綠竹BoTFL1基因的克隆和功能分析.pdf

1、TFL1同源基因在維持植物營養(yǎng)生長以及花序分生組織特性等方面起著十分重要的作用,其突變體導致植物提早開花,正常的花序發(fā)育受到抑制,最終莖端形成一朵頂花。竹類植物是多年生植物,且開花時間不確定,因此研究TFL1基因?qū)χ褡娱_花機理的研究具有十分重要的意義。本文利用禾本科植物TFL1同源基因在序列上的保守性,設計引物,采用RT-PCR技術與RACE技術,從綠竹中克隆得到開花抑制基因TFL1的全長cDNA序列833bp,基因組全長1225bp,

2、開放閱讀框(ORF)為522bp,可編碼173個氨基酸,5’非編碼區(qū)(5’UTR)長85bp,3’非編碼區(qū)(3'UTR)長226bp。并對該基因的氨基酸序列進行預測,同時分析了該蛋白二級結(jié)構(gòu),結(jié)果表明該蛋白具有豐富的螺旋卷曲(randomcoil),同時含有p一轉(zhuǎn)角結(jié)構(gòu)(betaturn)以及延伸結(jié)構(gòu)(Extendedstrand)?；谧畲笏迫环?gòu)建系統(tǒng)進化樹,對20個物種的TFL1基因的氨基酸序列分析表明,綠竹的TFL1基因與高粱、

3、玉米、水稻、大麥等禾本科植物的TFL1同源基因均有90％以上的一致性。Real-TimePCR結(jié)果表明BoTFL1基因在花芽中的表達量是營養(yǎng)芽中表達量的4.5倍。35S::BoTFLI轉(zhuǎn)基因擬南芥在T3代以前均表現(xiàn)出明顯的晚花表型,到T3代以后開花時間和野生型擬南芥沒有明顯的差異,我們推測BoTFL1可能是在擬南芥的生長發(fā)育過程中發(fā)生了基因沉默。同時轉(zhuǎn)基因擬南芥的花蕾和萼片也發(fā)生了結(jié)構(gòu)的改變,表明BoTFL1基因可能與綠竹的開花時間和花