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文檔簡介
1、利用微衛(wèi)星(simple sequence repeat,SSR)分子標記技術(shù),結(jié)合基于分離群體分析法(bulked-segregant analysis,BSA)的隱性群體分析法(reccesive-class analysis,RCA),對含有目的基因的直立穗親本的TC1F1和F22個群體的95個直立穗個體和608個彎穗個體進行了連鎖分析。獲得了兩個位于第9染色體上的候選連鎖標記RM107和RM566。遺傳距離分別為14.4cM和1
2、1.5cM,并且位于該目的基因的兩側(cè)。為了確認這個結(jié)果,又在RM107和RM566之間選取了16個在直彎親本間有多態(tài)性的微衛(wèi)星標記RM434,RM1189,RM7048,RM3600,RM410,RM242,RM278,RM201,CYZ-4,CYZ-5,CYZ-6,CYZ-10,CYZ-11和CYZ-12進行了連鎖分析。研究表明:Ep1(t)位點被界定在側(cè)翼標記CYZ-6和CYZ-11之間0.14cM的遺傳區(qū)域,另外1個標記CYZ-1
3、2則與Ep1(t)位點完全共分離。
為了構(gòu)建Ep1(t)位點的物理圖,把與Ep1(t)基因連鎖的標記都通過BIA方法著陸于上述參考序列上,并由此構(gòu)建了該目的基因位點的重疊群。由參考序列可以推測Ep1(t)位點被界定于側(cè)翼標記CYZ-6和CYZ-11之間43kb的范圍內(nèi)。進一步通過BIA分析,確認了在該區(qū)域內(nèi)具有8個開放閱讀框。
本研究為目的基因Ep1(t)的最終克隆奠定了很好的基礎,同時也可把與目的基因Ep1
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