REGγ和TGFβ、p53及其下游基因相關(guān)性的研究.pdf

1、REGr，又稱11S蛋白酶體激活因子，它不僅可以降解細(xì)胞周期蛋白激酶抑制因子p21，在細(xì)胞周期調(diào)控中發(fā)揮重要作用，而且還能夠降解抑癌基因表達(dá)產(chǎn)物p53，參與腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程。TGFβ，即轉(zhuǎn)化生長因子β，能夠上調(diào)細(xì)胞內(nèi)的p21和p15，抑制細(xì)胞生長，也參與細(xì)胞周期的調(diào)控。P53作為腫瘤發(fā)生的第一大因素，和它下游基因一起參與腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程。由此可見，它們均是參與細(xì)胞周期調(diào)控的重要因子。然而，到目前為止，關(guān)于REGγ和TGFβ，REGγ

2、和p53下游基因關(guān)系的研究還未見報道。
　　 在關(guān)于REγ經(jīng)和TGFβ的研究中，我們發(fā)現(xiàn)TGFβ能夠抑制REGγ的表達(dá)，REGγ和TGFβ下游的細(xì)胞周期蛋白激酶抑制因子p21和p15之間存在相互作用，這些結(jié)果表明TGFβ誘導(dǎo)的細(xì)胞生長抑制受REGγ的調(diào)控，TGFβ誘導(dǎo)其下游基因p21和p15的活化與REGγ功能抑制有關(guān)。該研究證實了REGγ和TGFβ之間確實存在相互作用。
　　 P53作為細(xì)胞內(nèi)的重要抑癌基因之一，其下游

3、基因也與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。通過已有的基因芯片數(shù)據(jù)庫的元分析，我們在結(jié)腸、甲狀腺、肝癌和肺癌四種腫瘤組織里篩選出了一些和REGγ表達(dá)具有相關(guān)性的基因，主要包括：p53下游基因，與myc相關(guān)的基因，和一些其他癌基因。采用分子生物學(xué)實驗，我們再次證明了這些基因中70％和REGγ呈現(xiàn)明顯相關(guān)性。我們重點集中在p53下游基因，研究發(fā)現(xiàn)：29個p53下游基因與REGγ相關(guān)，相關(guān)性基因高達(dá)80％。其中，備受大家關(guān)注的重要基因BAX、PTEN、G

4、ADD45，CDK2，均被發(fā)現(xiàn)和REGγ的表達(dá)呈現(xiàn)顯著相關(guān)性。而且，部分基因與REGγ的相關(guān)性存在腫瘤特異性，部分基因REGγ的相關(guān)性受p53活性的影響。該部分研究不僅證實了REGγ和多種腫瘤組織中p53下游基因的表達(dá)具有相關(guān)性，而且暗示了REGγ與p53下游基因可能存在相互作用，這為進(jìn)一步探索REGγ的靶蛋白提供了新思路。
　　 REGγ能夠增加MDM2介導(dǎo)p53的降解作用，但是REGγ和p53是否存在直接的相互作用尚不清楚。

5、我們通過實驗證明了REGγ和p53可以直接相互作用，相互作用位點在100-290AA這個片段。該結(jié)果表明除了通過MDM2，REGγ或許能夠直接介導(dǎo)p53降解，因此細(xì)胞內(nèi)可能存在p53降解的新機制。但是，REGγ和p53相互作用的更精確位點需要進(jìn)一步研究。
　　 本課題初步探討了REGγ和TGFβ、p53及其下游基因的關(guān)系，證實了：TGFβ誘導(dǎo)的細(xì)胞生長抑制受REGγ的調(diào)控，80％的p53下游基因與REGγ存在相互作用，REGγ能