前列腺素E-,1-對慢性阻塞性肺疾病模型大鼠氣道炎癥干預(yù)的實驗研究.pdf

1、研究背景：慢性阻塞性肺疾病(COPD)是一種可以預(yù)防可以治療的疾病，具有某些顯著的肺外效應(yīng)，可能與患者個體嚴重程度有關(guān)。肺部特點表現(xiàn)為不完全可逆，常呈進行性發(fā)展，與肺部對有害氣體或顆粒的異常反應(yīng)有關(guān)。COPD由于其患病人數(shù)多，死亡率高，社會經(jīng)濟負擔重，已成為一個重要的公共衛(wèi)生問題，是嚴重危害人類身體健康的重要慢性呼吸系統(tǒng)疾病。其發(fā)病機制十分復(fù)雜，以中性粒細胞為主要效應(yīng)細胞的氣道炎癥反應(yīng)是其發(fā)病的主要機制之一，氣道炎癥涉及多種炎癥細胞及細

2、胞因子，腫瘤壞死因子α(TNF—α)、白細胞介素8(IL-8)、轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF—β1)等細胞因子在氣道炎癥中有著重要作用。前列腺素E1(PGE1)是前列腺素的一種，臨床上主要用于改善微循環(huán)功能，近年發(fā)現(xiàn)PGE1可以通過抑制FNF—α、TGF—β1等因子的表達來拮抗急性肺損傷、肺纖維化和支氣管哮喘的氣道炎癥反應(yīng)，但對COPD氣道炎癥的影響未見相關(guān)報道。本課題通過觀察PGE1對COPD模型大鼠氣道中TNF—α和TGF—β1及動脈血

3、氣等因素的影響，為PGE1治療COPD在臨床中應(yīng)用提供實驗依據(jù)，為COPD的治療提供新的思路。 目的：通過觀察PGE1對COPD模型大鼠動脈血氣、肺組織病理學變化、支氣管肺泡灌洗液炎癥細胞計數(shù)及分類以及對肺組織TNF—α、TGF—β1等因子的表達的影響，探討PGE1對COPD模型大鼠氣道炎癥的干預(yù)作用及可能機制。 方法：30只Wistar大鼠隨機分為3組：對照組、模型組和治療組，每組10只。氣道內(nèi)滴注脂多糖(LPS)和熏

4、煙法建立COPD模型，治療組在第2-28天(第15天除外)在熏煙前將前列腺素E1脂微球載體制劑(凱時)2ml溶于8ml生理鹽水，按0.25ml·(0.1kg)-1從尾靜脈注入大鼠體內(nèi)，28天后對大鼠行血氣分析測定，然后處死大鼠，收集支氣管肺泡灌洗液(BALF)，對炎癥細胞行總數(shù)和分類計數(shù)，對大鼠肺組織行病理學檢查，采用二步法免疫組化法測定肺組織TGF—β1的表達，酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定BALF中TNF—α的表達，逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈

5、反應(yīng)(RT—PCR)測定肺組織中FNF—α mRNA和TGF—β1 mRNA的表達水平。 結(jié)果：1．根據(jù)大鼠動脈血氣分析及大鼠肺組織病理學檢查判定所建立的大鼠COPD模型的病理學改變符合人類COPD的特點。2．治療組(88.36±2.26)mmHg、(84.19±1.82)％動脈血氣分析血氧分壓和血氧飽和度較模型組(75.66±3.74)mmHg、(77.68±2.89)％明顯改善，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。3．治療組肺

6、組織的病理學改變較模型組明顯減輕但未恢復(fù)正常。4．治療組(5.655±2.131，0.819±0.310)×106/L BALF中白細胞總數(shù)及中性粒細胞數(shù)較模型組(10.556±2.996，2.417±0.687)×106/L下降。差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。5．治療組(730.750±53.758)pg/ml肺組織TNF—α含量較模型組(930.700±65.221)pg/ml下降，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，但仍高于對照

7、組(331.000±77.084)pg/ml，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。6．治療組(2.250±1.165)肺組織TGF—β1的表達計分較模型組(5.900±1.370)下降，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，但高于對照組(0.700±0.823)，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。7．治療組(1.095±0.207、0.781±0.200)肺組織TNF—α mRNA、TGF—β1 mRNA的表達較模型組(1.448±0.266

8、、1.063±0.202)下降，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，但仍高于對照組(0.723±0.137、0.365±0.087)，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。 結(jié)論：氣道內(nèi)滴入LPS和被動吸煙的方法建立COPD的大鼠模型符合人類COPD發(fā)生發(fā)展的病理生理狀況，動脈血氣分析與肺組織病理學聯(lián)合觀察可以作為判斷COPD大鼠模型造模成功的標準之一。PGE1可以明顯改善COPD大鼠動脈血氧分壓及氧飽和度水平，減輕肺氣腫改變；TNF