調(diào)節(jié)性T細(xì)胞和TGF-β1在自身免疫性甲狀腺疾病中的作用.pdf

1、目的：研究初發(fā)AITD患者及正常人外周血中CD4+CD25+Tregs的數(shù)量和相關(guān)基因Foxp3的表達(dá)及TGF-β1水平，探討其在AITD發(fā)病機(jī)制中的作用及相關(guān)關(guān)系，并為免疫調(diào)控治療策略提供有價值的實驗依據(jù)。方法：研究對象為50例初發(fā)AITD患者，其中GD組30例，HT組20例，正常對照組20例。各組之間性別、年齡差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測外周血單個核細(xì)胞(PBMC)中CD4+T細(xì)胞數(shù)量及CD4+CD25+Tregs占CD4

2、+T細(xì)胞的百分比；提取細(xì)胞總RNA，用RT-PCR法擴(kuò)增Foxp3基因、擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳，用quantiscan分析軟件分析條帶，以擴(kuò)增產(chǎn)物條帶灰度與β-actin擴(kuò)增產(chǎn)物條帶灰度之比值表示Foxp3 mRNA的表達(dá)水平；ELISA法檢測外周血血清中TGF-β1含量；電化學(xué)發(fā)光法測定各組血清甲狀腺激素水平及TPOAb、TGAb、TRAb的水平。實驗數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行分析，兩組之間

3、比較用兩組獨立樣本的t檢驗，多組之間比較采用單因素方差分析，相關(guān)分析用pearson線性相關(guān)分析方法，以P<0.05為標(biāo)準(zhǔn)確定有統(tǒng)計學(xué)差異。結(jié)果：初發(fā)GD組和HT組CD4+T細(xì)胞占PBMC的百分比分別為(40.74±8.08)％、(35.59±7.93)%，與正常對照組(38.12±7.29)%相比無顯著性差異(P>0.05)；AITD兩組Tregs/CD4+T細(xì)胞百分比分別為(15.94±5.02)%、(14.42±3.06)%，均明

4、顯低于正常對照組的(23.23±4.72)%(P<0.05)。初發(fā)GD組和HT組患者外周血Foxp3 mRNA表達(dá)水平分別為(0.17±0.05)和(0.14±0.05)，與正常對照組(0.27±0.06)比較均顯著降低(P<0.05)。初發(fā)GD組和HT組病人外周血血清中TGF-β1水平分別為(138.71±27.21)ng/L和(112.47±22.16)ng/L，與正常對照組(88.71±14.69)ng/L比較均明顯升高(P<0.