紅霉素對博來霉素誘導的肺纖維大鼠肺組織TGF-β-Smad信號通路的影響.pdf

1、目的：本研究旨在通過紅霉素對TGF-β/Smad信號通路的調控，探討紅霉素是否對成纖維細胞的增殖轉型有直接的抑制作用及其可能的機制。
　　方法：健康雄性SD大鼠（清潔級）60只，隨機分為5組。分別為鹽水對照組(A組)、博來霉素組(B組)、博來霉素+紅霉素預處理組(C組)、博來霉素十紅霉素同時處理組(D組)、博來霉素+紅霉素后處理組(E組)。B組、C組、D組、E組均以博來霉5mg/kg一次性氣管內給藥建立肺纖維動物模型；A組以同樣的

2、方法一次性氣管內注入等體積的生理鹽水；C組、D組、E組分別在博來霉素給藥的前三天、當天、后七天開始以紅霉素100mg/kg每日灌胃，而A組和B組分別每日灌胃等體積的生理鹽水。各組動物大鼠在造模14d、28d分兩次取材，每次各組隨機處死6只，共30只。肺組織HE染色和Masson染色電鏡觀察肺泡炎和肺纖維化改變；堿性水解法測定肺組織羥脯氨酸(Hyp)的含量；應用免疫組織化學技術(SP法)和 RT-PCR法分別檢測各組大鼠肺組織中轉化生長因

3、子-β1(TGF-β1)、Smad3、Smad7、α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)蛋白及mRNA的表達。
　　結果：①肺組織病理學結果顯示A組大鼠肺組織未見肺泡間隔增寬和間質炎癥，也無纖維化區(qū)和蜂窩狀改變；B組第14d肺泡腔內能看到較多炎性細胞浸潤，纖維化區(qū)出現(xiàn)，有膠原沉積，肺組織結構破壞；第28d時肺泡炎癥明顯減輕，嚴重纖維化形成，大量膠原沉積，肺組織結構嚴重破壞。紅霉素各治療組肺泡炎和纖維化程度較模型組各相應時間點均有不同程度

4、的減輕。②與A組比較，14d、28d時B組大鼠肺組織Hyp含量明顯增加，以28d時含量最高。C、D、E各組與A組比較羥脯氨酸含量有不同程度的增加，但是不及B組；與B組比較，C、D、E各組羥脯氨酸含量均有降低，差異有統(tǒng)計學意義，以C組降低明顯，其次為D組和E組，兩者比較差異無統(tǒng)計學意義。③免疫組化和RT-PCR結果：A組TGF-β1、smad3和α-SMA都有少量表達，而 B組顯著增加，紅霉素各治療組三者均較模型組有不同程度減低，且差異有