乳化異氟醚對(duì)成年大鼠學(xué)習(xí)記憶及血漿皮質(zhì)酮水平的影響.pdf

1、目的：檢測(cè)乳化異氟醚（Emulsified isoflurane，EI）靜脈麻醉對(duì)成年雄性SD大鼠學(xué)習(xí)記憶能力及血漿皮質(zhì)酮水平的影響。通過跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)、Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)進(jìn)行行為學(xué)觀察；酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法（Enzyme-linked Immunosorbent assay，ELISA）檢測(cè)血漿皮質(zhì)酮的含量，旨在探討乳化異氟醚是否引起學(xué)習(xí)記憶能力及血漿皮質(zhì)酮水平的變化，闡明乳化異氟醚是否與術(shù)后認(rèn)知功能障礙（Postoperative co

2、gnitivedysfunction，POCD）有關(guān)。
　　 方法：成年雄性SD大鼠（N=36），隨機(jī)分為分為6組，空白組（n=6）、NS組（n=6）、EI組（n=6）、EI+Morris水迷宮組（n=6）、跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)組（n=6）、EI+跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)組（n=6）。（1）空白組為完全空白實(shí)驗(yàn)對(duì)照組，不做任何處理。（2）NS組不進(jìn)行跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)和Moms水迷宮實(shí)驗(yàn)；于11:00-12:00尾靜脈注射NS1ml/kg。（3）EI組于11:00-

3、12:00尾靜脈注射8％EI（體積比）1ml/kg。（4）EI+Moms水迷宮組進(jìn)行水迷宮實(shí)驗(yàn)，首先進(jìn)行Morris水迷宮定位航行實(shí)驗(yàn)訓(xùn)練，每天08:00.12:00訓(xùn)練，4次/天，共5天，進(jìn)行行為學(xué)觀察，記錄定位航行實(shí)驗(yàn)逃避潛伏期時(shí)間。第5天Morris水迷宮定位航行實(shí)驗(yàn)訓(xùn)練結(jié)束后，10:00-11:00行Morris水迷宮空間搜索能力測(cè)試，記錄空間搜索能力測(cè)試大鼠2min內(nèi)在目標(biāo)象限停留時(shí)間。實(shí)驗(yàn)過程中，保持環(huán)境安靜以及水迷宮周圍光

4、源和物體位置固定不變。第5天Moms水迷宮空間搜索能力測(cè)試實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，11:00-12:00，予尾靜脈注射8％乳化異氟醚1ml/kg即120mg/kg，麻醉蘇醒后6小時(shí)在18:00-19:00，完成一次Morris水迷宮定位航行實(shí)驗(yàn)與空間搜索能力測(cè)試。（5）跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)組：于18:00-19:00進(jìn)行跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)測(cè)試，跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)測(cè)試前24h進(jìn)行跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)訓(xùn)練。（6）EI+跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)組于11:00-12:00，尾靜脈注射8％乳化異氟醚1ml/kg即12

5、0mg/Kg，麻醉蘇醒后6小時(shí)在18:00-19:00跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)測(cè)試；跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)測(cè)試前24h進(jìn)行跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)訓(xùn)練。EI+Morris水迷宮組、EI+跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)組和單純跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)組實(shí)驗(yàn)結(jié)束當(dāng)天，NS組尾靜脈注射NS當(dāng)天、EI組尾靜脈注射EI當(dāng)天，空白組與EI組同一天，19:00-20:00，各組大鼠腹腔注射10％水合氯醛（0.4ml/100g）麻醉，取眼眶血2-3ml放入置于冰上的肝素管，0-4°C條件下4000r/min離心15min后取血漿。酶聯(lián)

6、免疫吸附測(cè)定法檢測(cè)各組大鼠血漿皮質(zhì)酮的含量。
　　 結(jié)果：1.Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)：①EI靜脈注射前，Morris水迷宮定位航行實(shí)驗(yàn)訓(xùn)練逃避潛伏期（秒，x）第1至5天分別為42.04、22.79、11.08、13.29、10.96。EI靜脈注射麻醉蘇醒后6h，Morris水迷宮定位航行實(shí)驗(yàn)逃避潛伏期（秒，x）為12.66。EI靜脈注射后麻醉蘇醒后6h大鼠Morris水迷宮定位航行實(shí)驗(yàn)逃避潛伏期與EI靜脈注射前大鼠Morris水

7、迷宮定位航行實(shí)驗(yàn)訓(xùn)練逃避潛伏期第5天相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。②EI靜脈注射前Morris水迷宮空間搜索能力測(cè)試大鼠2min內(nèi)在目標(biāo)象限停留時(shí)間（秒，x）為46.15；EI靜脈注射麻醉蘇醒后6h大鼠Morris水迷宮空間搜索能力測(cè)試2min內(nèi)在目標(biāo)象限停留時(shí)間（秒，x）為43.63。EI靜脈注射麻醉蘇醒后6h大鼠Morris水迷宮空間搜索能力測(cè)試2min內(nèi)在目標(biāo)象限停留時(shí)間與EI靜脈注射前相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）

8、。
　　 2.跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)：EI+跳臺(tái)組、單純跳臺(tái)對(duì)照組大鼠跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)潛伏期（秒，x）分別為221.83、184.66；跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)錯(cuò)誤次數(shù)（x）分別為0.67、0.5。EI+跳臺(tái)組大鼠跳下平臺(tái)的潛伏期與單純跳臺(tái)對(duì)照組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），EI+跳臺(tái)組大鼠5min內(nèi)錯(cuò)誤次數(shù)與單純跳臺(tái)對(duì)照組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。提示大鼠EI靜脈麻醉后6h學(xué)習(xí)記憶能力無改變。
　　 3.酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法檢測(cè)血漿皮質(zhì)酮

9、含量結(jié)果：空白組、NS、EI、EI+跳臺(tái)組、EI+水迷宮組、跳臺(tái)組大鼠血漿皮質(zhì)酮含量（ng，x）分別為102.00、169.21、117.51、205.35、179.55、200.22?？瞻捉M、NS、EI、EI+跳臺(tái)組、EI+水迷宮組、跳臺(tái)組皮質(zhì)酮含量組間相比，EI+跳臺(tái)組與空白組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.038，P<0.05），跳臺(tái)組與空白組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.048，P<0.05）；NS、EI、EI+水迷宮組與空白組相比差

10、異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；NS、EI、EI+跳臺(tái)組、EI+水迷宮組、跳臺(tái)組組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。提示EI單次靜脈麻醉后6h血漿皮質(zhì)酮水平無明顯變化；跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)后大鼠血漿皮質(zhì)酮水平明顯升高。NS、EI、EI+跳臺(tái)組、EI+水迷宮組、跳臺(tái)組組間相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但NS、EI+跳臺(tái)組、EI+水迷宮組、跳臺(tái)組大鼠血漿皮質(zhì)酮含量均值明顯高于EI組，由此推測(cè)水迷宮實(shí)驗(yàn)、跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)、NS尾靜脈注射可能是影響血漿皮質(zhì)酮水平的潛