利用間歇浸沒式生物反應器(TIBs)進行香蕉組培快繁研究.pdf

1、間歇浸沒式生物反應器(TIBs)是近年來新研究開發(fā)的一種用于植物組織培養(yǎng)和植物次生代謝物研究的系統(tǒng)。TIBs以液體培養(yǎng)基為基礎,在此基礎上進行自動化機械化來降低生產(chǎn)成本。與傳統(tǒng)半固體培養(yǎng)相比TIBs具有高增殖率、組培苗質量好、低成本等優(yōu)點,為進一步促進香蕉組培商業(yè)化,本試驗以廣西植物組培有限公司提供的經(jīng)半固體培養(yǎng)第六代香蕉不定芽(Musa AAA Cavendish var.Williams B6)為材料,對傳統(tǒng)半固體培養(yǎng)和TIBs培養(yǎng)

2、進行比較研究同時對TIBs培養(yǎng)中不同因素對香蕉組培快繁的影響進行研究。試驗主要結果如下:
　　 1.以第六代香蕉不定芽為材料,利用TIBs進行香蕉組培快繁研究,試驗研究表明:利用TIBs系統(tǒng)可以有效提高香蕉組織培養(yǎng)的增殖率,它的增殖率達到14.0以上,是傳統(tǒng)半固體培養(yǎng)的3-4倍;當接種材料為第七代香蕉不定芽,接種密度為100 mL培養(yǎng)基/外植體時,最有利于香蕉組培苗的生長和增殖;當糖濃度為30 g/t,時,最有利于香蕉苗的增殖和

3、生根;在TIBs系統(tǒng)培養(yǎng)中,當6-BA濃度為2.0 mg/L,時,對香蕉組培苗增殖最有利,而當GA濃度為1.0 mg/L時,NAA濃度為1.0 mg/L時,最有利于香蕉組培苗生根和生長;間歇頻率為4 min/3h時,最有利于香蕉組培苗增殖和生長,而當間歇頻率為4 min/6 h時,最有利于香蕉組培苗根的誘導及生長。
　　 2.以第六代香蕉不定芽為材料,在增殖階段,傳統(tǒng)半固體培養(yǎng)基配方為MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA0.

4、1 mg/L+6.0 g/L瓊脂粉+30 g/L蔗糖,而伸長階段,傳統(tǒng)半固體培養(yǎng)配方為MS+GA1.0 mg/L+NAA1.0 mg/L+6.0 g/L瓊脂粉+30 g/L蔗糖,TIBs在增殖和生根階段培養(yǎng)基不添加瓊脂粉,其余培養(yǎng)基成分與傳統(tǒng)半固體培養(yǎng)相同。培養(yǎng)50天后,對兩者進行比較研究,結果表明,TIBs系統(tǒng)培養(yǎng)與傳統(tǒng)培養(yǎng)相比擁有明顯的優(yōu)勢,TIBs系統(tǒng)培養(yǎng)出來的香蕉組培苗增殖率、株高、莖粗、根數(shù)、葉片數(shù)等形態(tài)指標均高于傳統(tǒng)半固體培

5、養(yǎng);且移栽成活率也略高于傳統(tǒng)半固體培養(yǎng)。
　　 3.在移栽后20天、40天、60天對兩種組培方式香蕉組培苗的光合特性及生理活性等進行研究,結果表明,隨著移栽天數(shù)的增加,兩種香蕉組培苗的光合速率、氣孔導度等逐漸增加,胞間CO2濃度逐漸下降,但TIBs香蕉苗幾個指標均高于傳統(tǒng)組培苗;兩種香蕉苗SOD、POD、葉綠素含量也隨著移栽天數(shù)的增加而增大,TIBs系統(tǒng)培養(yǎng)均高于傳統(tǒng)培養(yǎng);MDA含量隨移栽時間的增加而降低,而傳統(tǒng)培養(yǎng)苗MDA高于