被動吸煙對大鼠血清和肺組織中白介素17表達(dá)的影響.pdf

1、目的:吸煙是影響健康的主要危險因素，可顯著增加呼吸道感染、冠心病、惡性腫瘤等多種疾病的發(fā)病率。根據(jù)流行病學(xué)調(diào)查數(shù)據(jù)結(jié)果可以看出:雖然人們的吸煙率呈現(xiàn)下降趨勢，但被動吸煙狀況卻十分嚴(yán)峻。我國每年死于吸煙相關(guān)疾病的人數(shù)逐年增長。肺臟作為與外界相通的器官，最先受到影響，而且影響最嚴(yán)重。當(dāng)人體主動或被動吸入香煙煙霧時可引起呼吸道黏膜損傷，導(dǎo)致呼吸道慢性炎癥。隨著人們對煙草危害的不斷研究，發(fā)現(xiàn)多種細(xì)胞及細(xì)胞因子參與了吸煙導(dǎo)致肺損傷的發(fā)病過程。隨著

2、對T淋巴細(xì)胞研究的不斷深入，發(fā)現(xiàn)CD4+T細(xì)胞即(Th17)在與吸煙相關(guān)的肺部疾病(如慢性阻塞性肺疾病(COPD))中表達(dá)升高。白介素17(IL-17)是由Th17分泌的最具有代表性的細(xì)胞因子。大量研究證明IL-17是一種前炎性細(xì)胞因子，能夠促進中性粒細(xì)胞聚集和活化，導(dǎo)致機體產(chǎn)生強烈的炎癥反應(yīng)。關(guān)于IL-17的大部分研究主要集中在自身免疫性疾病，而對其在吸煙相關(guān)性肺損傷中的作用尚不十分清楚。
　　本研究通過熏煙法建立大鼠被動吸煙模

3、型。通過控制大鼠被動吸煙時間，觀察被動吸煙前后大鼠一般狀況、肺臟病理變化、血清和肺組織中IL-17的表達(dá)，探討不同被動吸煙時間對肺損傷的影響及戒煙后肺損傷的恢復(fù)情況，進一步探討IL-17在吸煙相關(guān)性肺損傷中的作用機制，加深人們對吸煙危害健康的認(rèn)識，為開展戒煙運動提供理論依據(jù)。
　　方法:清潔級雄性Wistar大鼠50只，隨機分為5組:正常對照組(NC組)、被動吸煙4周組（4PS組）、被動吸煙8周組（8PS組）、被動吸煙12周組（1

4、2PS組）、戒煙組（CS組），每組10只。被動吸煙組分別置于香煙煙霧環(huán)境4周、8周、12周，正常對照組置于無煙環(huán)境。采用3％戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉，腹主動脈放血處死動物，收集血清，選用ELISA方法檢測血清中IL-17的含量。留取右肺下葉組織，4％多聚甲醛溶液固定，通過石蠟包埋、切片，HE染色，觀察各組肺組織形態(tài)學(xué)變化;采用免疫組織化學(xué)染色方法檢測IL-17在肺組織中的表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　1.被動吸煙組大鼠出現(xiàn)毛色變黃、

5、脫落，色澤亮度下降等表現(xiàn)，隨著被動吸煙持續(xù)時間的延長，大鼠皮毛逐漸由淺黃變?yōu)樯铧S、脫落增多，活動下降，被動吸煙12周組大鼠表現(xiàn)最明顯。戒煙組大鼠戒煙滿8周時活動狀態(tài)、皮毛色澤、亮度等較持續(xù)被動吸煙12周組大鼠好轉(zhuǎn)，但仍不及正常對照組。
　　2.各被動吸煙組（4、8、12周）大鼠與正常對照組比較體重增加緩慢。被動吸煙4組和正常對照組大鼠體重分別為（290.37±18.29g、296.95±14.14g），差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.0

6、5）。被動吸煙8周組和正常對照組大鼠體重分別為(355.63±17.95g、383.58±18.26g)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。被動吸煙12周組和正常對照組大鼠體重分別為(406.10±25.03g、464.70±20.67g)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。戒煙組與正常對照組大鼠體重分別為（485.94±20.48g、491.52±21.87g），差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。
　　3.HE染色結(jié)果顯示:正常

7、對照組大鼠氣道和肺泡結(jié)構(gòu)完整。被動吸煙4周組大鼠氣道上皮出現(xiàn)纖毛倒伏、排列不規(guī)則及部分脫落現(xiàn)象;氣道周圍可見大量中性粒細(xì)胞浸潤。隨著被動吸煙時間的增加，大鼠肺臟損傷逐漸加重，大量炎性細(xì)胞浸潤，肺泡壁擴張、變薄，出現(xiàn)肺氣腫表現(xiàn)，被動吸煙12周組表現(xiàn)最顯著。戒煙組大鼠仍可觀察到炎癥細(xì)胞浸潤和肺氣腫表現(xiàn)，與被動吸煙12周組比較病變減輕。
　　4.被動吸煙致大鼠血清中IL-17表達(dá)增多，被動吸煙4、8、12周組大鼠血清中IL-17含量分別

8、為（118.29±15.71 pg/ml、148.99±17.01 pg/ml、175.70±15.40 pg/ml），與正常對照組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05），并且各被動吸煙組相互比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。戒煙組血清中IL-17（151.31±20.61 pg/ml）與正常對照組（98.99±12.26 pg/ml）比較，表達(dá)升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);戒煙組與單純被動吸煙8周組（148.99±1

9、7.01 pg/ml）比較，輕度升高，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05);戒煙組與被動吸煙12周組（175.70±15.40pg/ml）比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　5被動吸煙4、8、12周組大鼠肺組織中IL-17主要表達(dá)于氣道上皮細(xì)胞，隨著被動吸煙時間的增加，氣道上皮IL-17表達(dá)的顏色由淺黃逐漸變?yōu)樽攸S色、黃褐色。被動吸煙12周組大鼠氣道上皮IL-17表達(dá)的顏色呈黃褐色。戒煙組顏色較被動吸煙12周組變淺，較被動