梗阻性黃疸患者腸黏膜IL-6、NF-κB、ICAM-1的表達(dá)及其意義.pdf

1、目的：梗阻性黃疸可導(dǎo)致腸黏膜屏障功能下降，腸道內(nèi)細(xì)菌、內(nèi)毒素通過受損的腸黏膜進(jìn)入血液循環(huán)，從而產(chǎn)生一系列并發(fā)癥，如內(nèi)毒素血癥和腎功能衰竭等，甚至危及患者的生命，但是腸黏膜損傷的機(jī)制尚不完全清楚。梗阻性黃疸時，腸道內(nèi)的細(xì)菌和內(nèi)毒素增多，引起機(jī)體的免疫反應(yīng)，釋放炎癥介質(zhì)和細(xì)胞因子。白細(xì)胞介素-6(interleukin-6，IL-6)是一種具有廣泛免疫調(diào)節(jié)作用的細(xì)胞因子，可由免疫細(xì)胞及多種相關(guān)細(xì)胞產(chǎn)生分泌，是一種重要的炎癥介質(zhì)，介導(dǎo)炎癥的發(fā)

2、生。IL-6能刺激B細(xì)胞增殖分化，并誘導(dǎo)成熟B細(xì)胞分泌抗體。同時作為肝細(xì)胞刺激因子，IL-6可誘導(dǎo)炎癥急性期蛋白的合成并可通過對T輔助淋巴細(xì)胞的活化和分化而介導(dǎo)不同的免疫和炎癥反應(yīng)。核因子κB(nuclear factor of kappaB，NF-κB)是由Sen等于1986年首次從B細(xì)胞核提取物中發(fā)現(xiàn)的一種能與免疫球蛋白k輕鏈基因的增強(qiáng)子κB序列特異結(jié)合的蛋白因子，通常與其抑制蛋白IκB結(jié)合成無活性的形式存在于胞漿中，誘導(dǎo)激活信號可

3、使它們分離。NF-κB是一種重要的轉(zhuǎn)錄因子，能與多種細(xì)胞基因啟動子或增強(qiáng)子序列特定位點(diǎn)發(fā)生特異性結(jié)合而促進(jìn)轉(zhuǎn)錄和表達(dá)，與炎癥反應(yīng)、免疫應(yīng)答以及細(xì)胞的增生、轉(zhuǎn)化和凋亡等重要的病理生理過程密切相關(guān)。細(xì)胞間黏附分子-1 (intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1)是一類介導(dǎo)細(xì)胞與細(xì)胞、細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)問黏附作用的跨膜糖蛋白。ICAM-1具有多種生物功能，如介導(dǎo)細(xì)胞黏附、趨化、淋巴細(xì)胞歸巢等作用，參與炎癥

4、和免疫反應(yīng)，在機(jī)體的生理和病理過程中發(fā)揮作用，其通常以配體和受體相結(jié)合的方式發(fā)揮作用。在正常情況下，ICAM-1很少表達(dá)或不表達(dá)。當(dāng)受到炎性細(xì)胞因子(如IL-1、TNF-α等)及內(nèi)毒素等刺激后，可表達(dá)于多種細(xì)胞上。本試驗(yàn)通過光鏡及電鏡觀察梗阻性黃疸患者腸黏膜形態(tài)學(xué)及超微結(jié)構(gòu)的改變，并采用免疫組織化學(xué)(SP)方法檢驗(yàn)IL-6、NF-kB、ICAM-1在梗阻性黃疸患者腸黏膜的表達(dá)情況，旨在闡明IL-6、NF-kB和ICAM-1與梗阻性黃疸患

5、者腸黏膜損傷的關(guān)系。 方法：收集2007年6月至2007年11月在河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院消化科行ERCP檢查或治療的梗阻性黃疸患者15例作為病例組，其中膽管結(jié)石所致黃疸者9例，壺腹周圍癌所致黃疸者6例。收集無黃疸且十二指腸無炎癥者15例作為對照組。病例組與對照組均在ERCP檢查時于十二指腸降部Vater’壺腹遠(yuǎn)端2～3cm.處取活檢。兩組均鉗取腸黏膜組織3塊，其中1塊以4％戊二醛固定，制備電鏡標(biāo)本，應(yīng)用透射電鏡觀察腸黏膜超微結(jié)構(gòu)的

6、改變。2塊以10％甲醛固定，常規(guī)石蠟包埋，4μm超薄切片，做HE染色在光鏡下觀察腸黏膜的形態(tài)學(xué)改變，并采用免疫組織化學(xué)(SP)的方法檢測對照組及病例組腸黏膜IL-6、NF-KB、ICAM-1的表達(dá)情況，對其進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析觀察其表達(dá)有無差異。 結(jié)果：光鏡下觀察，對照組腸黏膜絨毛排列整齊，高度一致，上皮細(xì)胞排列整齊；病例組腸黏膜絨毛排列紊亂，變短或缺失，絨毛間距變寬，并可見上皮細(xì)胞及腺體壞死。在電鏡下觀察，對照組腸黏膜微絨毛排列密集

7、，連接復(fù)合體完整；病例組連接復(fù)合體尚完整，但微絨毛明顯稀疏，上皮柱狀細(xì)胞變扁平，線粒體腫脹、嵴斷裂、甚至空泡樣變，并可見細(xì)菌黏附在黏膜表面。免疫組化結(jié)果顯示，病例組腸黏膜IL-6和NF-κB陽性表達(dá)為細(xì)胞核及細(xì)胞漿呈棕黃色，對照組IL-6和NF-κB陽性表達(dá)以細(xì)胞核為主，陽性細(xì)胞主要為炎性細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞及上皮細(xì)胞。病例組腸黏膜ICAM-1陽性表達(dá)為細(xì)胞漿呈棕黃色，對照組陽性表達(dá)較少，陽性細(xì)胞主要為炎性細(xì)胞及腺體細(xì)胞。病例組腸黏膜IL