槲皮素對實驗性被動吸煙牙周炎大鼠牙周的治療作用及肺組織的影響.pdf

1、目的：通過牙周結(jié)扎建立大鼠實驗性牙周炎模型、密閉熏煙建立實驗性被動吸煙模型；去除結(jié)扎絲建立牙周炎局部治療模型、停止熏煙建立戒煙模型；同時配合槲皮素藥物治療；觀察大鼠牙周組織和肺組織的形態(tài)、牙周組織中蛋白酪氨酸磷酸酶-2（SHP-2）的表達情況。探討被動吸煙對實驗大鼠牙周組織及肺組織炎癥的影響、槲皮素對牙周炎及肺部損傷的治療作用，為槲皮素治療被動吸煙造成的牙周炎及肺部損傷的臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)和實驗參考。
　　方法：將88只6月齡雄

2、性SD大鼠隨機抽取10只，記為正常對照組（N組），剩余大鼠隨機分為3組，分別記為牙周炎組（L組），被動吸煙組（P組），被動吸煙牙周炎組（LP組），L、LP組麻醉下行牙周結(jié)扎，P、LP組采用密閉熏煙的方法進行被動吸煙的干預(yù)。8周后，N組全部處死，L、P、LP組各隨機抽取6只處死，取上頜骨和肺組織標(biāo)本。同時L、P、LP組剩余大鼠，L、LP組麻醉下去除結(jié)扎絲，P、LP組停止熏煙。L、P、LP組分別隨機分為兩組：牙周治療+槲皮素組（RL+Q組）

3、，牙周治療+空白組（RL+S組）；戒煙+槲皮素組（SP+Q組），戒煙+空白組（SP+S組）；牙周治療+戒煙+槲皮素組（RL+SP+Q組），牙周治療+戒煙+空白組（RL+SP+S組），槲皮素按80mg/（kg/d）給藥，正常喂養(yǎng)。8周后，處死各組大鼠，取上頜骨和肺組織標(biāo)本。上頜骨標(biāo)本和肺組織標(biāo)本10％福爾馬林溶液中固定48小時，上頜骨標(biāo)本10%EDTA溶液中脫鈣。各組標(biāo)本制作HE染色切片，觀察牙周組織及肺組織的形態(tài)學(xué)變化，免疫組化法檢測各

4、組牙周組織中SHP-2的表達變化，統(tǒng)計學(xué)分析處理。
　　結(jié)果：
　　1.正常對照組（N組）常規(guī)喂養(yǎng)8周后，牙周組織肉眼觀：牙齦形態(tài)良好，牙面可見少量軟垢，探診無出血，齦溝底位于釉牙骨質(zhì)界處；光鏡下觀察：牙周結(jié)締組織下無炎細胞浸潤，牙槽嵴頂形態(tài)規(guī)則。
　　2.牙周結(jié)扎，密閉熏煙8周后牙周組織觀察：
　　2.1.牙周炎組（L組）肉眼觀：牙齦紅腫，結(jié)扎絲周圍大量軟垢，牙周探診出血，可探及牙周袋；光鏡下觀察：結(jié)合上皮向根

5、方增殖，牙槽嵴頂處骨吸收，牙槽骨中出現(xiàn)活躍的破骨細胞性骨吸收陷窩，固有牙槽骨破壞；免疫組織化學(xué)染色顯示：牙周炎組大鼠牙周組織中 SHP-2的表達增加，與正常組相比，有顯著統(tǒng)計學(xué)差異（P<0.05）。
　　2.2.被動吸煙組（P組）肉眼觀：牙齦紅腫，牙周探診出血，齦溝底位于釉牙骨質(zhì)界處；光鏡下觀察：上皮結(jié)締組織下可見少量炎細胞浸潤，牙槽嵴頂形態(tài)不規(guī)則。免疫組織化學(xué)染色顯示：被動吸煙組大鼠牙周組織中SHP-2的表達增加，與正常組大鼠相

6、比，有顯著統(tǒng)計學(xué)差異（P<0.05）。2.3被動吸煙牙周炎組（LP組）肉眼觀：牙齦紅腫，結(jié)扎絲周圍大量軟垢，牙周探診出血，可探及深牙周袋；光鏡下觀察：結(jié)合上皮向根方增殖，牙槽嵴頂處出現(xiàn)明顯的骨吸收，牙槽骨中出現(xiàn)大量活躍的破骨細胞性骨吸收陷窩，固有牙槽骨破壞嚴重；免疫組織化學(xué)染色顯示：被動吸煙牙周炎組大鼠牙周組織中 SHP-2的表達顯著增加，與牙周炎組大鼠相比，有顯著統(tǒng)計學(xué)差異（P<0.05）。
　　3.正常對照組（N組）常規(guī)喂養(yǎng)8

7、周后，肺組織肉眼觀：大鼠肺呈粉紅色，色澤光亮，彈性較好；光鏡下觀察：大鼠肺間質(zhì)及支氣管壁未見炎細胞浸潤，肺泡間隔未見毛細血管擴張充血，支氣管黏膜纖毛排列有序。
　　4.牙周結(jié)扎，密閉熏煙8周后肺織觀察：
　　4.1.牙周炎組（L組）肉眼觀：形態(tài)與正常對照組基本相同；光鏡下觀察：大鼠肺間質(zhì)及支氣管壁未見炎細胞浸潤，肺泡間隔偶可見毛細血管擴張充血，支氣管黏膜纖毛排列有序。
　　4.2.被動吸煙組（P組）肉眼觀：大鼠肺局部呈

