田七注射液對(duì)阿霉素腎纖維化大鼠SnoN-TGF-β1-Smads信號(hào)通路通路的影響.pdf

1、目的:觀察田七注射液對(duì)阿霉素(ADR)腎纖維化大鼠腎臟Smad轉(zhuǎn)錄共抑制因子(SnoN)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(TGF-β1)、Smad3、Smad6蛋白表達(dá)的影響，探討田七注射液抗腎纖維化的作用機(jī)制。
　　 方法:清潔級(jí)SD雄性大鼠80只，隨機(jī)分為4組:正常組(n=20)，對(duì)照組(n=20)，模型組(n=20)，田七注射液治療組（以下簡(jiǎn)稱田七組）(n=20)。通過切除大鼠右腎，術(shù)后第7天及第30天分別尾靜脈注射ADR5mg/kg

2、、3mg/kg建立ADR腎纖維化大鼠模型，對(duì)照組僅切除右腎，不注射ADR，予生理鹽水(1.5ml/100g·d)腹腔注射;模型組造模后予生理鹽水(1.5ml/100g·d)腹腔注射;田七組造模后予田七注射液(1.5ml/100g·d)腹腔注射給藥;正常組不予任何處理。每周測(cè)大鼠體重，隔周收集大鼠24h尿量，測(cè)24h尿蛋白定量。連續(xù)給藥56天后處死大鼠，處死前收集腹主動(dòng)脈血和腎組織標(biāo)本。全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)大鼠血清尿素氮(BUN)和血肌酐

3、(Scr)，觀察腎功能變化。取各組大鼠腎組織行蘇木素伊紅染色(HE)和馬松染色(Masson)，光鏡下觀察腎臟病理變化;免疫組化檢測(cè)腎組織中SnoN、TGF-β1、Smad3、Smad6蛋白的表達(dá)，Westernblot檢測(cè)SnoN蛋白的表達(dá)水平。
　　 結(jié)果:
　　 (1)各組大鼠一般情況:與正常組和對(duì)照組大鼠相比，模型組大鼠活力明顯減退，精神萎靡，體重下降，攝食和飲水量減少，蜷縮成團(tuán)，脫毛明顯，并出現(xiàn)腹水等癥狀，田七

4、組大鼠上述情況較模型組明顯改善。
　　 (2)各組大鼠24小時(shí)尿蛋白定量結(jié)果:模型組尿蛋白排泄量顯著高于正常組(P＜0.01);與模型組相比，田七組尿蛋白排泄量均明顯減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。
　　 (3)各組大鼠生化檢測(cè)結(jié)果:模型組大鼠的BUN、Scr均顯著高于正常組(P＜0.01);與模型組相比，田七組BUN、Scr有所降低（P＜0.05）。
　　 (4)各組大鼠腎臟外觀及病理結(jié)果:正常組和對(duì)照

5、組大鼠腎臟外觀正常，光鏡下可見正常結(jié)構(gòu)腎小球和腎小管，與正常組相比，模型組大鼠腎臟腫大，顏色蒼白，質(zhì)地變硬。腎臟剖面，模型組的腎臟整體呈缺血狀，以腎皮質(zhì)為重，顏色暗紅，質(zhì)地粗糙變硬，部分有囊腫和瘢痕形成。光鏡下腎小球系膜細(xì)胞增生，腎小球系膜區(qū)增寬，球囊壁黏連;部分腎小球有新月體形成，出現(xiàn)局灶硬化;病變腎小球周圍的近曲小管上皮細(xì)胞腫脹，腎小管萎縮，腎小管腔內(nèi)可見蛋白管型;腎間質(zhì)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，腎間質(zhì)纖維化;。而田七組的腎臟病理改變明顯輕于模

6、型組;與模型組比較，田七組腎小球硬化指數(shù)及腎間質(zhì)損傷分?jǐn)?shù)明顯降低（P＜0.01）。
　　 (5)各組大鼠腎組織免疫組化檢測(cè)結(jié)果:與正常組比較，模型組SnoN蛋白表達(dá)顯著下調(diào)（P＜0.01），TGF-β1、Smad3蛋白表達(dá)顯著上調(diào)（P＜0.01），Smad6蛋白表達(dá)顯著下調(diào)（P＜0.01）;與模型組比較，田七組腎組織SnoN蛋白表達(dá)顯著上調(diào)(P＜0.01)，TGF-β1、Smad3蛋白表達(dá)顯著下調(diào)（P＜0.01），Smad6蛋白

7、表達(dá)顯著上調(diào)（P＜0.01）。
　　 (6)各組大鼠腎組織Westernblot檢測(cè)結(jié)果:與正常組比較，模型組腎組織SnoN蛋白表達(dá)顯著減少（P＜0.01）;與模型組比較，田七組腎組織SnoN蛋白表達(dá)明顯增加（P＜0.01）。
　　 結(jié)論:
　　 (1)田七注射液可以降低ADR腎纖維化大鼠BUN、Scr水平，減少尿蛋白，改善腎臟病理損傷，對(duì)腎臟有保護(hù)作用
　　 (2)田七注射液可能是通過上調(diào)SnoN、Sm