肺癌血管生成擬態(tài)的研究及與凋亡關(guān)系的初步探討.pdf

1、目的:研究血管生成擬態(tài)(Vaseulogenic Mimicy VM)在肺癌中的表達(dá)情況,并分析其與肺癌不同臨床病理參數(shù)及預(yù)后的關(guān)系。研究凋亡在VM形成中的作用,確定有意義的凋亡指標(biāo)。初步探討VM及抗凋亡作為新的肺癌治療靶點(diǎn)的臨床意義。
　　 內(nèi)容及方法:收集本院病理科2002-2008年肺癌手術(shù)標(biāo)本HE切片500例,高倍鏡下初步篩選VM陽性病例。運(yùn)用免疫組化和組織化學(xué)雙重染色技術(shù)檢驗(yàn)VM陽性率?？ǚ綑z驗(yàn)VM陽性率在各臨床病理參

2、數(shù)間表達(dá)的差異。單因素及多因素生存分析VM對(duì)患者預(yù)后的影響。運(yùn)用免疫組化染色分析各凋亡指標(biāo)在VM陽性組及陰性組間的表達(dá)差異。Tunel法檢測(cè)凋亡指數(shù)在VM陽性組與陰性組的差異。
　　 結(jié)果:
　　 1.光鏡下觀察HE切片篩選符合VM判斷標(biāo)準(zhǔn)病例從500例肺癌患者中挑選出90例具有豐富的微循環(huán)血供,且具有VM及馬賽克血管特征,臨床及隨訪資料完整的病例。其中男性65例,女性25例；年齡25歲-78歲,中位年齡56.5歲；腫瘤

3、直徑0.5cm-10cm,病理類型鱗癌49例,腺癌7例,小細(xì)胞癌23例,類癌4例,大細(xì)胞癌7例；外科病理學(xué)分期Ⅰa期17例,Ⅰb期14例,Ⅱa期4例,Ⅱb期22例,Ⅲa期13例,Ⅲb期18例,Ⅳ期2例。有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移34例。
　　 2.CD31,PAS雙重染色技術(shù)確定90例病例中VM的表達(dá)情況經(jīng)雙重染色分析,90例微循環(huán)豐富的患者中VM陽性為32例,陽性率35.6％。另一方面,從500例肺癌角度計(jì)算陽性率為6.4％。VM陽性組中,

4、遠(yuǎn)處臟器轉(zhuǎn)移率81.25％,VM陰性組遠(yuǎn)處臟器轉(zhuǎn)移率55.2％,兩組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=4.678,P=0.031)。T1期VM陽性率52.2％,T2期41.9％,T3+T4期19.4％,三者差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=7.401,P=0.025)。VM與其他臨床病理參數(shù)無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 3.90例患者生存分析結(jié)果將全部90例病例以VM分作兩組,即VM陽性組和VM陰性組,Kaplan-Meier單因素生存分析兩組的生存率

5、,并行Log-rank檢驗(yàn),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(VM陽性組和VM陰性組中位生存期分別為18個(gè)月和25個(gè)月,Log-Rank=5.955,P=0.015)；Cox多因素生存分析結(jié)果顯示淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(OR=0.512,P=0.023)和術(shù)后遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移(OR=0.139,P=0.000)是肺癌患者獨(dú)立的危險(xiǎn)因素。
　　 4.各凋亡指標(biāo)在VM陽性組與VM陰性組的表達(dá)在VM陽性組與陰性組,P53蛋白陽性率分別為53.1％和54.8％,兩組差異無

6、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)；Bcl-2蛋白陽性率分別為25％和54.8％,兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=5.857,P=0.016):Cyt-c蛋白陽性率分別為46.9％和38.7％,但兩組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)；Caspase-8蛋白陽性率分別為31.3％和9.7％,兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=4.474,P=0.034):Caspase-9蛋白陽性率分別為21.9％和9.7％,兩組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)；Caspa

7、se-3蛋白陽性率分別為59.4％和32.3％,兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(X2=4.661,P=0.031)。Tunnel法檢測(cè)到VM陽性組凋亡指數(shù)為(4.06±1.638)％,VM陰性組凋亡指數(shù)(2.47±1.663)％。二者差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.805.0=0.008)。
　　 結(jié)論：
　　 1.肺癌組織中存在血管生成擬態(tài),且VM與腫瘤細(xì)胞血道轉(zhuǎn)移及預(yù)后明顯相關(guān),VM陽性組的肺癌患者預(yù)后較VM陰性組差；同時(shí)VM與腫

8、瘤的T分期有關(guān),T分期越低,VM的陽性率越高,推斷VM是發(fā)生在惡性腫瘤生長早期的事件。但VM與腫瘤的其他病理特征及患者的臨床特征無關(guān)。
　　 2.凋亡促進(jìn)蛋白及凋亡指數(shù)在VM陽性組較陰性組高表達(dá),凋亡抑制蛋白在VM陽性組低表達(dá),提示凋亡對(duì)于VM的形成具有一定的促進(jìn)意義。
　　 3.對(duì)于VM患者,靶向治療應(yīng)同時(shí)考慮血管內(nèi)皮細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞兩方面。此外,如果凋亡成為肺癌VM形成的始動(dòng)因子,那么拮抗凋亡的抗體可望成為像EGFR抑