宜興百合離體培養(yǎng)體系建立與形態(tài)發(fā)生途徑研究.pdf

1、宜興百合別名虎皮百合、黃百合，分類學(xué)定名為卷丹[Lilium lancifolium Thunb.(Lilium.tigrinum ker.-Gawl.)]，原產(chǎn)太湖一帶的湖州和宜興。其食用部位是鱗莖，不僅有著豐富的營養(yǎng)價值，而且有著重要的藥用價值，被譽為“太湖參”、“中條參”。宜興百合以無性繁殖為主，但傳統(tǒng)的百合繁殖方法，繁殖系數(shù)較低，并且長期的營養(yǎng)繁殖，常造成病毒積累和種性退化，影響百合的產(chǎn)量和質(zhì)量。組織培養(yǎng)技術(shù)廣泛應(yīng)用于百合引種栽

2、培，優(yōu)良品種快速繁殖，去除病毒和更新品種，能夠加快百合快速繁殖的速度，縮短百合的生育周期。 雖然國內(nèi)外學(xué)者對百合組織培養(yǎng)做了大量的研究，但是對宜興百合(卷丹)的關(guān)注還不夠，并且百合種間基因型差異大，在離體培養(yǎng)中的表現(xiàn)也有一定的差異。因此，系統(tǒng)研究宜興百合離體再生中的各影響因子，探討不同離體再生途徑對解決宜興百合的種苗繁殖問題是十分必要的。本試驗以宜興百合為試驗材料研究了不同外植體及處理方式對離體器官發(fā)生的影響，探討了生長調(diào)節(jié)物質(zhì)

3、和培養(yǎng)基對形態(tài)發(fā)生的作用，并對試管鱗莖形成進行了初步的研究。主要研究結(jié)果如下： 1、珠芽是宜興百合一種理想的外植體來源。MS+NAA0.2mg/L+6.BA1.5mg/L+30g/L蔗糖+6g/L瓊脂粉培養(yǎng)基中，珠芽不定芽直接再生效果最好，誘導(dǎo)率和分化系數(shù)分別達(dá)93.8％、5.32。而以試管苗基部為外植體于MS+2,4-D1.0mg/L+6-BA0.5mg/L+1.0g/LAC+30g/L蔗糖+6g/t，瓊脂粉培養(yǎng)基上培養(yǎng)40d

4、，可獲得較高的誘導(dǎo)率和分化系數(shù)。宜興百合的離體培養(yǎng)中，不僅鱗片表現(xiàn)出位置效應(yīng)，其珠芽和葉片在培養(yǎng)中也存在位置效應(yīng)。因此，在宜興百合離體培養(yǎng)中，應(yīng)以所選器官的形態(tài)學(xué)下端作為外植體，更易獲得成功。 2、2,4-D是誘導(dǎo)宜興百合鱗莖和試管鱗莖形成愈傷組織的必需物質(zhì)，并且2,4-D濃度為2/0mg/L時，外植體愈傷組織誘導(dǎo)率最高；細(xì)胞分裂素種類對愈傷組織形成有很大影響，KT誘導(dǎo)胚性愈傷組織的效果比6-BA好。宜興百合鱗莖及試管鱗莖鱗片均

5、可在MS+2/0mg/L2，4-D+0.5KT+6L瓊脂粉+30g/L蔗糖中，誘導(dǎo)產(chǎn)生胚性愈傷，并可進一步發(fā)育成苗。百合試管鱗莖鱗片離體再生過程中，生長調(diào)節(jié)物質(zhì)的種類和濃度影響其再生器官的類型，KT、GA<,3>均可促進試管鱗莖鱗片直接形成小鱗莖?；九囵B(yǎng)基類型影響宜興百合鱗莖直接再生的器官類型，無論是培養(yǎng)基中KH<,2>PO<,4>加倍，還是除去NH<,4>NO<,3>加倍KNO<,3>，均有利于小鱗莖的直接發(fā)生。但以百合試管鱗莖鱗片

6、為外植體，基本培養(yǎng)基對其再生器官的類型影響不大，以不定芽直接發(fā)生為主。此外，在百合試管鱗莖鱗片離體再生過程中，生長調(diào)節(jié)物質(zhì)的種類和濃度，特別是KT、GA<,3>均可促進試管鱗莖鱗片直接形成小鱗莖。 3、蔗糖對宜興百合試管鱗莖的直徑、鮮重都有很大的影響，90g/L蔗糖是誘導(dǎo)宜興百合試管鱗莖形成和膨大的理想濃度。在一定時間范圍內(nèi)，適當(dāng)延長百合繼代周期，可以促進植株營養(yǎng)物質(zhì)向試管鱗莖轉(zhuǎn)移，進而促進試管鱗莖膨大。植物生長抑制劑PP<,3