大花蕙蘭組培體系的建立及轉(zhuǎn)耐寒基因ICE1的研究.pdf

1、大花蕙蘭是近年來十分流行的花卉，有很高的商業(yè)價(jià)值。但因其傳統(tǒng)栽培的周期長，常規(guī)分株繁殖率低等因素，很難滿足規(guī)模化生產(chǎn)的需要。本試驗(yàn)通過探索大花蕙蘭組織培養(yǎng)來加快其繁殖速度，提高繁殖系數(shù)，以解決市場供不應(yīng)求的問題，也為工廠化生產(chǎn)提供技術(shù)依據(jù)。另外，由于大花蕙蘭原產(chǎn)于熱帶和亞熱帶地區(qū)，喜歡溫?zé)岬臍夂?，而我國東北地區(qū)特別是黑龍江省冬季異常寒冷，這些氣候條件給大花蕙蘭的育種和栽培帶來很大的局限性。因而研究并提高大花蕙蘭的耐寒性具有重要的理論意義

2、和現(xiàn)實(shí)意義。ICEl是一轉(zhuǎn)錄激活因子，在常溫處于不活躍狀態(tài)，當(dāng)受到低溫刺激后被激活，結(jié)合到無CRT/DRE的CBF基因的啟動(dòng)子上，誘導(dǎo)CBF表達(dá)，CBF轉(zhuǎn)錄因子再結(jié)合其下游一系列COR啟動(dòng)子的核心序列CRT/DRE元件上，使它們表達(dá)，進(jìn)而提高植物抵抗脅迫環(huán)境的能力。本研究從擬南芥的RNA中克隆到ICEl，連上CaMV35S啟動(dòng)子構(gòu)建成植物表達(dá)載體pCAMBIA1300-35S-ICEl-poly，通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)的方法轉(zhuǎn)化大花蕙蘭。經(jīng)過抗