不同處方逍遙丸對(duì)肝郁脾虛證大鼠的干預(yù)效果研究.pdf

1、目的:逍遙散始載于《太平惠民和劑局方》，是治療肝郁脾虛證的中醫(yī)經(jīng)典方劑，逍遙散中含有生姜，但其成方制劑——逍遙丸卻有兩種處方，一種含有生姜，一種不含有生姜，但功能主治相同。這種現(xiàn)象出現(xiàn)的原因目前尚未見到相關(guān)的研究報(bào)道。生姜的存在是否對(duì)逍遙丸治療肝郁脾虛證有影響，進(jìn)而關(guān)系到是否應(yīng)修改其處方或適應(yīng)癥，本課題將進(jìn)一步進(jìn)行探討。
　　 方法:①研究對(duì)象:健康成年雄性SD大鼠;②處理方法:除陰性對(duì)照組外，其余各組均實(shí)施造模程序，給予應(yīng)激刺

2、激，刺激方法包括夾尾、禁水、禁食、4℃冰水浴、潮濕墊料，刺激順序隨機(jī)，同種刺激不能連續(xù)出現(xiàn)。造模即開始各給藥組ig給藥，模型組及陰性對(duì)照組給予等量純化水，周期21d，于第21天晚禁食不禁水，第二天早上進(jìn)行腹主動(dòng)脈采血，進(jìn)行NMR測定。③評(píng)價(jià)指標(biāo):從體征、曠場試驗(yàn)行為學(xué)（水平穿越格數(shù)、站立次數(shù)、修飾次數(shù)）兩個(gè)方面進(jìn)行考察，同時(shí)考慮到行為學(xué)三個(gè)指標(biāo)之間存在時(shí)間的唯一性和排它性，故引入一個(gè)綜合評(píng)價(jià)指標(biāo)——RSR(采用秩和比法將三個(gè)指標(biāo)轉(zhuǎn)化為一

3、個(gè)指標(biāo)RSR)，采用重復(fù)測量方差分析綜合評(píng)價(jià)其行為學(xué)特征;采用偏最小二乘判別分析(PLS-DA)對(duì)1H-NMR圖譜的化學(xué)位移和峰面積進(jìn)行分析。
　　 結(jié)果:行為學(xué)指標(biāo)評(píng)價(jià):與陰性對(duì)照組比較，模型組大鼠的水平穿越格數(shù)、站立次數(shù)下降幅度較大，組間差異均具有顯著性(F穿越=9.687，P穿越=0.006;F站立=9.673，P站立=0.006)，造模成功。兩試驗(yàn)組分別與模型組比較均有差別，但與陰性對(duì)照組比較均無差別，說明兩種處方的逍遙

4、丸均有抗肝郁脾虛的效果;兩試驗(yàn)組之間比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，故沒有足夠的證據(jù)可以推斷兩種處方逍遙丸的整體療效有差異。同時(shí)，在試驗(yàn)過程中，模型組大鼠的體重增長較為緩慢，含生姜逍遙組和無生姜逍遙組大鼠體重的增長趨勢較之更為接近陰性對(duì)照組，佐證了行為學(xué)的結(jié)論。
　　 代謝組學(xué)評(píng)價(jià):PLS-DA分析輪廓圖顯示含生姜逍遙組和無生姜逍遙組均能夠與模型組沿t1軸分開，但兩組差異無顯著性，提示兩組對(duì)模型大鼠代謝產(chǎn)物整體回調(diào)作用基本一致。其中，與

5、陰性對(duì)照組比較，模型組大鼠血清中α-葡萄糖、蘇氨酸、氧化三甲胺、膽堿、谷氨酰胺、丙酮酸、乙酰乙酸、醋酸等8種小分子代謝產(chǎn)物差異均具有顯著性（P＜0.05），表明這8種內(nèi)源性代謝物與肝郁脾虛證發(fā)病關(guān)系較為密切，可能是肝郁脾虛證潛在的生物標(biāo)志物。經(jīng)藥物干預(yù)后，與模型組比較，兩試驗(yàn)組中這8種代謝產(chǎn)物均具有不同程度的回調(diào)，除醋酸外，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明逍遙丸有抗肝郁脾虛的作用，但是兩試驗(yàn)組間無差別。再者，有9種未知物，兩試驗(yàn)組之間比較有差別

6、，這說明生姜影響了模型動(dòng)物體內(nèi)的一些微觀機(jī)制。但是這9種未知物，在體內(nèi)參與何種代謝途徑，目前尚不清楚，需進(jìn)一步研究確認(rèn)。這9種未知組分可能是逍遙丸制劑中是否含有生姜引起體內(nèi)代謝差異的關(guān)鍵性生物標(biāo)志物。
　　 結(jié)論:綜上所述，本課題可得出以下結(jié)論:1.行為學(xué)實(shí)驗(yàn)及結(jié)果表明，逍遙丸對(duì)肝郁脾虛證有較好的治療作用，是否含有生姜對(duì)其整體療效無顯著影響。2.代謝組學(xué)結(jié)果表明，①逍遙丸對(duì)模型動(dòng)物體內(nèi)一些小分子代謝物有不同程度的回調(diào)作用;②是否