NAGase作為甲殼類動(dòng)物豐度指示因子的可行性研究.pdf

1、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(N-Acetyl-β-D-glucosaminidase，簡(jiǎn)稱NAGase，又稱殼二糖酶)參與節(jié)肢動(dòng)物脫皮過(guò)程中外骨骼的消解，并在脫皮過(guò)程完成后隨蛻皮液一同釋放到周圍水環(huán)境中，因此理論上可作為水生節(jié)肢動(dòng)物生物量的指示因子。
　　論文以大型溞（Daphnia magna Straus）、裸腹溞（Moina sp.）、低額溞（Simocephalus sp.）作為受試生物，初步測(cè)定了其所釋放的NAGa

2、se的動(dòng)力學(xué)性質(zhì)。測(cè)定結(jié)果表明三種溞所釋放的酶在不超過(guò)34℃的溫度下具有良好的熱穩(wěn)定性;酶在pH6.5-9.0的范圍內(nèi)其活性處于高位（即不低于最高值的75％）;大型溞所釋放的酶，其水解4-甲基傘形酮-2-乙酰氨基-2-脫氧-β-D吡喃葡萄糖苷(MUF-NAG)的Km和Vm分別為0.072 mmol/L和1.28μmol/L/h。這些溞所釋放的酶的Km值以及pH和溫度穩(wěn)定性特征與甲殼類動(dòng)物體內(nèi)的酶相似，與微生物、植物的酶存在一定差異。

3、r>　　以乙螨唑(eto xazole)作為受試藥劑，以裸腹溞和低額溞作為受試生物，檢測(cè)了農(nóng)藥對(duì)于NAGase體外釋放量（以酶活性來(lái)衡量）和溞類繁殖量（以每雌產(chǎn)幼量來(lái)衡量）的影響。以酶活性作為應(yīng)變量(y)，以每雌產(chǎn)幼量作為自變量(x)，建立兩者之間的線性關(guān)系方程。對(duì)裸腹溞而言，方程的r=0.2，p=0.4;對(duì)低額溞而言，的r=0.7，p=0.08?？梢?jiàn)低額溞比裸腹溞更符合線性關(guān)系。這主要是因?yàn)槁愀箿袀€(gè)體壽命短，在14d試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，對(duì)照組

4、F0的自然死亡率已達(dá)到50％。這說(shuō)明NAGase釋放量與繁殖率之間的線性關(guān)系存在與否，在很大程度上取決于F0在相關(guān)時(shí)段內(nèi)是否始終處于存活狀態(tài)。
　　以虱螨脲(lufenuron)、丁醚脲（diafenthiuron）和乙螨唑(etoxazole)作為受試農(nóng)藥，以大型溞、裸腹溞、低額溞作為受試生物，檢測(cè)了農(nóng)藥對(duì)于NAGase體外釋放量（以酶活性來(lái)衡量）和溞類生物量（以群體總蛋白量來(lái)衡量）的影響。以酶活性作為應(yīng)變量(y)，以群體總蛋白

5、量作為自變量(x)，建立兩者之間的線性關(guān)系方程。在所開(kāi)展的9項(xiàng)試驗(yàn)中，除虱螨脲對(duì)低額溞的試驗(yàn)組線性相關(guān)系數(shù)＜0.5，其余有8項(xiàng)的線性相關(guān)系數(shù)＞0.5，且丁醚脲對(duì)低額溞和裸腹溞、乙螨唑?qū)Φ皖~溞、虱螨脲對(duì)大型溞和低額溞的實(shí)驗(yàn)中p值≤0.05，這說(shuō)明這5項(xiàng)之間的正相關(guān)關(guān)系較為理想。由于已釋放的酶在不斷降解，新酶的釋放則遵循一定的周期，測(cè)定結(jié)果受到干擾等原因，體外酶活性與受試群體的生物量的變化趨勢(shì)并不總是一致。
　　檢測(cè)了虱螨脲、丁醚脲、