大

6、鼠的一般治療作用:穴位埋線組和穴位注射組大鼠經(jīng)治療后飲食量、飲水量和體重等“三多一少”癥狀較模型組明顯改善。穴位埋線組和穴位注射組經(jīng)治療后空腹血糖水平較治療前顯著下降;相較于模型組，穴位埋線組和穴位注射組經(jīng)治療后血清胰島素水平顯著的降低，而胰島素敏感指數(shù)則明顯的升高，而胰島素抵抗指數(shù)則較模型組下降。且以上各指標(biāo)均提示穴位注射組降糖作用優(yōu)于穴位埋線組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　2.對(duì)糖尿病大鼠血清腫瘤壞死因子(TNF-α)、瘦素和脂聯(lián)

7、素的影響:相較于模型組，穴位埋線組和穴位注射組糖尿病大鼠的血清腫瘤壞死因子（TNF-α）、瘦素水平降低，脂聯(lián)素水平升高，差異有顯著性，提示其治療2型糖尿病的機(jī)制可能與其影響血清炎癥因子水平有關(guān),且穴位注射組治療作用稍優(yōu)于穴位埋線組，差異有顯著性。
　　3.胰島形態(tài)學(xué)觀察:正常對(duì)照組大鼠可見(jiàn)胰島邊界清晰，胰島島形豐滿完整，島內(nèi)細(xì)胞胞漿飽滿，胰島細(xì)胞數(shù)量較多且排列規(guī)整;模型組大鼠胰島邊界不清，體積明顯減小，島內(nèi)細(xì)胞數(shù)量減少且排列紊亂;

8、可見(jiàn)細(xì)胞空泡變性；穴位埋線組和穴位注射組均有不同程度的改觀，邊界較模型組清晰，島內(nèi)細(xì)胞數(shù)量較模型組增多，排列也較其均勻緊密，胞漿較其豐富，可見(jiàn)少量空泡變性。
　　結(jié)論：
　　1.兩種穴位療法對(duì)糖尿病大鼠均有較好的治療作用，能明顯改善其多飲、多食、多尿及消瘦等癥狀，并可降低其血糖水平和血清胰島素水平，進(jìn)而提高組織對(duì)胰島素的敏感性和減輕胰島素抵抗。
　　2.兩種穴位療法均能夠通過(guò)影響糖尿病大鼠炎癥因子（降低血清腫瘤壞死(T

9、NF-α)和瘦素水平，升高血清脂聯(lián)素水平），進(jìn)而改善機(jī)體炎癥反應(yīng)，減輕胰島素抵抗。
　　3.兩種穴位療法均可通過(guò)使2型糖尿病模型大鼠的胰島β細(xì)胞的數(shù)量增加，從而減少它的凋亡，最終來(lái)使胰島β細(xì)胞功能得到一定的改善。
　　4.穴位埋線法和穴位注射法療效差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，穴位注射法比穴位埋線法在降低血糖，減輕胰島素抵抗以及改善胰島β細(xì)胞功能等方面效果更為顯著。
　　5.以上結(jié)果為穴位療法更好的運(yùn)用于臨床來(lái)治療糖尿病及其并發(fā)癥