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1、浙江大學(xué)博士學(xué)位論文bFGF在后發(fā)性白內(nèi)障形成中的作用及晶體上皮細(xì)胞生長(zhǎng)的藥物抑制姓名:孫朝暉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:博士專業(yè):眼科學(xué)指導(dǎo)教師:姚克1999.5.1、::bFGF在牛晶體上皮細(xì)胞的表達(dá)及血清對(duì)其表達(dá)的影響在眾多的促進(jìn)晶體上皮細(xì)胞增殖的生長(zhǎng)因子中,由于有證據(jù)表明bFGF住白內(nèi)障術(shù)后眼局部含苗明顯上升,同時(shí)術(shù)后bFGF在品體上皮細(xì)胞中的mRNA表達(dá)j二升,bFGF與后囊混濁關(guān)系受到人們的重視。但到目前為jr,尚無(wú)人對(duì)bFGF表達(dá)上升的
2、誘發(fā)因素進(jìn)行研究,本文通過(guò)Westernblot法及免疫組化法,檢測(cè)晶體上皮細(xì)胞中bFGF蛋白表達(dá)及血清對(duì)bFGF蛋白表達(dá)量的影響。免疫組化結(jié)果顯示,兒乎所有培養(yǎng)的BLEC胞漿中可表達(dá)bFGF蛋白Westernblot法檢測(cè)BLEC在18KD處可見(jiàn)一條帶,與bFGF標(biāo)準(zhǔn)蛋白位置一致,而在22KD、225KD、24KD處未見(jiàn)條帶,說(shuō)明體外培養(yǎng)的BLEC中不表達(dá)高分子量的bFGF。血清誘導(dǎo)BLECbFGF表達(dá)的時(shí)效、暈效關(guān)系顯示,bFGF表
3、達(dá)隨虹清濃度增加而增加,10%血清時(shí)bFGF表達(dá)最高,O2%、1%、10%血清處理組與對(duì)照組之間均有差異并有量效依賴性(p005)。四、牛晶體上皮細(xì)胞生長(zhǎng)的藥物抑制本實(shí)驗(yàn)用Giffmsa法觀察雙氯滅痛鈉及環(huán)孢霉素A(CsA)在體外對(duì)牛晶體上皮細(xì)胞增殖的影響。方法:牛晶體上皮細(xì)胞原代培養(yǎng)。第四代品體上皮細(xì)胞種入24孔板,加入不同濃度的雙氯滅痛鈉及環(huán)孢霉素A,72小時(shí)后用Giemsa法檢測(cè)細(xì)胞增殖抑制率。結(jié)果:雙氯滅痛鈉≥75ug/m1劑暈
4、依賴性抑制BLEC增殖(P(005),其IC,o=13370g/ml,環(huán)孢霉素A≥125ug/m1劑量依賴性抑制BLEC增殖(P(005),其ICⅢ=4065ug/ml。結(jié)論:l:bFGF、IGF—I及二者協(xié)同作用可能在品體摘除術(shù)后,晶體上皮細(xì)胞反彈性增殖過(guò)程中起一定的作塒。2:BLEC胞漿中可表達(dá)18KD的bFGF蛋白。血清可誘導(dǎo)BLECbFGF表達(dá),提示血房水屏障的破壞至少能部分解釋術(shù)后bFGF含量增高的原因。血清有可能通過(guò)誘導(dǎo)BL
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