正己烷對(duì)卵巢雌、孕激素合成干擾及其機(jī)制研究.pdf

1、目的：
　　 正己烷(n-Hexane)是工業(yè)上廣泛使用的一種有機(jī)溶劑，其對(duì)女(雌)性生殖內(nèi)分泌的干擾作用近年來引起人們高度關(guān)注。研究并了解正己烷對(duì)卵巢顆粒細(xì)胞性激素合成的影響及其可能的分子機(jī)制對(duì)于正己烷職業(yè)危害的防治，尤其是對(duì)職業(yè)女工生殖危害的防治機(jī)制研究具重要意義，也必將為正己烷的毒作用機(jī)制研究提供重要參考。
　　 方法：
　　 本實(shí)驗(yàn)研究主要通過正己烷對(duì)卵巢顆粒細(xì)胞性激素合成過程中三大重要環(huán)節(jié)的影響，對(duì)其作

2、用及其可能機(jī)制展開體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)研究。
　　 1.體內(nèi)染毒實(shí)驗(yàn)：48只成年雌性Wistar大鼠按體重分層隨機(jī)分為4組，靜式吸入染毒。染毒劑量分別為：0、3.01、9.03、27.1g/m3。每天4小時(shí)，每周6天，持續(xù)6周。染毒結(jié)束后，觀察動(dòng)情周期，待大鼠進(jìn)入動(dòng)情期，取血制備血清測(cè)定激素水平；取卵巢，提取顆粒細(xì)胞作體外培養(yǎng)，觀察不同劑量組正己烷染毒后大鼠卵巢顆粒細(xì)胞培養(yǎng)液中E2和P4的變化，并測(cè)定顆粒細(xì)胞StAR、P450scc和P4

3、50arom mRNA表達(dá)。
　　 2.體外染毒實(shí)驗(yàn)：28天齡的未成年健康雌性Wistar大鼠，每只皮下注射孕馬血清促性腺激素(PMSG)100IU。48小時(shí)后提取顆粒細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)。采用正交設(shè)計(jì)表L16(45)設(shè)計(jì)正交實(shí)驗(yàn)，研究不同染毒劑量2，5-己二酮(0、20、40、60 mmol/L)和染料木黃酮(0、15、30、60 umol/L)對(duì)卵巢顆粒細(xì)胞培養(yǎng)液中E2和P4的變化，并測(cè)定顆粒細(xì)胞StAR、P450scc和P45

4、0arom mRNA表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 大鼠靜式吸入染毒實(shí)驗(yàn)結(jié)果
　　 1.各劑量組大鼠動(dòng)情周期呈明顯縮短趨勢(shì)(p＜0.05)，其中高劑量組大鼠動(dòng)情期、動(dòng)情間期明顯縮短，與對(duì)照組比較，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)。
　　 2.大鼠血清E2、P4隨染毒劑量的增加呈下降趨勢(shì)，但與對(duì)照組相比差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)。
　　 3.體內(nèi)染毒可降低各劑量組卵巢顆粒細(xì)胞體外分泌E2水平以及高

5、劑量組體外分泌P4水平(P＜0.05)，而刺激低劑量組P4分泌顯著升高(P＜0.05)。
　　 4.體內(nèi)染毒可抑制高劑量組的StAR mRNA和P450scc mRNA表達(dá)，而低劑量組的StAR mRNA和P450scc mRNA表達(dá)強(qiáng)度顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)。
　　 5.各劑量組P450arom mRNA表達(dá)強(qiáng)度均低于對(duì)照組，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 卵巢顆粒細(xì)胞體外染毒實(shí)驗(yàn)結(jié)果

6、>　　 1.低劑量2,5-HD組顆粒細(xì)胞培養(yǎng)液中E2和P4的含量顯著性升高(P＜0.05)，而中、高劑量組的E2含量呈下降趨勢(shì)，與對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 2.各劑量Gen組均能抑制顆粒細(xì)胞體外分泌E2和P4(P＜0.05)。2,5-HD和Gen對(duì)卵巢顆粒細(xì)胞分泌E2的影響存在交互作用，而對(duì)P4分泌不存在交互作用。
　　 3.低劑量2,5-HD組StAR mRNA和P450scc mRNA的表

7、達(dá)高于對(duì)照組(P＜0.05)。
　　 4.低劑量2,5-HD組P450arom mRNA表達(dá)強(qiáng)度高于對(duì)照組(P＜0.05)，而中、高劑量2,5-HD組P450arom mRNA表達(dá)強(qiáng)度均低于對(duì)照組(P＜0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1.正己烷具有明顯的雌性生殖內(nèi)分泌干擾作用，在本實(shí)驗(yàn)條件下表現(xiàn)為：大鼠動(dòng)情周期的異常變化(靜式吸入染毒6周后，高劑量組大鼠動(dòng)情期、動(dòng)情間期明顯縮短)、卵巢顆粒細(xì)胞性激素合成功能障礙

8、。
　　 2.正己烷可通過影響卵巢顆粒細(xì)胞雌、孕激素合成過程中StAR蛋白、P450scc和P450arom的表達(dá)進(jìn)而干擾雌、孕激素的合成。這可能是正己烷的生殖內(nèi)分泌干擾作用的重要機(jī)制之一。
　　 3.正己烷可能存在“毒物低劑量興奮效應(yīng)”(3.01g/m3，靜式吸入染毒6周)，但其結(jié)果及確切機(jī)制尚有待進(jìn)一步觀察。但較大劑量正己烷對(duì)孕激素合成水平的明顯抑制作用則不容忽視。
　　 4.大豆異黃酮對(duì)于低劑量正己烷顆粒細(xì)