衰老對大鼠腦內5-羥色胺能神經元的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、有研究證實,隨著人類壽命的延長、老齡人口的增加,老年人出現(xiàn)抑郁癥狀的頻率增高,嚴重影響了人們的生活質量。抑郁癥病因復雜,研究表明主要與單胺類神經遞質,特別是神經遞質5.羥色胺(5-hydroxy-tryptamine,5-HT)有關,中樞5-HT能神經體系的功能障礙在抑郁癥的發(fā)病機制中起著重要作用。
   5-HT是腦內與多種精神神經疾病有關的一種神經遞質,它幾乎參與人體所有的生理活動和行為功能的調控,如情感、認知等;位于5-H

2、T能神經末梢并反映5-HT神經體系功能活動的重要標志物5-羥色胺轉運體(serotonin transporter,SERT)能特異性攝取突觸間隙的5-HT而終止其對突觸后神經元的作用,是抗抑郁藥物的主要作用靶點。目前關于5-HT能神經元老齡改變的結果多基于SERT配基的放射自顯影及神經顯像研究。因受研究方法和所使用SERT配基特異性不高的限制,研究結果多不一致。
   目的:本研究采用自然衰老動物模型,利用免疫組織化學和免疫印

3、跡方法,觀察5-HT、色氨酸羥化酶(tryptophan hydroxylase,TPH)、SERT在老年大鼠腦內的表達改變,確定衰老對大鼠腦內5-HT能神經元的影響,期望為老年抑郁等相關疾病的診斷提供一定的實驗依據。
   方法:本研究選取3月齡健康雄性Wistar大鼠20只,24月齡組雄性Wistar大鼠20只(自然衰老動物模型),以免疫組織化學和免疫印跡技術觀察、分析5-HT能神經體系在老年大鼠中縫背核和尾殼核的表達變化。

4、
   結果:1.大鼠腦干5-HT能神經元一般觀察:正常大鼠腦內5-HT免疫反應陽性神經元主要集中在中腦下丘階段,從低倍鏡下觀察可見位于中腦水管腹側與兩側內側縱束之間的多細胞聚集區(qū),即中縫正中核。5-HT免疫反應陽性神經元在中縫正中核分布彌散,中縫背核整體形態(tài)呈噴泉樣,兩側部免疫反應染色較強,即中縫背核、腹外側核。SERT免疫組織化學染色主要顯示神經元突起,未見陽性胞體標記,SERT免疫反應陽性纖維在正常大鼠主要分布在中腦中縫背

5、核,且粗細不等、交織成網。2.免疫組織化學結果:(1)通過對位于大鼠腦干中腦下丘階段的5-HT能神經元計數發(fā)現(xiàn),24月齡組大鼠腦內5-HT免疫反應陽性神經元數目比3月齡組明顯減少,有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。(2)5-HT組化靜態(tài)灰度值分析,24月齡組大鼠在中縫背核和尾殼核5-HT免疫反應強度明顯降低,通過靜態(tài)灰度值分析:中縫背核3月齡組為156.61±6.12,24月齡組為168.21±3.64,24月齡組比3月齡組增加了7.41%

6、,有統(tǒng)計學意義(P<0.01);尾殼核3月齡組為178.26±2.77,24月齡組為187.63±2.47,24月齡組比3月齡組增加了5.26%,有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。由于灰度值的測定與免疫反應陽性神經纖維表達的強度呈負相關,說明24月齡大鼠腦內5-HT在腦內中縫背核和尾殼核的表達明顯低于3月齡組。(3)SERT組化靜態(tài)灰度值分析,24月齡組大鼠在中縫背核和尾殼核SEPT免疫反應陽性纖維明顯減少,通過靜態(tài)灰度值分析:中縫背核3月

7、齡組為161.53±3.94,24月齡組為175.36±5.39,24月齡組比3月齡組增加了8.56%,有統(tǒng)計學意義(P<0.01);尾殼核3月齡組為176.98±2.02,24月齡組為179.73±2.33,24月齡組比3月齡組增加了1.55%,有統(tǒng)計學意義(P<0.05),說明24月齡組大鼠中縫背核和尾殼核SERT的表達明顯低于3月齡組大鼠。3.Western-Blot檢測結果:通過對3月齡和24月齡大鼠的Western-Blot結

8、果的分析,可知24月齡組各指標(TPH、SERT)與β-actin條帶相對吸光度比值明顯降低。(1)TPH與β-actin條帶相對吸光度值的比值在3月齡組大鼠為:1.1182±0.0576;24月齡組為:1.0487±0.0647,24月齡組較3月齡組TPH與β-actin的比值無統(tǒng)計學意義(P>0.05),但存在降低趨勢。(2)SERT與β-actin條帶相對吸光度值的比值分別為:中縫背核3月齡組為1.3705±0.0005,24月齡

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