國槐種子形態(tài)變異與品種-無性系SRAP分子識別研究.pdf

1、國槐(Sophora japonica L.)，小到中等喬木，是我國優(yōu)良的材用、藥用、食用和觀賞樹種。國槐自然分布于中國、朝鮮和日本，廣泛引種栽培于世界其他各地。
　　本研究在國槐浙江杭州、湖北孝感、陜西西安、陜西咸陽、北京、河南濮陽和山東泰安等7個群體中，各隨機抽取130個單株作為采種樣株，對其種子的長、寬、長寬比、表面積、體積和千粒重等6個性狀作了觀測分析，采用巢氏設計進行了方差分析，相關(guān)性和聚類等統(tǒng)計分析，分析不同性狀的表型

2、變異及規(guī)律，試圖為國槐遺傳多樣性研究提供量化指標，為國槐遺傳資源評價、保存和利用提供依據(jù)。以北京市豐臺苗圃基地收集保存的國槐品種和無性系為試驗材料，旨在探討國槐DNA的提取和SRAP-PCR的最佳反應體系，為進一步開展國槐遺傳資源的SRAP分析，在分子水平上鑒別品種與無性系及其親緣關(guān)系提供科學依據(jù)。
　　主要研究結(jié)果如下：
　　1國槐種子的形態(tài)性狀存在不同程度的變異，變異系數(shù)范圍為5.24％-14.57%；6個表型性狀在群體

3、間和群體內(nèi)都達到了極顯著水平；6個性狀的平均表型分化系數(shù)為53.11%，表明群體間遺傳變異略高于群體內(nèi)；種子形態(tài)性狀與地理緯度和經(jīng)度的相關(guān)程度較低。利用分析結(jié)果顯示7個國槐群體可以分為3類：1）泰安群體；2）湖北孝感和北京群體；3）浙江杭州，西安，咸陽和河南濮陽聚為一類。研究發(fā)現(xiàn)，國槐種子沒有明顯的地理變異規(guī)律，可能是長期地人為栽培造成的，也可能是由于采樣的不全面或不連續(xù)性造成的。
　　2采用正交試驗確定了國槐的最佳SRAP-PC

4、R反應體系（20 uL）：Taq聚合酶1.5 U，dNTPs0.30 mmol/L，模板DNA90 ng，Mg2+2.0 mmol/L，引物0.3 umol/L，ddH2O補至20 uL。
　　3從120對引物組合中，篩選出12對PCR產(chǎn)物條帶清晰、多態(tài)性高的引物組合，進行國槐品種與無性系的親緣關(guān)系的分子識別研究。12對引物PCR擴增的條帶大多集中在100bp-2000bp之間。在所獲得的430條擴增條帶，415條具有多態(tài)性位點，

5、多態(tài)性位點比率為96.60%，其中4對引物的多態(tài)性達到了100%。試驗結(jié)果還表明，SRAP能檢測國槐品種及無性系的多個遺傳位點。采用Em9-Me12引物組合可以很好的區(qū)分國槐的不同品種及無性系，并建立了國槐的SRAP指紋圖譜。
　　4國槐品種和無性系的遺傳相似系數(shù)（SM）為0.68-0.89，平均相似系數(shù)為0.73，說明國槐品種和無性系間的相似性比較高，遺傳基礎比較窄?？赡苁怯捎趪痹耘鄽v史悠久，長期的人工栽培造成的，也有可能是品

6、種選擇和無性系選擇的范圍比較小，造成了國槐品種和無性系間的遺傳距離比較小?；谶z傳相似系數(shù)SM，按非加權(quán)配對算術(shù)平均法對國槐品種和無性系進行聚類分析，在相似系數(shù)0.76處，將其分為4類，第二類為國槐4號和國槐35號；第三類為蝴蝶槐（S. japonica var.oligophylla Franch）；第四類為龍爪槐（S. japonica var. pendula Loud.），曹州2號（S. japonica‘Caozhou2’）和