N-cadherin、E-cadherin和p63在宮頸癌中的表達(dá)及相關(guān)性.pdf

1、研究背景:
　　宮頸癌(Cervicalcancer)是嚴(yán)重威脅女性健康的惡性腫瘤之一,其病因尚不明確,目前認(rèn)為與早婚、性生活過(guò)早及混亂、早年分娩、多產(chǎn)、吸煙、經(jīng)濟(jì)情況差、地理環(huán)境、病毒感染等因素有關(guān),其中最主要的因素是高危型人乳頭瘤病毒(highrisk-humanpa pilloma virus,HR-HPV)的慢性持續(xù)性感染,但具體分子機(jī)制尚未完全闡釋清楚。近年來(lái),由于人們健康意識(shí)的上升,針對(duì)子宮頸鱗癌癌前病變的普查較以往更

2、加普及,子宮頸鱗癌的發(fā)生率較以往有下降趨勢(shì),但在調(diào)查中發(fā)現(xiàn)越來(lái)越多的年輕女性被診斷患有子宮頸鱗癌,所以對(duì)子宮頸鱗癌的研究應(yīng)該更加受到關(guān)注。一般來(lái)說(shuō),宮頸癌出現(xiàn)典型癥狀兩到三個(gè)月后,大部分患者就己發(fā)展為癌癥晚期。對(duì)于宮頸癌來(lái)說(shuō),早期診斷,是宮頸癌的治療和預(yù)后取得良好效果的重要條件。
　　近些年來(lái)對(duì)宮頸癌的基礎(chǔ)研究進(jìn)展很快,我們了解到宮頸癌的發(fā)病過(guò)程比較復(fù)雜,是關(guān)系到多種原因和多種基因共同參與的復(fù)雜過(guò)程,同時(shí),有許多新的觀點(diǎn)在研究過(guò)程

3、中被提了出來(lái)。
　　上皮細(xì)胞間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition,EMT),是指上皮細(xì)胞在特定的生理和病理情況下向間充質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化的現(xiàn)象,目前EMT被看成導(dǎo)致腫瘤進(jìn)展的病理過(guò)程,與侵襲和轉(zhuǎn)移有一定關(guān)系。在EMT的過(guò)程中,細(xì)胞之間的粘附減少,上皮細(xì)胞極性喪失,與周?chē)|(zhì)細(xì)胞的接觸減少,細(xì)胞遷移和運(yùn)動(dòng)能力增強(qiáng),同時(shí)細(xì)胞表型發(fā)生改變,喪失上皮表型,如角蛋白絲,E-鈣粘蛋白(E-cadherin),

4、而獲得間質(zhì)表型,如波形蛋白(Vimentin),纖維連接蛋白,N-鈣粘蛋白(N-cadherin)等。研究發(fā)現(xiàn),在某些上皮性癌如口腔鱗狀上皮癌、泌尿上皮腫瘤、胰腺癌中有上皮性鈣粘蛋白(E-cadherin)低表達(dá)或失表達(dá),而神經(jīng)性鈣粘蛋白(N-cadherin)異常表達(dá),同時(shí)增強(qiáng)了癌細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移能力;在這些上皮癌中可能存在E-cadherin向N-cadherin轉(zhuǎn)化,并認(rèn)為這是EMT的一個(gè)重要機(jī)制。此鈣粘蛋白轉(zhuǎn)化增加了癌細(xì)胞的侵襲

5、轉(zhuǎn)移性,也為腫瘤的治療提供了新的靶點(diǎn)和策略。
　　EMT過(guò)程中,一個(gè)重要分子事件是鈣粘蛋白表達(dá)的異常,其中E-cadherin和N-cadherin是與腫瘤轉(zhuǎn)移關(guān)系最密切的兩種鈣粘蛋白類(lèi)型,但二者在腫瘤浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移中的作用卻相反。E-cadherin促進(jìn)細(xì)胞的粘附聚集、維持上皮形態(tài)結(jié)構(gòu)完整性,對(duì)維持細(xì)胞極性和參與分化調(diào)節(jié)也至關(guān)重要。N-cadherin在上皮組織中的異位表達(dá)可以影響上皮細(xì)胞的形態(tài)和行為,誘導(dǎo)其向間質(zhì)轉(zhuǎn)化,即產(chǎn)生EMT。

6、
　　p63是近年發(fā)現(xiàn)的p53家族的成員之一,p63在各種上皮組織的發(fā)育、分化和形態(tài)的發(fā)生上都起著重要的作用,對(duì)于胚胎形成過(guò)程中外胚層的發(fā)育有著重要的意義。目前研究認(rèn)為p63的功能如下:①調(diào)控組織發(fā)育:研究發(fā)現(xiàn),p63與p53基因的顯著不同之處是p53基因的突變誘導(dǎo)腫瘤形成;而p63基因的突變則導(dǎo)致先天性發(fā)育障礙疾病:四肢發(fā)育畸形、外胚層發(fā)育不良等。②抑制腫瘤轉(zhuǎn)移:一方面,p63與Smad蛋白形成復(fù)合物,抑制TGF-β誘導(dǎo)的腫瘤細(xì)

