血小板GPⅡb-Ⅲa受體拮抗劑對動脈粥樣硬化炎癥因子的影響.pdf

1、背景與目的: 血小板聚集功能和血小板膜糖蛋白(glycoprotein，GP)是判斷血小板活化狀態(tài)的重要指標。血小板活化常應(yīng)用于出血性疾病、血液高凝狀態(tài)和血栓性疾病的診斷和療效判斷。既往研究認為：血小板聚集功能增高可引起并加速動脈內(nèi)膜損傷、動脈粥樣硬化過程。 本研究觀察健康兔，應(yīng)用第三代抗血小板藥物GPⅡb/Ⅲa受體拮抗劑替羅非班和精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-絲氨酸肽(Arg-Gly-Asp-Ser，RGDS)抑制血小板聚

2、集，觀察GP Ⅱb/Ⅲa受體拮抗劑濃度和抑制率的量效關(guān)系。隨后建立兔高脂血癥AS動物模型，觀察AS形成過程中血小板活化指標、炎癥因子的改變。再通過體內(nèi)、外實驗觀察GPⅡb/Ⅲa受體拮抗劑替羅非班對血漿炎癥因子的影響，明確在以上過程中各炎癥因子的變化，探討GP Ⅱ b/Ⅲa受體拮抗劑替羅非班抗血小板聚集以外的效應(yīng)，為該類藥物的合理應(yīng)用提供理論依據(jù)。本研究分4部分：第1部分血小板GP Ⅱ b/Ⅲa受體拮抗劑對兔血小板聚集的影響第2部分高膽固

3、醇血癥動脈粥樣硬化形成時血漿炎癥因子的改變第3部分血小板GP Ⅱ b/Ⅲa受體拮抗劑對血漿炎癥因子的影響(體外試驗)第4部分血小板GP Ⅱ b/Ⅲa受體拮抗劑替羅非班對血漿炎癥因子的影響(體內(nèi)實驗)方法1.采用新西蘭大白兔，空腹12小時后耳緣靜脈采血，分別以二磷酸腺苷(adenosine diphosphate，ADP)和凝血酶作為誘聚劑，觀察不同濃度GP Ⅱb/Ⅲa受體拮抗劑RGDS和替羅非班對血小板聚集率的影響，以最大聚集率[pla

4、telet aggregation maximum，PAG(M)]作為觀察指標。 結(jié)論: 1. RGDS和替羅非班均能夠濃度依賴性抑制ADP誘導(dǎo)的血小板聚集；RGDS能夠濃度依賴性抑制0.03U/L的凝血酶誘導(dǎo)的血小板聚集；替羅非班能夠濃度依賴性的抑制0.03U/L和0.06U/L的凝血酶誘導(dǎo)的血小板聚集。 2.高脂血癥時血小板聚集功能增高；血漿P-選擇素、IL-6、IL-1β、TNF-α明顯升高；淋巴細胞IL-

5、6/mRNA、IL-1β/mRNA、TNF-α/mRNA的表達升高。 3.體外ADP和凝血酶(0.03U/L)均可以使兔血漿P．選擇素的生成增多，并可以被IC50、IC80濃度的替羅非班或RGDS抑制；IC2O濃度的替羅非班也可抑制ADP誘導(dǎo)的P-選擇素生成增多。體外ADP對兔血漿IL-6、IL-1β、TNF-a的生成無影響。 4.體外凝血酶(0.03U/L)可使兔血漿IL-6、IL-1β生成增多，并可被IC50、IC8

6、0濃度的替羅非班或RGDS抑制；體外凝血酶(0.03U/L)對兔血漿TNF-α無影響。 5.體外單獨應(yīng)用替羅非班或RGDS對兔血漿P-選擇素、IL-6、IL-1β、TNF-α無影響。 6.本研究中，高于12.50mg/L濃度的替羅非班靜脈滴注可以抑制兔血小板聚集功能，減少兔血漿P-選擇素、IL-1β、IL-6、TNF-α的生成；減少淋巴細胞IL-1β/mRNA、IL-6/mRNA、TNF-a/mRNA的表達。 7