矮牽?；ㄋ幣囵B(yǎng)再生體系的建立.pdf

1、本試驗以五個不同基因型的矮牽牛品種為試材，在總結花蕾外部形態(tài)與小孢子發(fā)育時期關系的基礎上，著重對矮牽?；ㄋ幣囵B(yǎng)中的污染問題和影響矮牽?；ㄋ幣囵B(yǎng)中愈傷組織形成的主要因素如材料基因型、培養(yǎng)基中的激素種類和濃度、蔗糖濃度、活性碳濃度及低溫和高溫處理等問題進行了系統(tǒng)的研究與探討。同時，對分化培養(yǎng)基、長苗培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基進行了篩選并對培育出的花粉植株進行了倍性鑒定。主要結果如下： 小孢子發(fā)育時期與花蕾長度沒有必然聯(lián)系，而花蕾外部形態(tài)與小

2、孢子發(fā)育時期存在一定的對應關系?；ò晡⒙丁贻嗟乳L或瓣稍長、花藥綠黃色飽滿的花蕾，多數(shù)小孢子處于雙核期，為矮牽牛花藥培養(yǎng)的最佳時期。1mol/L HCl 1min+75％酒精30sec+0.1％升汞8min對花蕾的消毒效果最好。 誘導培養(yǎng)基：供試的五個基因型中，材料A103沒有誘導出愈傷組織，其余四種基因型的愈傷組織誘導率相差很大，但在Nitsch+0.2mg/L 2,4-D+0.5mg/L NAA+0.2 mg/L6-BA的誘

3、導率均達到最高；添加9％的蔗糖有利于愈傷組織的誘導；適宜的活性炭濃度為0.5g/L；將花蕾在4℃下低溫預處理48～72h有助于提高愈傷組織誘導率；給予33℃的高溫處理24h最有利于愈傷組織的誘導。隨著接種密度的增大，愈傷組織的誘導率逐漸增加。但接種密度過大，污染機率相應增加，故認為適宜的接種密度為10枚/皿。 分化、長苗和生根培養(yǎng)基：MS+3mg/L 6-BA為最佳的分化培養(yǎng)基，其愈傷組織分化率為40.63％，MS+0.2mg/

4、L IBA+3mg/L 6-BA的分化率也相對較高，為33.33％；培養(yǎng)基MS+KT0.5+IAA0.2長苗效果最好，不僅植株健壯而且生長迅速，MS+KT0.1+IAA0.2雖然植株也很健壯，但生長緩慢；培養(yǎng)基1/2MS+IBA0.5最易生根，生根率達97.22％，根粗壯，適宜作根尖鑒定，1/2MS+IBA0.2生根率為92.5％，根較粗，側根多，適于移栽。 花粉植株的倍性鑒定：培育出的38株花粉植株中有37株為二倍體，1株為三