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文檔簡介
1、 目的:應(yīng)用腹腔注射環(huán)磷酰胺(CTX)造成小鼠骨髓抑制模型,通過觀察用藥前后骨髓抑制小鼠的有核細(xì)胞數(shù)的變化,骨髓細(xì)胞造血因子粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF) 、促血小板生成素(TPO)、促紅細(xì)胞生成素(EPO)的表達(dá)水平及骨髓抑制小鼠集落粒單系造血祖細(xì)胞(CFU-GM)、巨核系造血祖細(xì)胞(CFU-Meg)、紅系造血祖細(xì)胞(CFU-E/BFU-E)集落產(chǎn)率的變化,探討精元康膠囊對骨髓抑制小鼠造血細(xì)胞增殖功能影響的作用機(jī)制,為精元康膠囊的
2、臨床運(yùn)用提供可靠的科學(xué)依據(jù)。
方法:選用清潔級健康雄性昆明種( KM)小鼠,鼠齡6-8 W,體重18-22 g,根據(jù)體重將小鼠隨機(jī)分為正常組、模型組、貞芪扶正膠囊組、利可君片組、精元康膠囊高劑量組、精元康膠囊中劑量組、精元康膠囊低劑量組。前3日每日上午注射環(huán)磷酰胺100 mg/kg(正常組注射等量生理鹽水),下午灌胃不同藥物:正常組和模型組0.5%羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)20 ml/kg灌胃、利可君組32 mg/20
3、ml/kg灌胃、貞芪扶正膠囊組3 g/20 ml/kg灌胃、精元康高劑量組4 g/20 ml/kg灌胃、精元康中劑量組3 g/20 ml/kg灌胃、精元康低劑量組2 g/20 ml/kg灌胃。3d后,僅在下午灌胃不同藥物。造模后第8天,斷頸處死小鼠,取小鼠股骨用生理鹽水沖出骨髓細(xì)胞,制備單細(xì)胞懸液。取部分單細(xì)胞懸液,用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器鏡下計(jì)數(shù)骨髓有核細(xì)胞數(shù)(BMC)。取小鼠BMC懸液的上清液,用酶標(biāo)免疫試劑盒測定小鼠骨髓細(xì)胞中 G-CSF、
4、TPO 、EPO 的含量;并用體內(nèi)植入擴(kuò)散盒法培養(yǎng)三系造血祖細(xì)胞,在倒置顯微鏡下計(jì)數(shù)其集落數(shù)。
結(jié)果:①精元康膠囊高劑量組升高骨髓有核細(xì)胞數(shù)的效果最為明顯,精元康膠囊中劑量組升高骨髓有核細(xì)胞數(shù)的效果也比較明顯,表明一定劑量的精元康膠囊能在一定程度上促進(jìn)骨髓造血功能的恢復(fù)。酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,精元康膠囊對骨髓抑制小鼠G-CSF、TPO、EPO調(diào)控的影響呈現(xiàn)出劑量依賴性,尤其精元康膠囊高劑量能明顯改善骨髓抑制小鼠的造血功能,使
5、其向正常水平恢復(fù)。②體內(nèi)造血祖細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)果顯示,精元康膠囊各劑量組均能提升骨髓抑制小鼠三系祖細(xì)胞(CFU-GM、CFU-Meg 、CFU-E/BFU-E)的集落產(chǎn)率。其中精元康膠囊高劑量組效果更加明顯。表明一定濃度的精元康膠囊對骨髓抑制有一定的改善作用。此作用可能與體液因子有關(guān),也可能是通過刺激機(jī)體產(chǎn)生能影響三系造血祖細(xì)胞增殖與分化的某些生物活性物質(zhì)而發(fā)揮作用。
結(jié)論:精元康膠囊可明顯改善CTX所造成的小鼠骨髓抑制,顯著增加
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