激素調(diào)控矮牽牛離體再生花瓣的研究.pdf

1、花發(fā)育是植物生長發(fā)育的關(guān)鍵過程，花的形成和發(fā)育一直是人們研究的熱點。通過對擬南芥等模式植物的研究，人們總結(jié)出了五條開花途徑(光周期促進途徑、春化促進途徑、自主促進途徑、GA促進途徑和成花抑制途徑)和調(diào)控花器官形成的ABC模型。在花的形成和發(fā)育過程中激素有著重要的調(diào)控作用。關(guān)于赤霉素對開花的調(diào)控作用已有較深入的研究，然而對于細胞分裂素和生長素通過信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑調(diào)控花發(fā)育的分子機理研究較少。對花葉千年木、風信子、水稻、擬南芥等植物的離體器官再

2、生的研究結(jié)果表明，生長素和細胞分裂素參與對花器官發(fā)育的調(diào)控。 本研究以模式植物矮牽牛(Petunia hybrida)為實驗材料，建立了激素調(diào)控的花瓣離體再生系統(tǒng)。本系統(tǒng)選取單核晚期(花粉時期)的花瓣下部1/3部分為外植體，在施加0.2 mg/L6-BA和0.8 mg/L IAA的培養(yǎng)基中培養(yǎng)直接再生花瓣獲得成功。再生花瓣主要位于外植體的遠軸面，有片狀花瓣和筒狀花冠兩種形態(tài)；少數(shù)位于近軸面，為花瓣突起?；ò晏禺惐磉_基因EPF1的

3、啟動子驅(qū)動GUS表達的分析進一步證實了再生器官為花瓣。形態(tài)學(xué)觀察和組織細胞學(xué)分析的結(jié)果表明，激素誘導(dǎo)了花瓣再生部位細胞的脫分化。半定量RT-PCR．及mRNA原位雜交分析的實驗結(jié)果表明，激素提高了花瓣決定基因GREEN PETL(GP)的表達并起始了花分生組織特征基因ABERRANR LEAFANDFLOWER(ALF)的表達。ALF表達的起始標志著花瓣組織細胞脫分化并進入花分生組織狀態(tài)，并由GP調(diào)控重新分化形成花瓣。依據(jù)上述結(jié)果我們推