續(xù)隨子種子和旋覆花的化學成分研究.pdf

1、續(xù)隨子(Euphorbia lathyris)為大戟科大戟屬植物。廣泛分布或栽培于歐洲、北非、中亞、東亞和南北美洲。中國引種栽培已久，生長于向陽山坡栽培或野生。種子橢圓形，表面有黑、褐色相雜的斑紋，長約5毫米。種子含油高達50％。種子藥用，能利尿、瀉下、通經(jīng)，外用涂治疥癬、惡瘡等癥，并可殺蟲[1]。續(xù)隨子種子在臨床上主要用于治療水腫、痰飲、積聚、脹滿、血瘀經(jīng)閉等證，某些地方用于治療血吸蟲、肝硬變、腎性水腫等[2]。續(xù)隨子中含有二萜、三萜

2、、香豆素和揮發(fā)油等化合物，主要成分為二萜化合物，也是其重要的活性成分，且以具有獨特結(jié)構(gòu)的千金二萜烷型成分L-factors著稱，此類成分除具有諸多藥理活性外，其結(jié)構(gòu)非?？赡芡ㄟ^跨環(huán)環(huán)合作用產(chǎn)生復(fù)雜的多環(huán)結(jié)構(gòu)，是生物體中合成多種二萜化合物的前體物[3]。因此，對于相似天然產(chǎn)物篩選對有效生物靶點作用的結(jié)構(gòu)研究，大量的大環(huán)L-factors是十分需要的。同時尋找續(xù)隨子中新的化學成分并在此基礎(chǔ)上進一步挖掘同類化合物的構(gòu)效關(guān)系，并以此為指導對其活

3、性成分進行深入研究也具有重要意義。本課題以續(xù)隨子的種子為研究對象，對其化學成分進行了系統(tǒng)的分離純化以及結(jié)構(gòu)確認，并對所得的部分單體化合物的抗腫瘤細胞株活性進行篩選。 目的：本研究旨在以續(xù)隨子種子為研究對象，利用硅膠柱色譜、聚酰胺柱色譜、葡聚糖凝膠色譜、制備薄層色譜、高效液相制備色譜以及重結(jié)晶等分離純化技術(shù)對其進行系統(tǒng)研究，尋找新的化學成分，并應(yīng)用UV、IR、MS、1H-NMR、13C-NMR、1H-1H-COSY、HMQC、HM

4、BC、NOESY等現(xiàn)代化手段完成單體化合物分子的結(jié)構(gòu)鑒定，開辟中藥資源，豐富中藥的多樣性；并對所得的部分單體化合物的抗腫瘤細胞株活性進行篩選，為進一步開發(fā)利用提供依據(jù)。方法：干燥的續(xù)隨子(Euphorbia lathyris)種子(4Kg)適當粉碎后，用95％乙醇連續(xù)回流提取三次，趁熱過濾，合并濾液減壓濃縮至粘膏狀(986g)，將其溶于水中形成懸濁液，分別用石油醚、二氯甲烷和醋酸乙酯萃取，繼而得到石油醚部位(760g)、二氯甲烷部位(2

5、.5g)和醋酸乙酯部位(2.7g)。本研究先后對這三部位采用硅膠柱色譜進行初步分離，經(jīng)薄層色譜檢識后，進一步用硅膠柱色譜、聚酰胺柱色譜、葡聚糖凝膠色譜、制備薄層色譜、高效液相制各色譜反復(fù)分離純化得到單體化合物。并運用UV、IR、HR-FAB-MS、1H-NMR、13C-NMR、1H-1H-COSY、HMQC、HMBC、NOESY等波譜學方法對這些單體化合物進行檢測，依據(jù)測定的圖譜數(shù)據(jù)分析確定單體化合物的平面結(jié)構(gòu)和立體結(jié)構(gòu)。 薄層

6、檢識中用薄層用硅膠GF254和0.5％的羧甲基纖維素鈉混勻后鋪制的硅膠薄板展開，揮盡展開劑后，現(xiàn)在254nm的紫外燈下觀察，再浸入10％的硫酸乙醇溶液后140℃加熱顯色。 分析型和制備型高效液相所用流動相均為甲醇-水兩相溶劑，梯度洗脫，分析型高效液相流動相流速為1mL/min，制備型高效液相流動相流速為3mL/min。 結(jié)果：通過系統(tǒng)提取分離植物續(xù)隨子(E.lattyris)的種子，從中得到8個單體化合物，并對其中5個進

7、行結(jié)構(gòu)鑒定，分別為3個二萜類化合物，1個香豆素類化合物以及1個甾體類化合物。這5個化合物的名稱分別為Euphorbia FactorL1：(2S*，3S*，4R*，5R*，6R*，11S*，15R*)-5，15-Diacetoxy-3-benzoyloxy-14-oxolathyra-6(17)，(12E)-diene-6(17)-epoxide(1)，Euphorbia Factor L2：(2S*，3S*，4R*，5R*，7R*，9

8、S*，11S*，15R*)-5，15-Diacetoxy-3，7-dibenzoyloxy-14-oxolathyra-6(17)，(12E)-diene(2)，Euphorbia Factor L3:(2S*，3S*，4R*，5R*，9S*，11S*，15R*)-5，15-Diacetoxy-3-benzoyloxy-14-oxolathyra-6(17)，(12E)-diene(3)，6，7-二羥基香豆素(5)，和(3β)-stig

9、ma-5-en-3-O-β-glucoside(6)。其中化合物6是首次在大戟屬植物中發(fā)現(xiàn)。結(jié)論：本課題對大戟屬植物續(xù)隨子(E.lathyris)種子的化學成分進行了系統(tǒng)研究，具體采用了硅膠柱色譜、聚酰胺柱色譜、葡聚糖凝膠色譜、制備薄層色譜、高效液相色譜等多種分離手段或方法，共分離得到8個化合物，并且運用了多種現(xiàn)代波譜手段及其相關(guān)知識，對其中的5個化合物進行了結(jié)構(gòu)鑒定?？鼓[瘤細胞株活性初篩結(jié)果顯示，化合物3對人子宮內(nèi)膜癌細胞(HEC-1