多聚賴氨酸-硅納米制備及體外轉(zhuǎn)染細胞的實驗研究.pdf

1、隨著納米生物技術(shù)的飛躍發(fā)展，以納米顆粒為基礎(chǔ)的非病毒載體系統(tǒng)的出現(xiàn)，為實現(xiàn)安全高效的DNA轉(zhuǎn)染提供了更好的工具。其中無機納米顆粒載體通過表面恰當修飾可以克服機體各種屏障，靶向傳遞藥物或質(zhì)粒DNA，使其成為新型基因載體的研究熱點。硅是一種生物相容性好，低毒，表面易于修飾，適合用于納米基因載體的材料。 目的：制備多聚賴氨酸硅納米基因載體，并初步研究其轉(zhuǎn)染效果。 方法： 第一部分選用微乳體系為壬基酚聚氧乙烯醚/正己醇/

2、環(huán)己烷/雙蒸水，利用正硅酸乙酯在油包水型微乳體系中催化水解的方法制備硅納米。并用多聚賴氨酸為修飾物，使多聚賴氨酸通過靜電作用結(jié)合于硅納米表面，獲得基因載體-多聚賴氨酸．硅納米。 第二部分，通過瓊脂糖凝膠電泳，研究多聚賴氨酸-硅納米有效結(jié)合DNA的合適質(zhì)量比。 第三部分，將多聚賴氨酸-硅納米與綠色熒光蛋白質(zhì)粒(pEGFP-C1)結(jié)合在一起，體外轉(zhuǎn)染HepG2與L02，在倒置熒光顯微鏡下觀察轉(zhuǎn)染效率。 結(jié)果：制備了穩(wěn)