硝化細(xì)菌分離和培養(yǎng)以及對人造水草預(yù)固定技術(shù)在室內(nèi)對蝦集約化養(yǎng)殖中的應(yīng)用.pdf

1、硝化細(xì)菌(Nitrifying bacteria)包括亞硝化菌(Nitrite bacteria)、硝化菌(Nitrate bacteria)兩個生理菌群，在自然界氮循環(huán)中發(fā)揮著重要功能，其生長特點(diǎn)是需要表面積大的附著載體，同時需要一定的成熟期(兩周左右)。而人造水草有很大的比表面積(2000m<'2>/m<'3>)，可作為微生物良好的附著、固定載體。本試驗通過從本土養(yǎng)殖環(huán)境中分離得到純種硝化細(xì)菌，研究人造水草固定硝化細(xì)菌的技術(shù)，將養(yǎng)殖

2、初期水體中的氨氮、亞硝酸氮控制在較低水平，為對蝦生長提供良好的環(huán)境，為室內(nèi)對蝦集約化養(yǎng)殖的水質(zhì)凈化提供參考依據(jù)。 經(jīng)反復(fù)初步分離篩選，采用瓊脂平板純化分離技術(shù)從對蝦養(yǎng)殖環(huán)境中得到5株優(yōu)勢純種亞硝化菌和3株優(yōu)勢純種硝化菌，并進(jìn)行格蘭氏染色作初步觀察。分離得到幾株亞硝化菌在瓊脂平版上長出的菌落大小為約0.3～0.8mm，而硝化菌菌落約0.5～1.0mm。分離得到的硝化細(xì)菌大部分呈桿狀，亞硝化菌細(xì)胞長約0.5～1.0μm，而硝化菌細(xì)胞

3、長約1.0～1.5μm。設(shè)計一套簡易培養(yǎng)系統(tǒng)培養(yǎng)分離得到的幾種硝化細(xì)菌，根據(jù)培養(yǎng)結(jié)果選出其中最具優(yōu)勢的亞硝化菌和硝化菌，同時檢驗應(yīng)用該模式進(jìn)行硝化細(xì)菌培養(yǎng)的效果。培養(yǎng)結(jié)果表明，初篩的幾株硝化細(xì)菌基本上都有較強(qiáng)的生長和代謝能力。通過比較細(xì)菌生長能力和硝化能力篩選出Y105和X101分別是初篩的幾株亞硝化菌和硝化菌中最具優(yōu)勢的菌株。培養(yǎng)結(jié)果也證明了所設(shè)計的簡易培養(yǎng)模式是簡單有效的。亞硝化菌富集培養(yǎng)時間為13～19d，硝化菌為6～12d左右，

4、這期間可以不需要補(bǔ)加培養(yǎng)基，也不需要調(diào)整pH值，只要保證適宜的溫度和溶解氧，就可以得到較高密度(約10<'6>～10<'8>cell/ml)的亞硝化菌和硝化菌。結(jié)果說明從養(yǎng)殖環(huán)境中可以分離得到高效硝化細(xì)菌。 研究了在人造水草上進(jìn)行硝化細(xì)菌固定化的最佳條件。以細(xì)菌初始接種密度、固定化時間、固定化人造水草選材、固定化pH、固定化溫度為研究對象進(jìn)行正交實(shí)驗設(shè)計，得出這些條件因子對硝化細(xì)菌固定化效果的影響。實(shí)驗結(jié)果表明，當(dāng)用3號人造水草

5、作為生長基質(zhì)、接種密度為10<'5>cell/ml、溫度30℃、pH為7的條件下固定生長16d，每g人造水草上的亞硝化菌可達(dá)8.4×10<'9> cells；而當(dāng)用3號人造水草作為生長基質(zhì)、接種密度為10<'4>cell/ml、溫度30℃、pH為10的條件下固定生長16d，每g人造水草上的亞硝化菌可達(dá)4.8×10<'9> cells。這說明通過硝化細(xì)菌固定化技術(shù)有可能大大提高養(yǎng)殖水體中局部硝化細(xì)菌的密度。正交實(shí)驗結(jié)果方差分析表明，固定化

6、時間對亞硝化菌和亞硝化菌在人造水草上的固定化效果均有顯著影響。 研究了固定硝化細(xì)菌的人造水草在室內(nèi)對蝦養(yǎng)殖中的使用效果。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，整個養(yǎng)殖期間，對照池中氨氮濃度相對較高，與其它3口試驗池差異顯著(P<0.01)。在養(yǎng)殖試驗初始4d，采用未固定硝化細(xì)菌的人造水草的對照池，亞硝酸氮一直上升，最高值達(dá)到0.91mg/l，而投加固定硝化細(xì)菌的人造水草的實(shí)驗池則從試驗開始便一直快速下降。試驗結(jié)果表明固定硝化細(xì)菌的人造水草硝化能力較強(qiáng)，前期