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1、竹類植物作為禾本科植物中的一員,其生長(zhǎng)周期長(zhǎng),開花時(shí)間不確定,且開花后立即死亡等開花特性不同于普通禾本科植物,這些開花特性使得對(duì)竹類植物開花機(jī)理的解釋變得困難;同時(shí)竹產(chǎn)業(yè)在消除貧困和經(jīng)濟(jì)發(fā)展中扮演越來(lái)越重要的角色,然而竹子開花會(huì)使竹產(chǎn)業(yè)的經(jīng)濟(jì)效應(yīng)顯著下滑。故研究竹子開花具有較高的理論意義和社會(huì)經(jīng)濟(jì)價(jià)值。擬南芥PIN1-type parvulin1,Pin1At作為開花激活者,通過(guò)加速SOC1和AGL24中磷酸化的絲氨酸/蘇氨酸-脯胺酸基
2、團(tuán)順?lè)串悩?gòu)來(lái)調(diào)控成花轉(zhuǎn)變。竹類植物中Pin1At同源基因是否影響竹子開花尚不清楚。本文針對(duì)PvPin1基因進(jìn)行了內(nèi)含子克隆、轉(zhuǎn)化擬南芥和水稻、啟動(dòng)子克隆及活性分析、亞細(xì)胞定位等實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明:
(1)PvPin1蛋白與單子葉植物中的Pin1-like蛋白可聚為一類,其中PvPin1與毛竹Pin1-like親緣關(guān)系最近。PvPin1蛋白與植物中的Pin1-like蛋白結(jié)構(gòu)相似,都只含有一個(gè)催化域而不含有WW功能域。
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3、2)PvPin1的基因結(jié)構(gòu)與玉米(Zea mays)、水稻(Oryza sativa)、大豆(Glycine soja)、擬南芥(Arab idopsis thaliana)、葡萄(Vitis vinfera)、荷花(Nelumbo nucifera)、煙草(Nicotiana attenuata)中的Pin1同源基因的基因結(jié)構(gòu)相似,都只含有一個(gè)內(nèi)含子。
(3)通過(guò)在擬南芥中過(guò)量表達(dá)PvPin1,發(fā)現(xiàn)T3代轉(zhuǎn)基因擬南芥純合株系
4、較野生型擬南芥有顯著性的晚花表型;同時(shí)發(fā)現(xiàn)PvPin1可能通過(guò)下調(diào)SOC1和AGL24的表達(dá)水平來(lái)延遲轉(zhuǎn)基因擬南芥開花。
(4)通過(guò)在水稻中過(guò)量表達(dá)PvPin1,發(fā)現(xiàn)T3代轉(zhuǎn)基因水稻純合株系同野生型水稻相比有顯著的晚花表型;同時(shí)發(fā)現(xiàn)PvPin1可能通過(guò)上調(diào)OsMADS56的表達(dá)水平使轉(zhuǎn)基因水稻延遲抽穗。
(5)亞細(xì)胞定位實(shí)驗(yàn)表明PvPin1-GFP的綠色熒光蛋白主要分布于細(xì)胞膜上,細(xì)胞核中也有少量分布。
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