溫度、光照對(duì)滸苔生長(zhǎng)及其硝酸還原酶活力的影響.pdf

1、本文以近幾年黃海海域綠潮中的優(yōu)勢(shì)藻種—滸苔（Ulva prolifera）為研究對(duì)象，采用一次性培養(yǎng)方法，研究了營(yíng)養(yǎng)鹽充足的條件下，溫度或光照單個(gè)環(huán)境因子的變化對(duì)滸苔生長(zhǎng)和細(xì)胞內(nèi)硝酸還原酶活力(NRA)的影響以及滸苔生長(zhǎng)與細(xì)胞內(nèi)NRA之間的內(nèi)在聯(lián)系。同時(shí)結(jié)合各生長(zhǎng)條件下所對(duì)應(yīng)的滸苔體內(nèi)硝酸鹽、亞硝酸鹽、體內(nèi)碳氮比及培養(yǎng)液中硝酸鹽濃度的變化，初步分析了不同生長(zhǎng)環(huán)境條件下滸苔對(duì)硝酸鹽的吸收及同化過程，以期探討溫度、光照對(duì)滸苔生長(zhǎng)影響的內(nèi)在作

2、用機(jī)制。本文主要得到以下結(jié)論:
　　(1)本文從研磨提取時(shí)間、酶促反應(yīng)恒速時(shí)間、硝酸鹽濃度、還原型輔酶I(NADH)濃度及吩嗪硫酸甲酯(PMS)用量等方面確定了離體法測(cè)定滸苔細(xì)胞內(nèi)NRA的實(shí)驗(yàn)條件，并確定了采用水楊酸比色法測(cè)定滸苔體內(nèi)硝酸鹽的具體測(cè)定方法。條件實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，滸苔NRA的具體測(cè)定條件為:研磨提取時(shí)間為6min，酶促反應(yīng)時(shí)間為30min，KNO3濃度為10mmol/L，NADH濃度為0.36mmol/L，PMS體積為5

3、0μL。當(dāng)采用水楊酸比色法測(cè)定滸苔體內(nèi)硝酸鹽濃度時(shí)，顯色劑水楊酸濃硫酸溶液的最佳用量為0.4mL。
　　(2)在10℃～30℃的溫度范圍內(nèi)，滸苔均能生長(zhǎng)，且均能迅速進(jìn)入快速生長(zhǎng)期，說明滸苔能快速適應(yīng)環(huán)境中溫度的變化。以日均相對(duì)增長(zhǎng)率及滸苔濕重表征的滸苔生長(zhǎng)狀況表明，15℃是滸苔生長(zhǎng)的最適溫度。在培養(yǎng)期間，低溫下(10～20℃)滸苔體內(nèi)的NRA表現(xiàn)出先升高后降低的趨勢(shì)，并且NRA的變化較細(xì)胞內(nèi)硝酸鹽濃度的變化存在1天的滯后;而高溫條

4、件下（25℃及30℃），滸苔體內(nèi)的NRA表現(xiàn)出在培養(yǎng)初期即快速下降至低值的變化趨勢(shì)。不同培養(yǎng)溫度下，滸苔NRA隨時(shí)間的變化也導(dǎo)致了滸苔體內(nèi)POC/PON隨培養(yǎng)時(shí)間的不同變化:低溫組呈現(xiàn)先降低后升高的變化趨勢(shì)，而高溫組則為先升高后快速降低再升高的變化情況。各溫度下，滸苔體內(nèi)亞硝酸鹽、硝酸鹽含量與NRA呈正相關(guān)。五個(gè)溫度下NRAmax大小順序?yàn)?5℃＞10℃＞20℃＞25℃≥30℃，NRA平均值大小順序?yàn)?0℃≈15℃＞20℃＞25℃≥30

5、℃，這與不同溫度下滸苔的生長(zhǎng)好壞狀況順序基本一致，且NRA平均值與日均相對(duì)增長(zhǎng)率呈正相關(guān)，說明溫度可以通過調(diào)控NRA進(jìn)而調(diào)控滸苔的生長(zhǎng)狀況。
　　(3)當(dāng)光強(qiáng)為75～150W m-2時(shí)，滸苔能正常生長(zhǎng);而光強(qiáng)為0～22.5W·m-2時(shí)，滸苔幾乎無法生長(zhǎng)。除光強(qiáng)為0W·m-2外，其余實(shí)驗(yàn)組滸苔細(xì)胞內(nèi)NRA隨培養(yǎng)時(shí)間均呈先增加至最大值后逐漸降低的趨勢(shì)，光照較強(qiáng)的兩實(shí)驗(yàn)組(150和112.5W·m-2)滸苔體內(nèi)NRA總體較低，加之滸苔的

6、光合速率較高，導(dǎo)致POC/PON較高，而光照較弱實(shí)驗(yàn)組（75、22.5和0W·m-2）滸苔體內(nèi)NRA雖然較高，但由于受光照的限制，導(dǎo)致POC/PON隨時(shí)間的延長(zhǎng)變化不大。光強(qiáng)為22.5～150W·m-2時(shí)，滸苔體內(nèi)硝酸鹽、亞硝酸鹽含量與NRA呈正相關(guān)。不同光強(qiáng)實(shí)驗(yàn)組NRAmax大小順序?yàn)?5W·m-2＞22.5W·m-2＞150W·m-2＞112.5W·m-2＞0W·m-2，NRA平均值大小順序?yàn)?W·m-2≈22.5W·m-2＞75