川西南13種報(bào)春花屬植物的RAPD分析.pdf

1、本文以采自四川西南山區(qū)的龍池、康定、木格措以及理塘等地的13種報(bào)春花植物為供試材料，利用隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA(RAPD)技術(shù)分析了其遺傳多樣性和親緣關(guān)系，對(duì)雅江報(bào)春(P.yargongensis),雜色鐘花報(bào)春(P.alpicola)及四川特有種青城報(bào)春(P.chienii)進(jìn)行了評(píng)價(jià)，分析了偏花報(bào)春(Psecundiflora)的系統(tǒng)地位，同時(shí)探討了影響報(bào)春花遺傳多樣性的因素,并提出了相應(yīng)的保護(hù)策略及今后的研究方向。 主要結(jié)果

2、如下： 1、建立了適用于報(bào)春花RAPD反應(yīng)的優(yōu)化程序和反應(yīng)體系。其中最適反應(yīng)體系為：10xBuffer(含Mg<'2+>)2μl，dNTP 150μmol/L.Taq酶0.4μl，DNA模板30～40μg/μl，引物2.5μmol/L。最適PCR反應(yīng)程序?yàn)椋?5℃預(yù)變性5min，94℃變性30s，35℃復(fù)性50s，72℃延伸90s,共進(jìn)行40個(gè)循環(huán)，最后一個(gè)循環(huán)在72℃保持5min。 2、13種報(bào)春花共85份材料的RAP

3、D分析結(jié)果表明，28條引物共擴(kuò)增出250條DNA帶紋，其中多態(tài)性帶達(dá)209條，占總數(shù)的83.6％，報(bào)春花種間遺傳多樣性很高。其中雅江報(bào)春擴(kuò)增出173條DNA帶，有82條為多態(tài)性帶紋，占47.4％；雜色鐘花報(bào)春擴(kuò)增出206條帶，其中155條為多態(tài)性帶紋，占75.2％；青城報(bào)春擴(kuò)增出187條帶，其中94條為多態(tài)性帶紋，占50.3％。 3、雅江報(bào)春17份材料的遺傳距離變幅為0.0345～0.9523，材料間平均遺傳距離為0.4584。

4、在居群內(nèi)，木格措居群材料間平均遺傳距離較大，遺傳多樣性較高，材料間存在較大的遺傳分化，而康定和理塘居群內(nèi)材料間遺傳距離較小，遺傳分化也較小，因此遺傳多樣性較低；在居群間，木格措居群與康定居群的平均遺傳距離相對(duì)最小，表明兩個(gè)居群間的親緣關(guān)系較近；而康定居群和理塘居群的平均遺傳距離相對(duì)較遠(yuǎn)，說明兩個(gè)居群間差異較大，親緣關(guān)系較遠(yuǎn)。居群間的遺傳分化隨居群間地理距離的增大而加大。 4、雜色鐘花報(bào)春不同花色的植株之間具有明顯的遺傳變異，藍(lán)花

5、植株不同個(gè)體間的遺傳分化更大，遺傳差異更為明顯。青城報(bào)春居群內(nèi)遺傳分化較小，遺傳多樣性較低，這也是導(dǎo)致其分布范圍相對(duì)狹窄，僅見于都江堰地區(qū)的原因。 5、不同生境及生態(tài)地理區(qū)域?qū)?bào)春花遺傳多樣性的影響較大，發(fā)育良好的生境有利于提高報(bào)春花的遺傳多樣性：同一區(qū)域內(nèi)高水平、穩(wěn)定的基因流有利于使報(bào)春花居群趨于一致。川西盆地龍池的報(bào)春花材料基本聚為一類，明顯區(qū)別于采自甘孜州的材料，采自甘孜州的報(bào)春花材料間的遺傳差異較之于龍池地區(qū)的材料差異明