8、棕黑色，色澤暗淡，彈性較差；光鏡下觀察：大鼠肺間質(zhì)及支氣管壁局部出現(xiàn)大量炎細胞聚集，肺泡間隔中毛細血管擴張充血，支氣管黏膜纖毛減少或消失。
　　4.3.被動吸煙牙周炎組（LP組）肉眼觀：大鼠肺局部呈棕黑色，色澤暗淡，彈性較差；光鏡下觀察：大鼠肺間質(zhì)及支氣管壁局部出現(xiàn)較大量炎細胞聚集，肺泡間隔中毛細血管擴張充血嚴重，支氣管黏膜纖毛減少或消失。
　　5.去除結(jié)扎絲，停止熏煙，同時配合槲皮素藥物治療8周后牙周組織觀察：
　　

9、5.1.牙周治療+槲皮素組（RL+Q組）肉眼觀：牙齦乳頭略紅腫，牙周袋深度變淺；光鏡下觀察：牙周結(jié)締組織內(nèi)可見少量炎癥細胞浸潤，牙周袋與牙槽骨之間可見大量新生的纖維結(jié)締組織，牙槽骨吸收處可見較多的成骨細胞；免疫組織化學(xué)染色顯示：牙周治療+槲皮素組（RL+Q組）大鼠牙周組織中SHP-2的表達顯著降低，與牙周治療+空白組（RL+S組）大鼠相比，有顯著統(tǒng)計學(xué)差異（P<0.05）。
　　5.2.戒煙+槲皮素組（SP+Q組）肉眼觀：牙齦顏色

10、形態(tài)基本正常，齦溝底位于釉牙骨質(zhì)界處；光鏡下觀察：牙周結(jié)締組織內(nèi)幾乎未見炎細胞浸潤，牙槽嵴頂形態(tài)基本正常；免疫組織化學(xué)染色顯示：戒煙+槲皮素組（SP+Q組）大鼠牙周組織中SHP-2的表達顯著降低，與戒煙+空白組（SP+S組）大鼠相比，有顯著統(tǒng)計學(xué)差異（P<0.05）。
　　5.3.牙周治療+戒煙+槲皮素組（RL+SP+Q組）肉眼觀：牙齦乳頭略紅腫，牙周袋深度變淺；光鏡下觀察：溝內(nèi)上皮及結(jié)合上皮下方可見少量炎細胞浸潤，牙周袋與牙槽骨

11、之間可見大量新生的纖維結(jié)締組織，牙槽骨吸收處可見較多的成骨細胞；免疫組織化學(xué)染色顯示：牙周治療+戒煙+槲皮素組（RL+SP+Q組）大鼠牙周組織中SHP-2的表達顯著降低，與牙周治療+戒煙+空白組（RL+SP+S組）大鼠相比，有顯著統(tǒng)計學(xué)差異（P<0.05）。5.4牙周治療+空白組（RL+S組）、戒煙+空白組（SP+S組）和牙周治療+戒煙+空白組（RL+SP+S組）牙周狀況均未見明顯改善；免疫組織化學(xué)染色顯示：牙周治療+空白組（RL+S組

12、）與牙周炎組（L組）、戒煙+空白組（SP+S組）與被動吸煙組（P組）、牙周治療+戒煙+空白組（RL+SP+S組）與被動吸煙牙周炎組（LP組）相比，大鼠牙周組織中SHP-2的表達均無明顯統(tǒng)計學(xué)差異（P>0.05）。
　　6.去除結(jié)扎絲，停止熏煙，同時配合槲皮素藥物治療8周后，肺組織觀察：
　　6.1.牙周治療+槲皮素組（RL+Q組）肉眼觀：形態(tài)與正常對照組基本相同；光鏡下觀察：大鼠肺間質(zhì)及支氣管壁未見炎細胞浸潤，肺泡間隔基本無

13、毛細血管擴張充血，支氣管黏膜纖毛排列有序。
　　6.2.戒煙+槲皮素組（SP+Q組）肉眼觀：大鼠肺色澤光亮，彈性增加；光鏡下觀察：肺間質(zhì)及肺支氣管壁中可見較少量炎細胞浸潤，肺泡間隔局部偶可見毛細血管擴張充血。
　　6.3.牙周治療+戒煙+槲皮素組（RL+SP+Q組）肉眼觀：大鼠肺色澤光亮，彈性增加；光鏡下觀察：肺間質(zhì)及肺支氣管壁中可見少量炎細胞浸潤，肺泡間隔局部可見毛細血管擴張充血。
　　6.4.牙周治療+空白組（RL

14、+S組）、戒煙+空白組（SP+S組）和牙周治療+戒煙+空白組（RL+SP+S組）肺部狀況均未見明顯改善。
　　結(jié)論：
　　1.正畸結(jié)扎絲結(jié)扎大鼠上頜第一磨牙，高糖食物喂養(yǎng)成功建立實驗性牙周炎動物模型。
　　2.采用密閉熏煙的方法成功建立實驗性被動吸煙大鼠模型。
　　3.被動吸煙可引起并加重牙周組織的炎癥性改變。
　　4.被動吸煙可引起肺組織損傷。
　　5.槲皮素對被動吸煙造成的牙周炎和肺部損傷具有治療