OsAIL5基因參與硝酸鹽脅迫下水稻種子發(fā)芽過(guò)程的功能研究.pdf

1、目錄摘要1Abstract1第一章引言21轉(zhuǎn)錄因子一211轉(zhuǎn)錄因子的生理功能212植物特有的轉(zhuǎn)錄因子213轉(zhuǎn)錄因子與植物脅迫響應(yīng)214幾種植物特異性轉(zhuǎn)錄因子簡(jiǎn)介32AP2／EREBP轉(zhuǎn)錄因子421概述一422AP2／EREBP轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)構(gòu)與功能423AP2／EREBP轉(zhuǎn)錄因子的生物學(xué)功能53水稻731概述732水稻與硝酸鹽、激素的關(guān)系74OsAIL5基因的研究現(xiàn)狀及意義8第二章材料與方法一91材料911植物品系912菌株和載體913水

2、稻培養(yǎng)914主要酶和試劑915培養(yǎng)基和溶劑配方1016主要儀器設(shè)備102方法1021目的基因的進(jìn)化分析1022Real。timePCR檢測(cè)目的基因的表達(dá)模式1123農(nóng)桿菌介導(dǎo)的水稻轉(zhuǎn)化1324轉(zhuǎn)基因水稻的篩選和鑒定1925目的基因啟動(dòng)子活性鑒定一1926不同化合物脅迫下的水稻生長(zhǎng)發(fā)芽情況分析2027ABA相關(guān)Marker基因的realtimePCR檢測(cè)2028轉(zhuǎn)基因水稻的農(nóng)藝性狀分析21第三章結(jié)果2131OsAIL5基因的克隆和序列分析

3、2132OsAIL5在水稻不同器官中的表達(dá)譜2333發(fā)芽后水稻苗中OsAIL5啟動(dòng)子主要在生長(zhǎng)特定時(shí)期內(nèi)表達(dá)2334OsAIL5基因啟動(dòng)子受不同化合物的誘導(dǎo)情況2435OsAIL5轉(zhuǎn)基因植株的鑒定25摘要從水稻中克隆AP2／EI也BP轉(zhuǎn)錄因子家族基因OsAIL5(AINTEGUMENTA1ike5)，聚類分析結(jié)果表明OsAIL5為擬南芥AIL5的同源基因。啟動(dòng)子GUS染色分析顯示OsAIL5在種子發(fā)芽后生長(zhǎng)第5至7天表達(dá)，并主要定位于根

4、和幼葉中。以35S：：OsAIL5轉(zhuǎn)基因水稻為材料，從發(fā)芽率和生長(zhǎng)勢(shì)指標(biāo)都表明過(guò)表達(dá)OsAIL5基因會(huì)導(dǎo)致水稻種子對(duì)高濃度硝酸銨敏感，水稻生長(zhǎng)受到抑制。器官表達(dá)譜表明OsAIL5在種子中含量最高，同時(shí)受ABA激素的誘導(dǎo)，OsAIL5轉(zhuǎn)基因水稻對(duì)ABA敏感，這些結(jié)果暗示OsAIL5可能是通過(guò)ABA通路介導(dǎo)了種子對(duì)硝酸鹽的敏感性。關(guān)鍵詞：水稻；OsAIL5；啟動(dòng)子；硝酸銨；ABA中圖分類號(hào)：Q9432AbstractOsAIL5，amemb

5、erofAP2／EREBPtranscriptionfactors，wasclonedfromrice(OryzasativaL)PhylogeneticanalysisshowsOsAIL5ishomologousgeneofAIL5inArabidopsisthalianaTheactivitiesofGUSdrivenbyOsAIL5promoterwasonlydetectedin5to7daysafterthericegerm

6、inated，especiallyinrootsandyoungleavesOsAIL5overexpressingtransgenicplantscomparedwithwtalsoweakennitratetolerancewithlowergerminationrateandlessgrowthvigorTheexpressionofOsAIL5ismainlylocatedinriceseedandisinducedbyABA，

7、andOsAIL5一overexpressingtransgenicricewassensitivetoABAAlloftheseresultindicatedthatOsAIL5geneplayanimportantroleinseedgemiationrespondingtonitratethroughtheABApathwayKeywords：rice；OsAIL5；promoter；NIIaN03；ABAClassificati