7、胞轉(zhuǎn)移作用,而另一方面,p63表達(dá)的丟失可以導(dǎo)致細(xì)胞遷移能力增強(qiáng)。③調(diào)控上皮細(xì)胞分化:鱗狀上皮組織是由基底細(xì)胞向表層推移、分化成其他各層細(xì)胞的,主要由基底膜、基底細(xì)胞、副基底細(xì)胞、中層細(xì)胞、表層角化細(xì)胞組成。其中,基底細(xì)胞又稱(chēng)為儲(chǔ)備細(xì)胞、子宮頸干細(xì)胞,兼?zhèn)湎蝼[狀細(xì)胞分化、不斷增殖的潛能。而p63則是誘導(dǎo)基底細(xì)胞分化的重要調(diào)控基因之一。④其他作用:p63還在細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期、細(xì)胞增殖等方面起著一定的調(diào)控作用。
　　EMT的重要相關(guān)

8、基因snail、slug可以調(diào)控p63蛋白的表達(dá),而研究也發(fā)現(xiàn),腫瘤細(xì)胞中p63的表達(dá)與E-cadherin的表達(dá)水平呈正相關(guān),E-cadherin的表達(dá)降低是腫瘤EMT的一個(gè)重要標(biāo)識(shí),所以,p63很可能參與抑制腫瘤細(xì)胞的EMT,即抑制癌變。
　　本研究通過(guò)檢測(cè)宮頸鱗狀細(xì)胞癌中N-cadherin、E-cadherin和p63三者之間的表達(dá)以及與宮頸癌臨床相關(guān)因素之間的相關(guān)性,探討EMT過(guò)程與宮頸癌發(fā)生發(fā)展以及預(yù)后之間的關(guān)系。

9、r>　　目的：闡明N-cadherin(N-鈣粘附素)、E-cadherin(E-鈣粘附素)和p63在低分化宮頸鱗狀細(xì)胞癌,中高分化宮頸鱗狀細(xì)胞癌,正常宮頸組織中的表達(dá)情況,進(jìn)而分析這三種蛋白與宮頸鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)生、發(fā)展關(guān)系,并探討宮頸癌患者的年齡、組織分化、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和五年生存情況對(duì)三種蛋白在宮頸鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)的影響及其臨床意義。
　　方法：采用鏈霉菌抗生物素蛋白-過(guò)氧化物酶連結(jié)法(SP法)對(duì)131例宮頸癌組織及3

10、0例正常宮頸組織標(biāo)本做N-cadherin、E-cadherin和p63標(biāo)記,采用半定量積分法判定陽(yáng)性結(jié)果。E-cadherin、N-cadherin和p63表達(dá)與臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系采用χ2檢驗(yàn)分析;E-cadherin、N-cadherin和p63采用χ2檢驗(yàn)相關(guān)性進(jìn)行相關(guān)分析;采用Kaplan-Meier法評(píng)估各基因表達(dá)對(duì)生存率影響,對(duì)生存率曲線的比較采用Log-rank法進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)。
　　結(jié)果：
　　(1)N-

11、cadherin在正常宮頸組織中不表達(dá),在高分化宮頸癌中的強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)率為25％(5/20),中分化宮頸癌中的強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)率為9.7%(6/62),低分化宮頸癌中的強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)率為38.8%(19/49)。并且N-cadherin在低分化宮頸鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)明顯高于正常宮頸組織和中高分化宮頸鱗狀細(xì)胞癌,差異具有顯著性(P<0.05)。
　　(2)E-cadherin在正常宮頸組織中呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá),在高分化宮頸癌中的強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)率為75%(

12、15/20),中分化宮頸癌中的強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)率為38.7%(24/62),低分化宮頸癌中的強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)率為0(0/49),E-cadherin在高分化宮頸鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)明顯高于低分化和中分化宮頸鱗狀細(xì)胞癌,差異具有顯著性(P<0.05)。
　　(3)p63在正常宮頸組織中呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá),在高分化宮頸癌中的強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)率100%(20/20),中分化宮頸癌中的強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)率30.6%(19/62),低分化宮頸癌中的強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)率2.0%(1/

13、49),p63在高分化宮頸鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)明顯高于低分化和中分化宮頸鱗狀細(xì)胞癌,差異具有顯著性(P<0.05)。
　　(4)N-cadherin、E-cadherin和p63的陽(yáng)性表達(dá)率均與宮頸癌的組織分化、臨床分期、有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及術(shù)后復(fù)發(fā)有關(guān)(P<0.05),而均與年齡無(wú)關(guān)(P>0.05)。
　　(5)N-cadherin強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)患者生存期明顯低于陰性表達(dá)者,E-cadherin、p63陰性表達(dá)患者生存期明顯低于強(qiáng)