孕期咖啡因暴露對成年子代大鼠空間學習記憶的影響及機制研究.pdf

1、第一部分孕期咖啡因暴露對子代生長發(fā)育的影響
　　目的:研究孕期咖啡因暴露對胎兒生長發(fā)育及子代體重的影響
　　方法：實驗組孕鼠從妊娠第3.5~19.5天給予咖啡因皮下注射（20mg/kg，twice a day）。對照組給予相同體積生理鹽水。部分孕鼠于孕第20.5天剖腹取胎鼠，稱量胎鼠腦重、體重。另一部分自然分娩后，哺乳期內(nèi)均給予正常飲食，幼鼠母乳喂養(yǎng)。第14天稱量腦重和體重。剩余的子代斷奶后給予正常飲食直至5月齡。
　

2、　結(jié)果：1）孕期咖啡因暴露組胎鼠的體重明顯低于對照組而兩組間腦重無明顯差異；相對于對照組，咖啡因胎鼠的腦重/體重明顯升高2）孕期咖啡因暴露組第14天子代腦重和體重均明顯低于對照組，腦重/體重比兩組間無明顯差異。
　　結(jié)論：孕期咖啡因暴露影響胎鼠及新生鼠的腦發(fā)育并且可導致宮內(nèi)生長受限的發(fā)生。
　　第二部分孕期咖啡因暴露對子代成年大鼠學習記憶的影響
　　目的：研究孕期咖啡因暴露對成年大鼠子代學習記憶的影響。
　　方法

3、：實驗組及對照組孕鼠的成年子代按性別分為孕期咖啡因暴露子代公鼠、孕期咖啡因暴露子代母鼠、對照組子代公鼠和對照組子代母鼠。采用Morris水迷宮方法檢測各組的空間學習記憶能力
　　結(jié)果：孕期咖啡因暴露的子代公鼠和母鼠在定位航行實驗中到達平臺的所需要的時間和路程均較對照組的公鼠和母鼠要長；搜索實驗中，孕期咖啡因暴露組穿越平臺所在象限的次數(shù)均較對照組對應(yīng)性別子代要少。
　　結(jié)論：妊娠期咖啡因暴露可顯著降低成年子代的學習記憶能力

4、r>　　第三部分孕期咖啡因暴露對成年子代海馬腺苷受體及PKA通路的影響
　　目的：經(jīng)由分子生物學的手段研究孕期咖啡因暴露成年子代大鼠海馬腺苷受體以及下游PKA通路的影響
　　方法：取實驗組和對照組的胎鼠和成年子代的海馬組織，RT-qPCR方法檢測
　　CREB、BDNF、TrKB信使RNA的表達，ELISA方法測定A1R、A2aR、cAMP、PKA-Cβ、PKA-Cα、p-CREB、BDNF以及TrKB蛋白的表達

5、>　　結(jié)果：1）孕期咖啡因暴露的胎鼠CREB、BDNF和TrKB的mRNA的表達均明顯低于對照組胎鼠，A1R、PKA-Cβ、BDNF以及TrKB蛋白表達水平在孕期咖啡因暴露的胎鼠海馬中顯著低于對照組；蛋白A2aR、cAMP、PKA-Cα和p-CREB在胎鼠海馬中的表達兩組間無統(tǒng)計學差異；2）孕期咖啡因暴露的成年子代海馬CREB和BDNF的mRNA的表達均明顯低于對照組胎鼠，TrKB的mRNA含量在咖啡因暴露的成年子代海馬中明顯高表達；孕