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1、組織培養(yǎng)技術(shù)被廣泛用于滿(mǎn)天星良種繁育,但傳統(tǒng)的組培方法有待進(jìn)一步改進(jìn)。在固體培養(yǎng)基成分確定的基礎(chǔ)上,應(yīng)用生物反應(yīng)器進(jìn)行繁殖對(duì)大量提供組培苗具有重要意義。本試驗(yàn)以滿(mǎn)天星莖段為試材,對(duì)滿(mǎn)天星常規(guī)固體增殖培養(yǎng)基的組成進(jìn)行了研究,且為了改進(jìn)常規(guī)組織培養(yǎng)法在生產(chǎn)滿(mǎn)天星組培苗時(shí)的不足,初步探索了利用生物反應(yīng)器進(jìn)行滿(mǎn)天星增殖培養(yǎng)的可行性,并對(duì)培養(yǎng)過(guò)程中生物反應(yīng)器的幾個(gè)可控環(huán)境進(jìn)行了調(diào)試。 固體培養(yǎng)基成分對(duì)滿(mǎn)天星增殖影響的研究結(jié)果表明:MS基本
2、培養(yǎng)基比SH、B<'85>和White基本培養(yǎng)基更有利于滿(mǎn)天星的增殖;含NH<,4><'+>/NO<,3><'->20/4.0 mM,總氮量90 mM的MS培養(yǎng)基加倍后能使?jié)M天星組培苗增殖率更高更健壯;與果糖和葡萄糖相比,蔗糖更有利于滿(mǎn)天星增殖;30g/L的蔗糖對(duì)滿(mǎn)天星增殖生長(zhǎng)有促進(jìn)作用,同時(shí)抑制玻璃苗的發(fā)生。 比較了生物反應(yīng)器液體培養(yǎng)和傳統(tǒng)固體培養(yǎng)對(duì)滿(mǎn)天星增殖的影響,發(fā)現(xiàn)在生物反應(yīng)器內(nèi)液體培養(yǎng)的每個(gè)外植體增殖個(gè)數(shù)達(dá)15.7個(gè),
3、而固體培養(yǎng)時(shí)僅為11.6個(gè),且不定苗的鮮物重和干物重顯著優(yōu)于固體培養(yǎng),大大縮短了生長(zhǎng)周期。因此利用生物反應(yīng)器繁殖滿(mǎn)天星不定苗是一種有效可行的方法。 采用2.5L柱狀氣升式生物反應(yīng)器對(duì)其內(nèi)部可控環(huán)境進(jìn)行了調(diào)試,認(rèn)為接種密度35個(gè)比接種密度25個(gè)和45個(gè)更有利于滿(mǎn)天星的增殖,既充分利用了空間又獲得了大量健壯的不定苗;滿(mǎn)天星增殖采用生物反應(yīng)器培養(yǎng)時(shí)4800 Lux光照強(qiáng)度對(duì)滿(mǎn)天星增殖培養(yǎng)最為有效;反應(yīng)器底部采用孔隙15μm的多孔噴頭,
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