血小板膜αⅡb突變對(duì)αⅡbβ3轉(zhuǎn)運(yùn)及表達(dá)的影響.pdf

1、 本課題選擇在血小板無(wú)力癥患者中新發(fā)現(xiàn)的αⅡb1292～1307del、αⅡbA446P及αⅡbG747P這3種突變進(jìn)行體外表達(dá)，并用EGFP標(biāo)記突變?chǔ)立騜后進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)定位研究，旨在明確這些突變對(duì)αⅡbβ3的合成、轉(zhuǎn)運(yùn)和表達(dá)的影響；探討其引起血小板無(wú)力癥的分子發(fā)病機(jī)制并初步分析相應(yīng)突變對(duì)αⅡbβ3的結(jié)構(gòu)與功能的影響?！　榱诉M(jìn)行體外轉(zhuǎn)染和表達(dá)實(shí)驗(yàn)，本研究采用overlap法在野生型的αⅡb表達(dá)質(zhì)?；A(chǔ)上構(gòu)建了pcDNA3.1-α

2、Ⅱb1292～1307del、pcDNA3.1-αⅡbA446P及pcDNA3.1-αⅡbG747P表達(dá)質(zhì)粒。測(cè)序結(jié)果表明這3種突變?chǔ)立騜表達(dá)質(zhì)粒除了目標(biāo)突變外無(wú)其它DNA序列錯(cuò)誤。αⅡb亞基突變的研究需要與GPⅢa亞基共表達(dá)，本研究建立了可以穩(wěn)定表達(dá)GPⅢa亞基的CHO細(xì)胞株?！　”狙芯勘砻鳓立騜1292～1307del、αⅡbA446P及αⅡbG747P這3種突變均不同程度地影響了αⅡbβ3復(fù)合物的胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)，是血小板無(wú)力癥的分子發(fā)