柔嫩艾美耳球蟲雜交F2株致弱方法及免疫原性的研究.pdf

1、雞球蟲病(Coccidiosis)是一種分布廣、危害性大的腸道寄生原蟲病，它主要侵害雞的腸上皮細(xì)胞。該病以出血性腸炎、血痢、雛雞高發(fā)病率和死亡率為特征，成為危害養(yǎng)雞業(yè)的重要疾病之一。目前，控制球蟲病仍以藥物防治為主，但由于耐藥蟲株的普遍產(chǎn)生以及化學(xué)藥物的殘留等問(wèn)題使得抗球蟲藥物的研制開發(fā)受到極大的限制。免疫預(yù)防是控制球蟲病的理想方法，利用雞弱毒球蟲疫苗防治雞球蟲病不僅能徹底解決雞球蟲的耐藥性問(wèn)題，而且能夠生產(chǎn)出綠色食品，保證肉、蛋質(zhì)量。

2、本研究探索致弱柔嫩艾美耳球蟲雜交株卵囊的物理和化學(xué)方法，并對(duì)致弱卵囊免疫保護(hù)性和抗體消長(zhǎng)規(guī)律進(jìn)行研究。 采用常規(guī)法擴(kuò)增雜交株卵囊，并用物理方法和化學(xué)方法將其致弱。首先，將孢子化卵囊，在一定功率、不同超聲時(shí)間的超聲波作用下致弱，置于4℃冰箱備用。然后，配制化學(xué)致弱劑，將孢子化卵囊和化學(xué)致弱劑攪拌混合均勻，置于4℃冰箱致弱40d。將致弱卵囊口服接種肉雞，進(jìn)行肉雞免疫性能試驗(yàn)。用卵囊計(jì)數(shù)、糞便記分、平均增重和免疫存活率等指標(biāo)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分

3、析。建立檢測(cè)雞血清抗體OD值的間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)，按照間接ELISA實(shí)驗(yàn)方法的程序確定抗原最佳包被濃度、酶結(jié)合物工作濃度、被檢血清最佳稀釋度。采用上述條件探討物理和化學(xué)方法致弱雜交卵囊免疫雞后血清抗體OD值的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律。 實(shí)驗(yàn)表明，超聲波致弱柔嫩艾美耳球蟲雜交F2株卵囊10min可有效地使球蟲卵囊的毒力減弱，免疫劑量為每只雞4×10<'3>個(gè)卵囊，分別于7日齡和14日齡口服接種致弱雜交球蟲卵囊疫苗免疫，攻蟲后7

4、d肉雞平均增重達(dá)155g，與對(duì)照組每只雞平均增重25g相比差異極顯著(p<0.01)，攻蟲存活率達(dá)100％。使用廉價(jià)、易得的化學(xué)試劑制備化學(xué)致弱劑，確定免疫劑量為每只雞8×10<'3>個(gè)感染性卵囊，分別于7日齡和14日齡口服致弱球蟲卵囊疫苗免疫，攻蟲后7d肉雞平均增重達(dá)165g，與對(duì)照組每只雞平均增重25g相比差異極顯著(p<0.01)，攻蟲存活率也達(dá)100％。選用的化學(xué)致弱劑致弱F2株卵囊及在一定功率下超聲處理雜交F2株卵囊10min