越桔離體再生及其再生過程的組織學(xué)研究.pdf

1、本試驗(yàn)以野生越桔子葉、胚軸和葉片為外植體進(jìn)行越桔不定芽再生體系的研究，并在此基礎(chǔ)上進(jìn)行越桔再生的組織學(xué)研究。得出結(jié)果如下：
　　1.不定芽的誘導(dǎo)培養(yǎng):以MS、WPM、1/2MS和1/4MS為基本培養(yǎng)基，以越桔葉片、子葉和胚軸為外植體進(jìn)行不定芽的誘導(dǎo)，發(fā)現(xiàn)鹽濃度較低的WPM培養(yǎng)基最適于越桔不定芽的再生;子葉外植體的不定芽誘導(dǎo)率高于胚軸和葉片外植體，達(dá)97.9％。細(xì)胞分裂素以TDZ效果最好。生長素NAA和IBA的添加能明顯提高愈傷組織

2、誘導(dǎo)率，但卻顯著降低了不定芽分化率。子葉不定芽誘導(dǎo)最佳培養(yǎng)基為WPM+0.5 mg·L-1TDZ，2％蔗糖，PH5.8±0.2;胚軸不定芽誘導(dǎo)最佳培養(yǎng)基與子葉相同;葉片不定芽誘導(dǎo)最佳培養(yǎng)基為WPM+0.1 mg·L-1TDZ。接種方式為子葉和葉片近軸面向上擺放，胚軸切為0.5 cm橫放。
　　2.繼代培養(yǎng):不定芽誘導(dǎo)形成后在降低TDZ濃度的WPM培養(yǎng)基上經(jīng)有效苗培養(yǎng)，不定芽得以快速伸長生長;當(dāng)苗長至3.0 cm左右時(shí)，切取單芽莖段

3、繼代，繼代培養(yǎng)基為WPM+0.01 mg·L-1TDZ+0.5 mg·L-1BA，腋芽分化率為89.7％，增殖系數(shù)為5.1。
　　3.生根培養(yǎng):試管內(nèi)生根以蛭石為培養(yǎng)基固相支持物，1/2WPM液體培養(yǎng)基添加NAA和IBA混合生長素，生根效果最佳，生根率達(dá)87.7％，平均生根數(shù)為8.0，平均根長為2.0 cm;試管外生根以高濃度NAA速蘸法最好，生根率達(dá)69.6％，平均生根數(shù)為6.9，平均根長為1.6 cm。
　　4.組織學(xué)觀